Открытие человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (hiPSCs) произвела революцию в области регенеративной медицины, обеспечивая приемлемый метод для генерации конкретного пациента стволовых клеток ^1-3. hiPSCs успешно генерируются из различных типов соматических клеток, включая фибробласты ^{4,5, 6,7} кроветворных клеток, почечных эпителиальных клеток из мочи ⁸ и кератиноцитов ^9,10. На сегодняшний день, фибробласты кожи и гемопоэтические клетки представляют собой наиболее часто используемые источники клеток для генерации конкретного пациента ИПСК. Возможно, это связано с тем, что биопсия кожи и сбор крови обычные медицинские процедуры и большие биобанки из пациентов крови или кожи образцов были созданы во многих странах.

В отличие от клеток крови и фибробластов кожи, которые требуют инвазивных методов добычи, кератиноциты представляют собой легко доступный тип клеток для генерации hiPSC. KeratinocytЭС кератин богатые эпителиальные клетки, которые образуют внешний эпидермальный барьер кожи и также найдены в ногти и волосы ^11. В частности, кератиноциты можно найти на внешней оболочки корня (ПРС) волосяных фолликулов, внешний слой клеточной, которая охватывает стержень волоса вместе с внутренней оболочки корня (IRS) клеток ^(12, Рис 1). Как коллекция волосы простая процедура, которая не требует помощи медицинского персонала, это дает возможность для пациентов, чтобы собрать и отправить свои собственные образцы волос в лаборатории, что позволит значительно облегчить сбор образцов пациентов для поколения hiPSC. Кератиноцитов эпидермиса также имеют более высокую эффективность перепрограммирования и более быструю кинетику перепрограммирования фибробластов по сравнению с, добавив к преимуществам использования кератиноциты в качестве исходных клеток для hiPSC поколения ^9,13. Кроме того, hiPSCs также могут быть получены с использованием других клеточных популяций внутри волосяного фолликула,в том числе кожных сосочков клетки, находящиеся в базе волосяного фолликула ^14,15.

Предыдущие доклады поколения IPSC, с помощью волос происхождения клетки часто используют ретровирусные или лентивирусные основе методов перепрограммирования ^9,14,15. Тем не менее, эти вирусные методы вносят нежелательное геномной интеграции иностранных трансгенов во перепрограммирования. Для сравнения, использование Эписомные векторов представляет собой возможно, невирусный метод перепрограммирования генерировать интеграции, свободной ИПСК ^4. Ранее мы уже разработали простой, экономически эффективный и невирусный метод эффективно перепрограммировать кератиноцитов в hiPSCs использованием Эписомные векторы ^13. Здесь мы предлагаем подробный протокол для генерации кератиноцитов, полученных hiPSCs, в том числе при выводе из кератиноцитов сорвал волос, расширение и техническое обслуживание кератиноцитов и последующим перепрограммированием генерировать hiPSCs.