Goût préférence Essai pour adultes<em> Drosophila</em
Summary
Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.
Abstract
Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival. The most obvious application of these chemosenses is to be able to distinguish good food sources from potentially dangerous food sources. Gustation requires physical contact with a chemical compound which is able to signal through taste receptors that are expressed on the surface of neurons. In insects, these gustatory neurons can be located across the animal’s body allowing taste to play an important role in many different behaviors. Insects typically prefer compounds containing sugars, while compounds that are considered bitter tasting are avoided. Given the basic biological importance of taste, there is intense interest in understanding the molecular mechanisms underlying this sensory modality. We describe an adult Drosophila taste assay which reflects the preference of the animals for a given tastant compound. This assay may be applied to animals of any genetic background to examine the taste preference for a desired soluble compound.
Introduction
Les animaux utilisent chemosensation pour distinguer des conditions avantageuses en dehors des conditions désavantageuses. Cette perception peut être critique pour des choses telles que la détermination de la meilleure source alimentaire, en évitant les substances toxiques ou de déterminer le meilleur partenaire d'accouplement 1. Chemosensation est souvent divisée en deux composants sensoriels: sens olfactif et les sens gustatifs. Une principale caractéristique distinctive de ces sens est que l'olfaction (odorat) est utilisé pour échantillonner l'environnement chimique gazeux environnant tout gustation (goût) nécessite un contact physique avec un substrat non volatile. Les deux modalités sensorielles stimulent les réponses neurologiques qui sont traités et décodés dans le cerveau pour produire le comportement attractives ou répulsives appropriée 2. Ces sens sont donc essentiels pour la survie des animaux.
La mouche des fruits Drosophila melanogaster est un organisme modèle qui continue de croître en popularité pour une utilisation dans comprendrement comment les insectes perçoivent l'odeur et le goût. Les mouches des fruits offrent d'énormes avantages par rapport aux autres systèmes de modèles en raison de la richesse des outils génétiques disponibles pour la dissection des voies moléculaires, cellulaires et comportementales. Le travail au cours des 15 dernières années a été particulièrement important dans la caractérisation des identités cellulaires spécifiques, des récepteurs neuronaux, et les mécanismes impliqués à la fois l'odeur et le goût de signalisation. Maintenant, la puissance de la génétique chez la drosophile est utilisée pour élucider la façon dont ces processus sont codés au neurone unique et un seul circuit niveau 3-6. Par conséquent, les essais qui fournissent facilement marqué des lectures altérations des voies sensorielles sont essentielles à l'avance continue de ces champs.
Alors que beaucoup est connu sur la façon dont les signaux olfactifs sont codées et traitées dans le cerveau, beaucoup moins, on entend à propos des mécanismes similaires dans la voie de gustatifs. Nous décrivons ici un protocole qui peut être utilisé pour déterminer le goût préférenCE chez la drosophile. Drosophila, comme les mammifères, préfèrent généralement composés de goût sucré , par opposition à des composés de goût amer. Toute combinaison de ces sources de nourriture peut être utilisée dans cette conception expérimentale pour déterminer comment des altérations génétiques connues affectent le choix du goût. En outre, les stratégies d'intervention pharmacologiques peuvent être évalués de manière similaire pour leurs effets sur la préférence du goût des animaux. La facilité et la flexibilité de ce test, il est un paradigme utile pour comprendre la nature de la perception gustative chez la drosophile.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nous avons décrit un protocole simple mais efficace pour déterminer la préférence de goût chez la drosophile. Les versions de ce test sont couramment utilisés dans des expériences pour déterminer les contributions des récepteurs gustatifs (Grs) pour percevoir les différentes qualités (amer, sucré, acide, salé et umami) des composés de goût. Le génome de la Drosophile contient environ 60 gènes qui codent pour 68 récepteurs gustatifs identifiés par l' épissage alternatif 8,9….
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We would like to thank members of the Tessier lab for critical reading of this manuscript and helpful suggestions during the preparation of this protocol.
Materials
| Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Blue 1 and Red 40, Propylparaben) | McCormick | N/A | |
| Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers | Fisher | 03-395-455 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-20 | |
| Glacial Acetic Acid | Fisher | BP2401-500 | |
| Leica S6 E Stereozoom 0.63x-4.0x microscope | W. Nuhsbaum, Inc. | 10446294 | |
| Petri Dish (100 x 15 mm) | BD Falcon | 351029 | Reuseable if thoroughly washed and dried |
| Quick-Snap Microtubes | Alkali Scientific Inc. | C3017 | |
| Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&C Reds 40 and 3, Propylparaben) | McCormick | N/A | |
| Sucrose | IBI Scientific | IB37160 |
Referências
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