电电机组数估计（MUNE）在小鼠后肢肌肉测量复合肌肉动作电位（CMAP）

该协议被批准，并粘附在美国俄亥俄州立大学的Wexner医学中心的动物护理和伦理准则。 1.动物准备及麻醉在处理小鼠戴上手套。 麻醉小鼠吸入异氟醚和发生在俯卧位。诱导使用3-5％异氟醚和每分钟O 2流量1升麻醉。继诱导麻醉，麻醉维持在2-3％，并每分钟O 2流量1升。 调节O 2流量和异氟烷百分比用于根据动物的疾病状态，年龄，和呼吸率充分麻醉。较小或较弱的动物可能需要适当的麻醉（ 即 1.5-2.5％异氟醚），异氟醚较少。 通过施加光后肢脚掌的压力与物体如钳子证明缺乏戒断反应的确认充分麻醉。; 保持温度在37℃的表面温度用的恒温加温板如温度变化​​可能会影响CMAP大小和持续时间。 应用兽医石油基软膏的眼睛，以防止干燥。监测麻醉观察呼吸率水平并评估以下压力通过钳子施加到脚垫戒断反应。 使用快船待研究后肢清除头发。去除毛发从后肢（S）以进行研究后，轻轻延伸后肢在膝盖处，绑架在臀部和固定到使用胶带的工作表面（ 见图1）。 继CMAP和MUNE录音和麻醉停药，不要让动物无人看管，直到它重新获得足够的意识，以保持胸骨斜卧。不返回到动物的其他动物的公司直到完全恢复。 2。RECORDING设置和设备地方的CMAP和MUNE记录电极如下图如图 1所示。 用两个细环状电极的记录电极。 放置活性（E1）环上的皮肤覆盖在后肢的腓肠肌的近侧部分，在膝关节电极，和在皮肤上的脚的中间跖骨部基准（E2）环形电极。 为了减少阻抗，外套皮肤环状电极底层用凝胶充分饱和残毛和最大化电极 – 皮肤接触。避免电极凝胶的过量施用，因为这可能会导致电极之间的桥梁，可以防止准确地记录。 对于坐骨神经的近端后肢刺激，使用两个绝缘28克单极针作为阴极和阳极。插入该阴极在近端后肢的区域并插入肛德更近侧在皮下组织覆盖骶骨。 避免插入刺激电极过于接近坐骨神经或太深，这将直接伤害坐骨神经或其它结构。 图1示出的电极放置。 为接地电极，放置在对侧后肢或尾部一次性表面电极。 3.数据采集坐骨神经CMAP 通过刺激坐骨神经为0.1毫秒持续时间方波脉冲和强度不等的1-10毫安获得坐骨神经CMAP响应。 获得CMAP响应随刺激强度直到不再增加了响应的幅度。然后，为了确保超最大刺激，增加的刺激，以用于获得一个最大应答的刺激强度的〜120％，将获得的附加响应。如果没有进一步增加我n个CMAP大小，记录这个响应，最大CMAP。 记录基线至峰和峰-峰振幅CMAP以mV（图2）。 平均单运动单位电位（SMUP）尺寸和MUNE计算确定平均单个运动单位电位（SMUP）大小的增量增产技术1。为了获得增量响应，提供0.1毫秒的持续时间最大刺激在1赫兹的频率，同时增加了强度0.03毫安步骤获得最小的全或无响应。获得与0.21毫安和0.70 mA的刺激强度的初步反应。 如果初始响应不与0.21 mA和0.70 mA的刺激强度发生，调整刺激阴极位置更近或远离坐骨神经的位置在近端大腿以减少或增加所需的刺激强度分别。 如果初始我获得ncremental响应与0.21 mA和0.70 mA的之间的刺激强度，并满足下面指出（3.2.2），商店的标准并记录额外的增量而增加刺激强度是通过以下步骤0.03毫安调整，以获得总共9个附加增量是符合既定标准。 在增量响应的测量结果，确保每个增量满足以下条件。 确保增量响应的初始负峰值在时间上显示为CMAP说明的图 2中的阴影部分的最大CMAP响应的负峰值内对齐。 确保每个增量响应是稳定的，没有分馏，通过观察三个重复反应确立。区分实时（叠加在先前记录单位）目视增量响应。 注：每个增量应该是视觉上不同并与前述的反应（图3）放大比较。分析实时允许识别较大振幅（增量值）的反应相比于现有的反应，和归属于背景噪声小的变化可以忽略不计。增量为10甲叠加图示于图4（B和D），以进一步说明这一点。 后目视确认每个增量，确保所测量的振幅差（确认响应振幅的现有响应=振幅差）为至少25μV。 如果增量小于25μV，丢弃和重新测量的响应。记录10增量后的反应，评估增量，以确保每个单独的增量响应的幅度不大于所有十个的增量的总和 （即最终响应的总幅度）的1/3。如果这个条件不满足，重新测量增量响应。 平均10个增量值，得到平均单个马达单元电位（SMUP）振幅的估计（图3）。注意： 图3详细说明了平均SMUP计算的基础，但平均SMUP振幅可以由最终增量响应的整个振幅除以增量的总数来简单地计算（即，10）。 实施例个别SMUP计算（图3中示出）： SMUP 1 =峰 – 峰值增量1的振幅 SMUP 1 = 0.050毫伏 SMUP 2 =（峰 – 峰振幅增量2） – （增量峰 – 峰振幅1） SMUP 2 = 0.150毫伏0.050 MV = 0.100毫伏计算每个后续的递增（最多总共10），并进行平均十个的增量。 计算MUNE由平均SMUP振幅除以最大CMAP波幅（峰 – 峰）（峰到峰）。 （MUNE = CMAP /平均SMUP）。在一些电系统中，SMUP增量测量μV，而CMAP在毫伏一般规定。必要时，转换CMAP和SMUP结果之前MUNE计算类似的单位。