Summary

पंजा खींच: एक उपन्यास, माउस सिलेंडर टेस्ट के संवेदनशील विश्लेषण

Published: April 29, 2015
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Summary

सिलेंडर परीक्षण के शास्त्रीय forelimb विषमता विश्लेषण नियमित तौर पर मस्तिष्क की चोट या स्ट्रोक निम्नलिखित चूहों में व्यवहार घाटे का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है; हालांकि, यह चूहों में लगातार घाटे का पता लगाने में विफल रहता है। इस अध्ययन पंजा खींच व्यवहार बढ़ाता चूहों में मस्तिष्क की चोट का एक और अधिक संवेदनशील विश्लेषण दर्शाता है कि।

Abstract

सिलेंडर परीक्षण नियमित कृन्तकों में forelimb मोटर कॉर्टेक्स फोकल इस्कीमिक क्षति भविष्यवाणी करने के लिए प्रयोग किया जाता है। सिलेंडर में रखा, कृन्तकों के पालन और मुद्रा समर्थन के लिए उनके forelimb के पंजे के साथ सिलेंडर की दीवारों को छू द्वारा पता लगाएं। Forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कोर्टेक्स को इस्कीमिक चोट के बाद, चूहों forelimb विषमता में कहा जाता है, जो उनके प्रभावित पंजा के साथ कम से छू में जिसके परिणामस्वरूप आसनीय समर्थन के लिए उनके अप्रभावित forelimb पंजा पर अधिक भारी भरोसा करते हैं। इसके विपरीत, माउस मस्तिष्क में फोकल इस्कीमिक क्षति forelimb विषमता में तुलनीय लगातार घाटे में परिणाम के लिए विफल रहता है। Forelimb विषमता घाटे बार बार मनाया जाता है, चूहों "पंजा खींच" कहा जाता है एक उपन्यास व्यवहार पोस्ट स्ट्रोक का प्रदर्शन करते हैं। पंजा खींच एक चार पैर रुख करने के लिए एक पीछे से dismounting जब सीधे दीवार से दूर धक्का बजाय सिलेंडर दीवार के साथ अपनी प्रभावित पंजा खींचें करने के लिए एक माउस के लिए प्रवृत्ति है। हम पहले दिखा दिया है किपंजा-घसीट व्यवहार forelimb मोटर कॉर्टेक्स के लिए छोटे कॉर्टिकल इस्कीमिक चोटों के लिए बेहद संवेदनशील है। यहाँ हम पंजा-घसीट विश्लेषण के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। हम एक पंजा खींचें क्या है परिभाषित करने और पंजा-घसीट व्यवहार यों को कैसे प्रदर्शित करता है। सिलेंडर परीक्षण प्रशासन के लिए एक सरल और सस्ती परीक्षण है और पूर्व प्रशिक्षण या भोजन के अभाव रणनीतियों की आवश्यकता नहीं है। छोटे फोकल चोटों की लोकप्रियता में बढ़ती है और उत्पादन कर रहे हैं कि दो मॉडल – सिलेंडर परीक्षण के साथ पंजा-घसीट विश्लेषण का उपयोग करने में, यह ऐसी photothrombosis और Endothelin -1 (ईटी -1) -induced ischemia के रूप कॉर्टिकल इस्कीमिक चोटों की भविष्यवाणी के लिए एक आला भरता मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा है। अंत में, सिलेंडर की परीक्षा में पंजा-घसीट व्यवहार को मापने पिछले forelimb विषमता विश्लेषण लगातार घाटे का पता लगाने में नाकाम रही है जहां ट्रांसजेनिक माउस उपभेदों की एक विस्तृत पलटन का उपयोग कर कॉर्टिकल चोट के बाद कार्यात्मक वसूली की पढ़ाई की अनुमति देगा।

Introduction

तंत्रिका पुनर्जनन रणनीतियों के लक्ष्य के ऊतकों की मरम्मत और कार्यात्मक वसूली दोनों का प्रदर्शन है। कार्यात्मक वसूली आम तौर पर विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों को क्षति के साथ जुड़े रहे हैं कि मोटर कौशल को शामिल इस मामले में, कार्यात्मक घाटे उपाय है कि व्यवहार परीक्षण के साथ मूल्यांकन किया है। घाव मस्तिष्क चोट या कॉर्टेक्स के ज्ञानेन्द्रिय forelimb के क्षेत्र के लिए इस्कीमिक क्षति व्यवहार परीक्षण के एक नंबर के द्वारा प्रदर्शन किया जा सकता है। ऐसा ही एक परीक्षण, सिलेंडर परीक्षण forelimb गतिविधि 1 में कार्यात्मक घाटे का आकलन करने के लिए चूहों में बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया जाता है। परीक्षण एक पारदर्शी शीर्ष के साथ ही एक सिलेंडर, कैमरा और मेज की आवश्यकता होती है एक कम सेट अप लागत है। यह यह कृन्तकों के प्राकृतिक खोजपूर्ण व्यवहार पर आधारित है के रूप में प्रशासन के लिए आसान है, इसलिए पूर्व प्रशिक्षण और भोजन के अभाव या पुरस्कार की आवश्यकता नहीं है। इन कई फायदे के बावजूद, सिलेंडर परीक्षण forelimb के फोकल चोटों निम्नलिखित चूहों में forelimb के घाटे का आकलन करने के लिए कम उपयोग किया जाता हैहम सिलेंडर की परीक्षा में माउस व्यवहार का विश्लेषण करने के लिए विशेषता है जो कॉर्टेक्स, ensorimotor। Forelimb विषमता सिलेंडर परीक्षण के लिए विश्लेषण के शास्त्रीय उपाय है। सिलेंडर में रखा, कृन्तकों स्वाभाविक रूप से उनके पिछले पैर पर पालन और मुद्रा संतुलन के लिए उनकी forelimb के पंजे के साथ सिलेंडर दीवारों को छू द्वारा सिलेंडर की दीवारों का पता लगाएं। प्रत्येक forelimb के साथ दीवार के साथ पंजा छू की संख्या आसानी से सिलेंडर के इस अन्वेषण के दौरान कृन्तकों फिल्माने द्वारा मात्रा निर्धारित है। प्रभावित forelimb पंजा अप्रभावित forelimb पंजा तुलना में दीवार के साथ कम से छू बनाता है और प्रतिपक्षी ज्ञानेन्द्रिय कोर्टेक्स को नुकसान का संकेत है जब Forelimb विषमता उत्पन्न होती है। चूहों में, vasoconstrictive एजेंट का इंट्रा-कॉर्टिकल इंजेक्शन, Endothelin forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कोर्टेक्स में (ईटी-1), प्रतिपक्षी forelimb में व्यवहार घाटे में जो परिणाम एक केंद्र इस्कीमिक घाव का कारण बनता है। प्रतिपक्षी forelimb के उपयोग में घाटा आसानी च में परिवर्तन के रूप में पता चला रहे हैंचूहों 1-3 में सिलेंडर की परीक्षा में विषमता orelimb। हालांकि चूहों के विपरीत, forelimb विषमता में परिवर्तन चर और तुलनीय एट-1 इंजेक्शन 4-6 निम्नलिखित चूहों में कम संगत कर रहे हैं। यहाँ हम सिलेंडर की परीक्षा में forelimb के व्यवहार का एक उपन्यास विश्लेषण का प्रदर्शन – पंजा-घसीट व्यवहार का विश्लेषण। हम पहले कि पंजा-घसीट विश्लेषण शास्त्रीय forelimb विषमता विश्लेषण से चूहों में forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कोर्टेक्स को नुकसान का एक और अधिक संवेदनशील उपाय है और इसलिए फोकल कॉर्टिकल चोट मॉडल की एक किस्म के लिए लागू है दिखाया है।

4 पंजा-घसीट – कैसे forepaw संपर्कों की परीक्षा forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कोर्टेक्स को इस्कीमिक क्षति निम्नलिखित सिलेंडर दीवार चूहों में एक उपन्यास व्यवहार का पता चला। एक माउस तो इसकी मध्यम रेखा की दिशा में या दीवार, जबकि नीचे सिलेंडर दीवार के साथ अपनी प्रभावित (-कॉन्ट्रा lesional) पंजा drags सिलेंडर दीवार का पता लगाने के लिए अपने पीछे पैरों पर खड़ा है जब एक पंजा खींचें होती हैइसके अप्रभावित forepaw दीवार के खिलाफ आसनीय सहायता प्रदान करता है। पंजा-drags शायद ही कभी इसलिए एक पंजा खींचें की उपस्थिति forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कॉर्टेक्स से 4 चोट का एक सकारात्मक संकेत है रिहाई चूहों में पाए जाते हैं। हम पहले forelimb के ज्ञानेन्द्रिय प्रांतस्था करने के लिए एट-1 इस्कीमिक क्षति निम्नलिखित चूहों में पंजा-घसीट व्यवहार मात्रा निर्धारित किया है और बाद के स्ट्रोक 4 में दो सप्ताह तक चूहों में निरंतर पंजा-घसीट व्यवहार दिखाया है। यहाँ हम पंजा-घसीट व्यवहार चार सप्ताह के बाद स्ट्रोक अप करने के लिए निरंतर है कि दिखा। पंजा-घसीट व्यवहार के विश्लेषण से चूहों में forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कॉर्टेक्स फोकल इस्कीमिक क्षति का आकलन करने के लिए एक उपन्यास और संवेदनशील उपकरण प्रदान करता है। अपनी सस्ती सेट-अप, प्रशासन की आसानी और इस तेजी से चूहों में forelimb के व्यवहार घाटे का आकलन करने के लिए एक सरल, अभी तक उपयोगी उपकरण बनाने स्कोरिंग।

Protocol

आचार बयान: सभी प्रयोगों पशु की देखभाल पर कनाडा परिषद के दिशा निर्देशों के अनुसार न्यूफाउंडलैंड के पशु की देखभाल आचार समिति के मेमोरियल विश्वविद्यालय द्वारा अनुमोदित किया गया। 1. चूहे वयस्क चूह…

Representative Results

हम पहले कि पंजा-घसीट व्यवहार forelimb के ज्ञानेन्द्रिय प्रांतस्था करने के लिए एक केंद्र इस्कीमिक चोट के बाद दिखाई देता है और क्षति 4 के एक सकारात्मक संकेत है प्रदर्शन किया है। Forelimb के ज्ञानेन्द्रिय कोर्?…

Discussion

अनुसरण कर रहे हैं सिलेंडर की परीक्षा में पंजा-घसीट व्यवहार बढ़ाता है जब मुख्य बिंदुओं की स्थापना के लिए: मैं) की संख्या यों एक आधारभूत स्थापित करने के लिए मस्तिष्क की चोट से पहले प्रत्येक पंजा के लिए कु?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम फोटोग्राफी और वीडियोग्राफी के साथ उनकी तकनीकी विशेषज्ञता और सहायता के लिए श्री जॉन क्रोवेल्ल और श्री टेरी Upshall धन्यवाद। इस काम स्ट्रोक वसूली उत्प्रेरक अनुदान के लिए कनाडा के स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान और न्यूफाउंडलैंड के अनुसंधान एवं विकास निगम और एक दिल और कनाडा कनाडा भागीदारी के स्ट्रोक फाउंडेशन से JLV को अनुदान ऑपरेटिंग द्वारा समर्थित किया गया। RBR एक कीथ ग्रीफिथ मेमोरियल हार्ट एंड स्ट्रोक फाउंडेशन ग्रेजुएट छात्रवृत्ति के प्राप्तकर्ता था।

Materials

Plexi-glass cylinder N/A N/A 17.5cm high, 9.5cm outer diameter, 8.8cm inner diameter, wall thickness 0.35cm (or 3.5 mm)
viewing table N/A N/A 54x56x66.5cm (width x length x height), top of table is a 51x51cm sheet of plexiglass.
mirror N/A N/A 34x58cm mirror
video camera Sony DCR-SR42 Video camera with onboard storage, SD functionality, 40x optical zoom
computer Dell Optiplex 760 Processor: Intel, 3.0 GHz, Memory 4.00GB (RAM) 
computer monitor Samsung S22C350H
Excel (Microsoft Office Professional Plus) Microsoft v14.0.7106.5003
VLC Media Player Video LAN v2.1.2 Media player with playback speed modulation and video support
External Hard Drive Western Digital WDBAAU0020HBK-01 2 TB

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Citar este artigo
Roome, R. B., Vanderluit, J. L. Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test. J. Vis. Exp. (98), e52701, doi:10.3791/52701 (2015).

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