We describe here a reproducible protocol for isolating the mouse circle of Willis.
Церебральный артериальный круг (circulus артериальный Cerebri) или круг Уиллис (КПС) является кровеносной анастомоза окружающих зрительных нервов и гипоталамус, который поставляет кровь к мозгу и окружающих структур. Он был вовлечен в несколько цереброваскулярных расстройств, в том числе церебральной амилоидной ангиопатии (ВГА) -associated васкулопатии, внутричерепного атеросклероза и внутричерепных аневризм. Изучение молекулярных механизмов, лежащих в основе этих заболеваний для идентификации новых мишеней для лекарственных средств для их профилактики требуют животных моделей. Некоторые из этих моделей может быть трансгенными, в то время как другие будут включать в себя изоляцию спинно-сосудистую систему, в том числе метод CoW.The, описанный здесь, пригоден для изоляции коровой в любой линии мыши и обладает значительным потенциалом для скрининга (экспрессию генов, продуцирования белка, посттрансляционные модификации белков, secretome анализ и т.д.) исследования на крупных сосудах cerebro- мышиваскулатура. Он также может быть использован для исследований бывших естественных условиях, путем адаптации системы органов ванны , разработанной для изолированных мыши обонятельных артерий.
Церебральный артериальный круг (circulus артериальный Cerebri), также известный как круг Уиллис (КПС), петля Willisor Уиллис полигона) впервые был описан Томас Уиллис в 1664 Это кровеносная анастомоза, расположенных вокруг зрительных нервов и гипоталамус, который может рассматриваться в качестве центрального узла подачи крови в мозг и окружающих структур. Кровь входит в эту структуру через внутреннюю сонных и позвоночных артерий и она течет из круга с помощью внутренней средней и задней мозговых артерий. Каждая из этих артерий имеет левую и правую ветви по обе стороны круга. Базилярная, пост проходная и переднего общения артерии полный круг (рисунок 1 и рисунок 2). Риск нарушения кровотока в любом из выводных артерий сведено к минимуму путем слияния крови, поступающей в круг из сонной и церебральных артерий, тем самым гарантируя, что достаточное количество крови подают в бдождь. Эта структура также служит в качестве основного маршрута для коллатерального кровотока в тяжелых окклюзионных заболеваниях внутренней сонной артерии.
Несколько типов цереброваскулярных расстройств имеют свое происхождение в корове. Наиболее распространенными являются церебральной амилоидной ангиопатии (САА) -associated васкулопатии, внутричерепная атеросклерозе и внутричерепных аневризм. 1, 2, 3 Эти нарушения могут привести к недостаточной перфузии вследствие вазодилатации, и внутримозговые и / или субарахноидальных кровоизлияний в конечном счете , переводя в ишемических или геморрагических инсультов или , в лучшем случае, транзиторная ишемическая атака. Последние достижения в области диагностических процедур, в том числе нейровизуализации, возможно, в сочетании с ангиографией, позволили диагностировать эти основные цереброваскулярных заболеваний клинически, без необходимости проведения биопсии мозга. Тем не менее, эффективные и конкретные методы лечения (фармакологические или эндоваскулярные) в настоящее время не хватает, и поэтому существует необходимость определить новыемолекулярные мишени.
Идентификация новых мишеней для лекарственных средств для профилактики этих заболеваний у людей потребует животных моделей и способов выделения спинно-сосудистую систему, включая корове. Такие модели должны предоставить доказательства и улики для конкретных изменений, в том числе воспалительных изменений, происходящих в стенках крупных сосудов в животных моделях аневризмы внутричерепных артерий, САК или внутричерепного атеросклероза. 4, 5, 6
Мы создали метод выделения мыши коровой для облегчения исследования воспаления сосудов при болезни Альцгеймера (AD) и связанных с ним заболеваний, таких, как САК. Этот метод выделения корове мыши был разработан для оценки воспалительного экспрессии гена цереброваскулярных во время прогрессирования заболевания. Вместе с обнаружением бета-амилоида осаждения в стенках лептоменингиальной и пиальных артерий, этот метод мог бы сделать его легче удерживатьмина возможная взаимосвязь между воспалительными экспрессии генов в спинно-сосудистой стенки и накопления Ар-пептида. Сосудистая сеть головного мозга, в том числе лептоменингиальной и пиальные в субарахноидальное пространство, является продолжением крупных артерий, образующих круг Уиллиса. Описанный здесь метод может быть использован для выделения корове любого рода мыши и может быть использован для всех типов скрининга (например, экспрессии генов, продуцирования белка и посттрансляционных модификаций белка) на больших сосудах мыши спинно-сосудистую систему .
Мы опишем здесь воспроизводимый протокол для выделения круга Уиллис. Наиболее распространенными цереброваскулярные нарушения, вовлекающие коровой являются CAA-ассоциированной васкулопатии, внутричерепное Атеросклероз и внутричерепных аневризм, все из которых влияют на стенки артер…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана Париж VI университета и грант Pierre Fabre Innovation.
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Sigma-Aldrich | D8537 | |
Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | |
Hardened Fine Iris Scissors | Fine Science Tools | 14090-11 | |
Scissors – Straight / Sharp / Sharp 16.5 cm | Fine Science Tools | 14002-16 | |
Dumont #7b Forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | |
Stereoscopic Zoom Microscope | Nikon | SMZ745T | |
CellBIND Surface 60mm Culture Dish | Corning | #3295 | |
Peristaltic Pump – MINIPULS 3 | Gilson | M312 | |
Pentobarbital Sodique | Ceva Santé Animale | FR/V/2770465 3/1992 |