Summary

A remoção do Trace Elements por Óxido de Cupric nanopartículas de urânio<em> In Situ</em> Recuperação sangro água e seu efeito na viabilidade celular

Published: June 21, 2015
doi:

Summary

Production bleed water (PBW) was treated with cupric oxide nanoparticles (CuO-NPs) and cellular toxicity was assessed in cultured human cells. The goal of this protocol was to integrate the native environmental sample into a cell culture format assessing the changes in toxicity due to CuO-NP treatment.

Abstract

Na recuperação in situ (ISR) é o método mais utilizado para a extracção de urânio nos Estados Unidos. Durante ISR, o urânio é lixiviado a partir de um corpo de minério e extraída através de troca iônica. A produção resultante de purga água (PBW) contém contaminantes, tais como arsénio e outros metais pesados. Amostras de PBW de uma instalação de urânio ISR ativo foram tratados com nanopartículas de óxido cúprico (CuO-PN). Tratamento CuO-NP de PBW reduzida contaminantes prioritários, incluindo arsênio, selênio, urânio e vanádio. Ensaio não tratado e CuO-NP PBW tratado foi usado como o componente líquido de os meios de crescimento da célula e alterações na viabilidade foram determinados por o MTT (brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio) no rim embrionário humano (HEK 293) e carcinoma hepatocelular humano (Hep G2), células. Tratamento CuO-NP foi associada com melhora HEK e HEP viabilidade celular. As limitações deste método incluem diluição do PBW por componentes do meio de crescimento e durante osmolajuste lidade, bem como o ajuste do pH necessário. Este método é limitado no seu contexto mais amplo devido aos efeitos de diluição e mudanças no pH da PBW que é tradicionalmente acídico no entanto ligeiramente; este método poderia ter um uso mais amplo avaliando tratamento CuO-NP em águas mais neutros.

Introduction

Cerca de 20% da rede elétrica dos EUA é fornecida por energia nuclear e, em parte baseada em incentivos nacionais para aumentar a independência energética, dos EUA deverá capacidade nuclear para aumentar 1. Crescimento mundial da energia nuclear também é esperado que continue, com grande parte do crescimento que ocorre fora os EUA 2. A partir de 2013, 83% do urânio US foi importado, mas 952.544 toneladas métricas de reservas existem em os EUA 3,4. Em 2013 houve 7 novas aplicações de instalações e aplicações de 14 de reiniciar / expansão entre Wyoming, Novo México, e Nebraska 5. Em os EUA, o urânio é extraído através predominantemente na recuperação in situ (ISR) processa 6. ISR provoca menos perturbações terra e evita a criação de decantação pilhas que podem liberar contaminantes ambientais 7. ISR utiliza soluções de oxidantes à base de água para lixiviar de urânio a partir do corpo de minério subterrânea, após o que o urânio é extraído a partir do percolado atravésum processo de permuta de iões 8. Para manter um balanço hídrico negativo no corpo de minério, uma parte do chorume, chamada produção sangrar água (PBW), é sangrado fora. Uma porção do PBW é descontaminada por osmose reversa (RO) e re-introduzido no processo de mineração, mas também poderiam ter PBW usos industriais ou agrícolas benéficas, se os contaminantes tóxicos pode ser reduzida para níveis aceitáveis ​​determinados por agências reguladoras e de estado para a superfície águas subterrâneas 9. Atualmente, a maioria das instalações ISR urânio usar RO para remover contaminantes de PBW. No entanto, o processamento RO consome muita energia e produz salmoura resíduos tóxicos, o que requer disposição regulamentado.

Existem muitos métodos de descontaminação da água, incluindo adsorventes, membranas e troca iônica. Destes, adsorção é a mais utilizada, e os recentes desenvolvimentos na síntese de nanopartículas aprimorou as capacidades de descontaminação da água à base de adsorvente processa 10. Oxi Cupricde nanopartículas (CuO-PN) não haviam sido estudados extensivamente sobre o urânio ISR PBW, mas em estudos recentes de remoção de contaminantes da água subterrânea, CuO-NPs foram encontrados para ter propriedades únicas, incluindo não requerendo etapas de tratamento de água (pré ou pós por exemplo, o ajuste de pH ou potencial redox) e um bom desempenho em diferentes composições de água (por exemplo, em diferentes valores de pH, concentrações de sal, ou iões concorrentes) 11. Além disso, CuO-NPs são facilmente regenerados por lixiviação com hidróxido (NaOH) de sódio, após o que a regenerada CuO-PN pode ser reutilizado. Detalhes de CuO-NP vestígio de metal recursos de filtragem de águas naturais foram previamente publicados 11-14.

Embora útil para o tratamento da água, as nanopartículas de óxido de metal pode ser tóxico para os organismos vivos, mas a extensão da toxicidade depende, em parte, das características e componentes de nanopartículas 10,15,16. Portanto, é importante para estudar simultaneous remoção e nanopartículas toxicidades de contaminantes antes de aplicações de campo. O estudo actual, determinada a capacidade de CuO-NPs para remover contaminantes PBW prioritárias (incluindo arsênio, selênio, vanádio e urânio), e avaliou o efeito do tratamento CuO-NP em PBW citotoxicidade.

PBW foi recolhido a partir de uma instalação de urânio ISR activo e utilizado para determinar a eficácia do tratamento com NP-CuO na remoção de contaminantes de prioridade. PBW citotoxicidade antes e após o tratamento CuO-NP também foi avaliada. PBW é uma geológica complexa mistura (industrial / ambiental) e tanto o Instituto Nacional de Saúde Ambiental e Ciência (NIEHS) e da Agência de Substâncias Tóxicas e Registro de Doenças (ASTDR) estão colocando ênfase no estudo da toxicidade de misturas ambientais relevantes, incluindo as misturas como elas existem na natureza ou industriais configurações, assim como promover a testes in vitro para dar prioridade produtos químicos para mais testes in vivo17-19. Estudos de baixa dosagem, mistura exposições crônicas são um desafio porque a exposição crônica a uma mistura de baixa dose não produzem efeitos óbvios, pelo menos não no curto espaço de tempo da maioria dos estudos de laboratório. Do mesmo modo, a maioria dos estudos in vitro misturas químicas expor as células a uma mistura feita em laboratório definido de duas ou mais metais 20,21. Estes estudos fornecem informações de base, mas misturas simplificados não replicar as interações antagônicas e sinérgicos complexas que podem ocorrer em uma amostra ambiental natal, onde toda a gama de componentes da mistura estão presentes.

Os objetivos deste estudo foram analisar processos de remoção de contaminantes alternativos para PBW e avaliar o efeito de (CuO-NP) tratamento em PBW citotoxicidade utilizando células humanas cultivadas. Os resultados poderiam beneficiar a indústria de urânio através do desenvolvimento de métodos mais eficientes ou ecológicos para a remoção de contaminantes. Este estudo fornecea primeira evidência de que a redução de contaminantes prioritários em PBW por CuO-NPs reduz citotoxicidade em células de mamíferos 22.

Protocol

Todas as amostras foram coletadas no prédio de processamento de líquido de urânio de uma instalação ISR urânio em Wyoming. 1. Produção sangro Água (PBW) Recolha dois tipos de amostras de água de uma instalação de urânio ISR: PBW e osmose (RO) água reverter. Recolhe PBW a partir de uma torneira de monitorização, após o processo de permuta iónica mas antes de descontaminação de osmose inversa. Coletar amostras RO após a PBW é descontaminada por meio de tratamen…

Representative Results

As concentrações dos componentes PBW e pH em não tratado e tratado com CuO-NP PBW são apresentados na Tabela 1. Martinson e Reddy (2009), relataram que o ponto de carga zero do CuO-NP é estimado em 9,4 ± 0,4. Dado que o pH era de 7,2-7,4 PBW, nestas condições, água doa protões de CuO em NPS, fazendo com que a superfície da nanopartícula para ser carregado positivamente para permitir a adsorção de espécies carregadas negativamente. Tratamento de NP-CuO removidos contaminantes prioritários…

Discussion

Estudos anteriores relataram que CuO-NPs removido arsénio das águas subterrâneas 11,13,30,31. Este estudo suporta essas descobertas anteriores e também relata que CuO-NPs remover os contaminantes adicionais de PBW. Este estudo também confirma os relatos anteriores que CuO-NPs são eficazes na remoção de arsénio, apesar da presença de outros contaminantes potenciais e iões concorrentes 11. Modelagem especiação previu que 97% das espécies de vanádio em PBW são carregados negativamente,…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

We thank Dr. Roger Hopper and the Wyoming Department of Agriculture, Analytical Services Lab for the mass spectroscopy analysis of our samples. We would like to express our gratitude to the University of Wyoming, School of Pharmacy for allowing us to video this protocol in their laboratories. We would also like to thank the Theodore O. and Dorothy S. King Endowed Professorship Agreement for their graduate assistantship (SC), the University of Wyoming for the Graduate Assistantship support (JRS), and the Science Posse (NSF GK-12 Project # 084129) for the teaching fellowship (JRS). We would also like to thank Uranium One for allowing us to obtain samples and assisting us with questions. This work was supported by the School of Energy Resources, University of Wyoming.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
CuCl2 Sigma 203149
Borosilicate glass balls VWR 26396-639 6 mm
Nitric Acid Fisher A509-P500 Trace metal grade
0.45 mm syringe filter Fisher SLHA 033S S
10X EMEM Fisher BW12-684F
Fetal Bovine Serum ATCC 30-2020
L-glutamine Fisher BP379-100
NaHCO3 Sigma S5761
Penicillin/Streptomycin ATCC 30-2300
0.22 mm vacuum filter unit Fisher 09-740-28C
HEK293 ATCC CRL-1573
HEPG2 ATCC HB-8065
Trypsin Sigma SV3003101
MTT Sigma M2128
D-penicillamine Fisher ICN15180680
96-well plates Fisher 07-200-92
DMSO Fisher D12814
Spectra Max 190 Molecular Devices
Visual MINTEQ version 3.0 KTH Royal Institute of Technology
ICP-MS  Agilent Details of instruments, models and detection limits were published in Reddy et al., 2013. 
IC DIONEX DX 500 Dionex Details of instruments, models and detection limits were published in Reddy et al., 2013. 
VWR Incubator VWR

Referências

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Citar este artigo
Schilz, J. R., Reddy, K. J., Nair, S., Johnson, T. E., Tjalkens, R. B., Krueger, K. P., Clark, S. Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability. J. Vis. Exp. (100), e52715, doi:10.3791/52715 (2015).

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