Summary

건강 바이오 마커의 혈액 스팟 컬렉션 인구 연구에의 참여를 극대화하기 위해 건조

Published: January 28, 2014
doi:

Summary

바이오 마커는 질병이나 건강의 직접 측정 한 생물학적 지표입니다. 인구 및 사회 과학, 바이오 마커, 전송을 쉽게 얻을 수 있으며, 분석 할 필요가있다. 말린 혈액 스팟 (DBS) 컬렉션이이 요구 사항을 충족, 높은 응답 속도로 현장에서 수집하고 생체의 다양한 분석 할 수 있습니다.

Abstract

바이오 마커는 질병, 건강, 노출, 또는 다른 생물학적 정보를 직접 측정 한 생물학적 지표입니다. 인구 및 사회 과학, 바이오 마커, 전송을 쉽게 얻을 수 있으며, 분석 할 필요가있다. 마른 핏자국이 필요를 충족, 높은 응답 속도로 현장에서 수집 할 수 있습니다. 이러한 요소는 마멸 방지하는 것이 중요 개입 등의 종단 연구 설계에서 특히 중요하며, 높은 응답 속도는 결과의 해석을 향상시킬 수 있습니다. 건조 혈액 반점 시료 채취 후 정맥 천자 간단 퀵 비교적 고통 덜 침습적이고, 최소 필드 저장 요건을 요구 (즉 샘플을 즉시 동결하지 않아도 안정된 냉동실 환경 이전에 오랜 기간 동안 저장 될 수있다 분석). 샘플은 콜레스테롤, C-반응성 단백질, 당화 혈색소, 수많은 사이토 카인, 및 O 등 다양한 분석의 다양한 분석 할 수 있습니다거기 분석뿐만 아니라 유전 물질을 제공한다. 최근의 여러 연구에서 사용으로 DBS의 컬렉션 묘사된다.

Introduction

바이오 마커는 정상에서 임상 적으로 식별 가능한 질병 1에 기여할 수있는 병원성에 이르기까지 다양한 생물 학적 과정에 대한 중요한 정보를 제공 할 수 있습니다. 연구 설정에서 건조 핏자국 (DBS)은 전체 혈액에서 바이오 마커를 수집하는 방법으로 정맥 천자에 점점 더 선호되고있다. DBS 컬렉션은 정맥 천자 간단 비교적 고통이 덜 침습적이고, 최소한의 스토리지 요건 (즉, 샘플을 즉시 동결시키고 분석 이전에 안정 냉동실 환경에서 장기간 저장 될 수있는 필요로하지 않고) 요구한다. DBS 샘플은 콜레스테롤, C-반응성 단백질, 글리코 실화 헤모글로빈, 엡스타인 – 바 바이러스 항체 및 사이토 카인 등 여러 가지 분석 물질의 종류에 대해 시험 할 수있다.

정맥 천자는 오랫동안 혈액에서 바이오 마커의 수집을위한 황금 표준되었습니다. 그러나, 획득, 저장 및 혈액 샘플을 발송하는 adheren이 필요합니다특정 연구 프로토콜에 불가능할 수도 프로토콜 및 건강 코드들의 개수, 세륨. DBS 샘플링 절차가 간단하고 공식 인증을 필요로하지 않는 동안 phlebotomists에 공식적으로, 정맥 천자에 대한 인증을 받아야합니다. 정맥 혈액 수집은 또한 DBS 컬렉션 (즉, 바늘, 튜브, 회전식 문이)보다 더 많은 장비를 필요로하고, 더 후 수집 노력. 정맥 천자 샘플 및 -20 ° C 및 -70 °의 사이 냉동 원심 분리 (또는 소정 시간 동안 실온에서 서 통해 혈액 샘플에서 추출 혈청 또는 혈장) C 즉시 분석 물질의 열화를 방지하기 위해 처리되어야 , DBS 샘플 단순히 공기 건조 허용되어야하고이 냉동실로 전송하기 전에, 회 이상 분석에 따라 실온에서 저장 될 수있다. DBS 샘플은 위에서 설명한 이유로 정맥 천자 샘플보다 수집 저렴. DBS 샘플도이전의 분석에 배송 및 보관 비용을 절감, 적은 공간을 차지합니다.

바이오 마커로 침의 사용은 biobehavioral 연구의 핵심이되고있다. 타액 바이오 마커를 수집 할 수있는 간단한 비 침습적 방법을 제공하고 코티솔 또는 코티닌 3-5을 측정하기위한 현장 작업에 대한 표준이되었습니다. 소변은 비 침습적으로 모아질 수 있고 멜라토닌 분석법 또는 독성에 대한 인구 수준의 연구에 사용될 수있는 다른 표본이다. 소변과 타액 모두 정직하고 참가자 스스로 완성 할 수있는 수집 절차를 제공하지만, 모든 분석은 이러한 미디어에 측정 할 수 있습니다.

DBS는 정맥 천자에 간단하고 비용 효율적인 대안을 제공하고 필드에 점점 구현 연구 도구가되고 있으며 인구는 6 연구.

Protocol

다음 프로토콜은 해당 기관 검토위원회에 의해 승인 된 헬싱키 선언에 따라 검토를 실시하였습니다. 1. 표준 Precuations : 시작하기 전에 확인 모든 시료 채취 직원은 국립 산업 안전 보건 연구소 (NIOSH)이 혈액 품어 병원체 (BBP) 교육이 필요 통과했다. 공학적 관리 사용 식품 의약품 안전청은 사용하는 멸균 일회용 란셋 처분 날카로운 처분 용기를 승인했다. 아마도 감염 물질과 접촉하는 다른 물질의 표지가 제대로 된 바이오 폐기물 배럴을 사용합니다. 날카로운 물건 용기를 너무 많이 넣지 마십시오. 남은 부상을 방지하도록 용기를 교체하기 전에 3 / 4 용량 예리한 용기를 채운다. 모든 날카로운 물건 용기에 compartmental 충만에 대한 지표가있다. 만 날카로운 물건 용기에 날카로운 물건을 처분. 모든 구약의 날카로운 물건 용기를 사용하지 마십시오그녀의 폐기물. 표지가 제대로 된 바이오 폐기물 배럴의 잠재적 인 BBP와 접촉하는 nonsharp 재료를 폐기하십시오. 개인 보호 장비 (PPE) 항상 제대로 BBP에서 감염을 방지하기 위해 PPE를 사용합니다. DBS의 수집 중에 사용 PPE 장갑, 실험복, 보안경, 긴 바지와 폐쇄 발가락 신발 (가) 있습니다. 혈액 또는 혈액이나 기타 잠재적 전염성 물질 (OPIMs을) 연락을 아무것도 처리 장갑을 착용 할 것. 이 (후술) "짜기"의 과정을 방해 할 수 있으므로 장갑, 너무 꽉 또는 너무 느슨해서는 안됩니다. 그들은 장갑에 구멍 수로 핏자국을 수집하는 동안 반지를 착용하지 마십시오. 혈액과 OPIMs에서 피부와 옷을 보호하기 위해 실험실 코트를 착용 할 것. BBP와 접촉했다 실험실 코트는 다시 사용하기 전에 10 %의 표백제 / 물 용액에 세탁해야한다. 에 관계없이 노출, 실험실 코트를 유지하기 위해 정기적으로 c는 세탁해야기대다. 혈액과 OPIMs와 접촉 할 가능성에 대해 발을 보호하기 위해 폐쇄 발가락 신발을 착용하십시오. 원하는 경우, 혈액 및 튄로 인해 OPIMs와 접촉 할 가능성을 방지하기 위해 고글을 착용하십시오. 작업 공간의 청결을 유지하기 위해, 실험실 영역 이외의 항목을 오염을 막기 위해 작업 영역을 떠나기 전에 모든 PPE를 제거합니다. 작업 연습 컨트롤 각 참가자와 신체 접촉 전후 20 초 동안 비누와 따뜻한 물로 손을 씻으십시오. 흐르는 물을 해제 수건을 사용합니다. 싱크를 사용할 수없는 경우, 60 % 이상 알코올 손 소독제를 사용합니다. 에 관계없이 소독제 적용하기 전에 장갑을 제거한 후, 손을 씻고 알코올 손을 사용할 수있는 기회의. 두 손의 모든 표면을 커버하고 건조 할 때까지 함께 손을 문질러 충분히 소독제를 사용합니다. 린스 또는이 소독제의 효능을 감소시킬 같은 수건으로 물기를 손을 닦지 마십시오. 먹지 마세요마시거나 혈액 수집 분야에서 메이크업이나 콘택트 렌즈를 적용합니다. BBPs에 대한 개인 노출은 점막에 직접 노선 이들 경로를 통해 발생할 수 있습니다. 장갑없이 생물학적 물질을 처리하지 않고 이전에 생물학적 위험 물질을 만진 장갑 위험하지 않은 물질을 처리하지 않습니다. 적절한 내부 관리 정리 정돈은 BBP에 노출로부터 보호하는 것입니다과 환경을 교차 오염을 방지 할 수 있습니다. 제대로 청정 지역은 DBS를 수집하는 동안 오염에 바이러스 불활 미생물 살균 물티슈를 사용합니다. 생물학적 또는 일반 쓰레기와 분리 오염 된 폐기물을 유지, 오염 물질은 그들에 눈에 보이는 혈액이나 OPIM이있는 사용자입니다. 노출 응답 BBP에 노출 된 경우에, 다음과 같은 방법으로 반응한다. 비누와 물로 즉시 철저하게 노출 된 부위를 씻어 내십시오.빠른 동작은 감염의 위험을 감소시킬 수있다. 현장 감독자 및 / 또는 응답을 의​​사에게 상황을 설명 할 수 있도록 노출 소스 및 경로를 식별한다. 노출이 발생한 직후에 호출 관리자에게 알립니다. 그것은 즉시 의사의 치료가 필요한 경우는 평가 될 수 있도록 감염에 대한 위험의 수준을 이해하는 현장 관리자로부터 지원을받을 강조된다. 특정 노출 통제 계획 (ECPS)에 배치 지침 BBP에 노출되는 위험이있는 모든 사람들에게 제공해야합니다. 2. 컬렉션 룸 및 재료의 설치 이러한 breakroom로, 먹는 것, 그 모든 관계가없는 프로젝트 장비를 무료로하지 않는 시료 채취 위치를 선택합니다. 하나는 혼잡 지역에 있고 싶지 않으며, 이동의 용이성을 가지고하는 것이 중요합니다. 다음은 건조 된 혈액 반점 컬렉션 (L를 설정하는 방법에 대해 설명합니다AB) 지역. 생물 학적 폐기물 배럴을 설정하고 생물 학적 폐기물 가방 내부 라인. 앉아있는 동안 폐기물 배럴 액세스 할 수 있어야합니다. 소독 와이프 ​​또는 유사한 제품과 함께 철저하게 수집 영역을 청소합니다. 생물 학적 폐기물 배럴의 실험실 면적을 청소하는 데 사용되는 모든 재료를 폐기하십시오. 유해 화학 물질에 노출로부터 피부를 보호하기 위해이 단계에서 보호 장갑을 착용 할 것. 장갑을 교체하고 나머지 컬렉션 공급을 설정합니다. 콜렉션 테이블에두고 장갑과 알코올 손 소독제. 집 의자의 손에서 날카로운 물건 용기를 놓습니다. 날카로운 물건 용기는 항상 장갑으로 취급하고 제대로 풀 때 폐기해야합니다. 컬렉션 영역에서 보호 할 수있는 underpad에 DBS 수집에 필요한 모든 나머지 재료를 넣습니다. 여과지 수집 카드, 몇 란셋, 알코올 패드, 거즈 패드, 그리고 반창고하지만 지역이 어수선 그래서 너무 많은 (가) 있습니다. 할각 참가자에 사용 될 수있는 것보다 더 많은 설정하지. 3. DBS 샘플 Cellection 항상 PPE (실험실 코트, 장갑, 긴 바지, 폐쇄 발가락 신발과 원하는 경우, 보안경)를 수집하는 동안 착용하고 자신의 거리 옷을 보호하기 위해 무릎에 보호 할 수있는 underpad (chux)를 배치합니다. 참가자 준비 : 그 / 그녀가 컬렉션의 왼쪽 또는 오른쪽 손을 사용하여 컬렉션의 손가락을 선택하는 것을 선호하는 경우 동의를 얻은 후, 참가자를 부탁드립니다. 많이 무감각 또는 손상 (찢어 발기) 손가락 및 고리 손가락을 피하십시오. 각각 참가자의 고통을 최소화하고 수집을 용이하게하기 위해 일반적으로 새끼 손가락과 엄지 손가락이 선택되지 않습니다. 손가락 끝의 측면은 일관성과 수집의 용이성에 대한 수거 장소로 사용됩니다. 참가자는 자신의 손을 따뜻하게하고 혈액의 흐름을 촉진하기 위해 함께 손을 문질러했다. 손 워싱턴rmer을 사용할 수있다, 또는 싱크를 사용할 수있는 경우 참가자는 따뜻한 물에 손을 실행할 수 있습니다. 혈액 흐름을 자극하는 또 다른 기술은 참가자가 교대로 부르 쥐 및 목표 핸드 긴장 후 이전에 손가락에서 완전히 휴식 가질 것이다. 알코올 패드를 선택한 손가락을 청소하고 완전히 건조 수 있습니다. 완벽하게 모든 오염 물질이나 손에 로션을 제거하는 두 번째 알코올 패드를 반복합니다. 손가락은 손가락 스틱이나 알코올로 진행하기 전에 혈액 샘플을 오염시킬 것입니다 완전히 건조해야합니다. 모든 중고 수집 자료와 마찬가지로 즉시 생물 폐기물 용기에 알코올 잎사귀 처리. 참가자의 손가락에 구멍 사이트를 준비 : 수집하는 동안 움직임을 방지하기 위해 팔과 손의 근육을 이완하기 위하여 참가자의 팔을 고정합니다. 테이블의 가장자리에 또는 무릎에 참가자의 팔꿈치를 놓습니다. 참가자의 손 POS 유지쾌적 심장 수준 및 혈액의 흐름을 촉진하기 위해 자신의 근육 이완 아래 itioned. 엄지 손가락과 검지 손가락 사이의 선택의 손가락을 잡고 조심스럽게 손가락으로 피를 뽑아 손가락 끝에 손바닥의 이해를 이동하면서 천천히 그리고 단단히 손가락을 압박하여 손가락을 우유. 지문에 수직 참가자의 손가락에 단단히 마이크로 란셋을 누르고 란셋을 배출. 손가락이나 손톱 침대 부근의 중앙에 구멍을하지 않는 대신 두 점 사이를 목표로, 손가락의 척골 측에. 즉시 날카로운 물건 용기에 사용되는 란셋 폐기하십시오. 핏자국 수집 : 샘플에서 조직의 유체를 제거하고 즉시 생물 쓰레기 통에 거즈를 처리하기 위해 멸균 거즈 패드로 떨어져 혈액의 첫 번째 드롭을 닦습니다. 아래쪽 각도, 세대와 그들의 심장 아래 참가자의 손을 유지하면서TLY 손목에서 손으로 시작 우유와 혈액을 생산하는 손가락 관절 아래로 작동합니다. 이 혈액의 흐름을 감소하므로 그냥 손가락을 짜내하지 마십시오. 굵은 손가락에 매달려 될 때까지 손가락을 우유. 컬렉션의 용지를 사용하여 장소를 수집합니다. 조심스럽게 손가락 아래 컬렉션 종이를 놓고 드롭 자체 무게 담을 수 있습니다. 이것은 최대 볼륨의 핏자국 수집 할 수 있습니다. 필터 종이에 혈액 풀, 즉 "비즈", 부드럽게 종이에 포화 혈액을 장려하기 위해 카드를 탭하면. 혈액이 너무 점성 또는 알갱이가 자중으로 낙하하기에 너무 작은 경우에, 천천히 손가락 닿지 않고 모세관 작용을 통해 얻어 손가락으로부터 혈액을 흡수하는 혈액 방울과 접촉 컬렉션 용지를 가져온다. 손가락이 컬렉션 종이에 닿으면 해당 컬렉션 영역이 손상된로 종이에 다른 장소로 이동합니다. 참가자의 손가락 승자민련은 필터 용지를 만지지 마십시오. 핏자국이 수집 원을 기입하지 않는 경우에도, 서로의 상단에 혈액 방울을 올려 놓지 마십시오. 이 큰 지점의 컬렉션을 더욱 어렵게 만들면서 혈액이 손가락이나 손톱에를 실행할 수 없습니다. 다음 깨끗하고 초기 펑크 사이트를 붕대와 요청이 받아 들여지는 경우에 시작, 참가자의 혈액이 수집 과정 동안 시간이 응고 된 경우, 다른 손가락을 찌르는 허가를 부탁드립니다. 응고를 방지하기 위해, 흐르는 혈액을 유지하거나 단단히 혈전 형성을 방해하기 위해 멸균 거즈로 구멍을 닦아 시도하는 참가자의 손가락을 젖을 계속합니다. 주 : 이후 손가락 스틱 몇 가지 이유에 대한 필요가있다 : 차가운 방은 더 빠른 응고를 일으킬 수 있으며, 또한 참가자들의 혈액의 점도가 적합하지 않을 수 있습니다, 또는 가난한 착유 기술은 또한 혈액의 흐름에 영향을 미칠 수 있습니다. 핸드 워머, 또는 실행 따뜻한 물, punc 이전에 사용진짜야는 냉장실의 효과를 취소 할 수 있습니다. DBS를 수집, 또는 참가자가 다음 손가락 스틱을하지 않는 경우, 불필요한 혈액의 구멍 사이트를 청소하고 나면. 참가자 시료 채취 영역을 벗어나면 잠재적 오염을 방지하기 위해 천공 사이트 붕대. FI 품질 관리 (QC) 평가 : 시료 채취를 완료 한 후, 품질에 대한 샘플을 평가합니다. 집적 영역의 위로부터 측정 스폿 직경의 1) 적어도 0.375 것임을 보장; 필터 종이의 양면에 비슷한 크기로되도록 2) 적절 컬렉션 종이를 통해 침지,이 기준을 충족하지 않는 점이 나타내 수집 용지에 손가락의 접촉 가능성 번짐 통해 컬렉션, 3)이 서로 접촉 (스폿의 영역과 겹치지 않는)은 assayable 않는다. 시료 채취를 완료 다음 GUI단계 1.1에서 설명 delines은 잠재적으로 감염성 물질과의 접촉 가능성이있는 모든 항목을 포함하여, 남아있는 오염 된 수집 자료를 폐기하십시오. 건조 보호 할 수있는 underpad에 컬렉션 종이 스탠드. 사이 좋은 공기 흐름을 허용하는 공간 컬렉션 카드. 건조한 공기에 최소 시간은 15 분 이상, 바람직하게는 30 분이다. 최대 공기 흐름을 허용하기 위해, 자유롭게 서 수집 된 종이 샘플 뒤에 공기 흐름을 제공 할 수있는 방식으로 수집 카드 뒷면 접어하는 것이 중요하다. 모든 단계를 완료로, PPE를 제거합니다. 제목 느낌이 희미하거나없는 우물에 응답 가능성이 있지만, 참가자는 손가락 스틱시 이후, 현기증 어지러움, 또는 희미한 될 수 있습니다. 같은 창백, 얼굴과 이마에 땀, 눈꺼풀, 비전을 흐리게 처진 또는 끼고 불만, 또는 메스꺼움의 불만 등의 징후를 경고합니다. T의 발병HESE 증상은 종종 갑자기, 샘플 수집은 증상이 보이는 경우 신속하게 응답 할 준비를해야합니다. 이러한 증상이 절차 중에 어떤 시점에 존재하는 경우, 다음과 같은 절차에 따라 반응한다. 참가자가 희미한 느낌이 경우, 어질​​ 어질 현기증이나 실신의 징후를 보여, 다음과 같은 작업을 수행 : 절차를 중지합니다. 참가자가 떨어지거나 부상이되지 않습니다주의하십시오. 침착 참가자를 안심하고 필요한 경우, 허리를 구부리고 그 / 그녀의 다리 사이에 그 / 그녀의 머리를 넣어 참가자를 부탁드립니다. 이동성이 제한되며 참가자가 이동 될 수있는 경우에, 인접하는 위치에 쿠션 쉬어야 사용될 수있다. 10 분 동안 참가자의 휴식을해야합니다. 참가자의 동의가 계속 경우 절차를 다시 시작합니다. 참가자가 실신하는 경우, 다음과 같은 작업을 수행 : 절차를 중지합니다. 주의 그참가자가 떨어지거나 부상이되지 않습니다. 발 상승으로 가능한 한 빨리 그 / 그녀의 뒷면에 참가자 거짓말이있다. 참가자는 서없이 주어진 위치에서 직접 누워하라는 지시를 받게 될 것입니다. 모든 의류의 조임 장치 부착을 늦춰 줄에 참가자를 부탁드립니다. 10 분 동안 참가자의 휴식을해야합니다. 핏자국 컬렉션을 계속해서는 안된다. 참가자가 1 분 후 응답하지 않는 경우, 911에 전화. 실험실 영역을 파괴 : 핏자국의 수집이 완료되면, 수집 영역을 세분화해야하며 특정하는 통행인 총격 사건을 만들기 위해 오염 제거 지역은 BBP에 감염되지 않습니다. 혈액 수집 영역은, 장비 용기, 수집 자료 및 폐기물 용기는 BBP 깨끗해야한다. 감염 가능성이있는 물질을 취급 할 때는 항상, PPE를 착용하십시오. 컬렉션 영역에서 제거하고모든 오염 물질을 재 포장한다. 바이오 폐기물 통에 남아있는 오염 된 폐기물에 포함되지 않는다. 날카로운 물건 용기를 닫고 오염으로부터 보호를 제공하는 영역에 저장합니다. 날카로운 물건 용기가 3 / 4 가득 찬 경우, 적절하게 폐기하고 새로운 날카로운 물건 용기로 교체. 바이러스 불활 미생물 살균 물티슈 전체 시료 채취 부위를 닦아주십시오. 모든 생물학적 물질이 폐기되면, 생물 가방 멸균 할 수있다. 쓰레기 통에서 봉투를 제거 할 때, 단지 가방의 외부에 접촉하고 그리고 가방을 단단히 밀봉주의해야합니다. 그것은 바이러스 불활 미생물의 교차 오염을 방지하기 위해 모든 장비의 외부를 청소 잎사귀 사용하는 것도 좋은 방법입니다. 4. DBS를 수집하는 훈련 확인 어떤 건조 핏자국 수집기는 proce을 수행하기 전에 자격을 갖춘 개인에 의해 인증환자 또는 연구 주제에 두레. 수집 충분한 양의 관광 명소의 컬렉션, 10 분에서 이상적으로,시의 적절하고 효율적인 방법으로 절차를 완료에 PPE의 혈액 수집 소모품의 사용, 참가자, 자신감과 능력에 대한 존중을 보여 확인합니다. 5. 샘플 포장 및 저장 그들은 스토리지에 체포되기 ​​전에 DBS 샘플을 최소 15 분 동안 건조했는지 확인, 포화 카드는 30 분 또는에 적절하게 건조 시간이 오래 걸릴 수 있습니다. 샘플 번짐과 오염을 방지하기 위해 완전히 건조 보장, 콜렉션 카드 커버를 닫습니다. 생물 표본 가방을 가지고 시편 가방에 건조제 주머니를 배치합니다. 생물 표본 가방에 DBS 샘플을 놓습니다. DBS 샘플을 취급 할 때는 항상 장갑을 착용하십시오. 혈액 샘플은 시편 가방의 외부 접촉을 허용하지 않습니다. 자신의 생물 학적 샘플 가방 재치에 각 시료를 배치건조 패킷 하. 과잉 공기를 제거한 후 단단히 부대를 밀봉 봉투를 평평하게. 전송 또는 임시 저장을위한 스토리지 쿨러에 체포 샘플을 놓습니다. 고온을 피하십시오. DBS 샘플 분석 물은 전형적으로 7,2에 따라 심각한 열화없이 2 주 동안 실온에서 저장 될 수 있으므로, 수집의 2 주간 이내에 DBS 샘플을 동결 또는 분석. 6. 샘플 운송 및 선적 전염 물질을 포함하는 것으로 알려져하지 않는 한, 운송 규정의 미국학과에서와 제 2 부, 제 6 장에 따라 면제 인간의 표본과 같은 배를 ​​건조 핏자국 샘플, 국제 민간 항공기구 (ICAO) 기술 지침 8 6.3.2.3.6을 § . 냉동 경우, 하룻밤 유해 물질에 대한 필요한 추가 예방 조치와 드라이 아이스에 배 샘플, 또는과 -80 ℃로 냉동 gelpaks 월요일 – 수요일에 배그들이 기대하고 샘플을 받아 동결 할 준비가 수신 사이트에서 확인으로 인해 지연 또는 주말 / 공휴일에 교통 해빙을 방지 할 수 있습니다. 7. 품질 관리 평가 수집 및 사전 분석에 이어 (바람직 전에 동결 – 해동 사이클의 수를 최소화하기 위해 냉동으로) 품질을위한 샘플을 평가. 적절한 포장 그대로 (건조), 나머지 컬러 코딩 건조, 관광 명소의 포화, 반점의 크기, 제목 손가락의 접촉을 나타내는 중복 또는 카드에 지저분하지 반점 등의 적절한 수집 방법, 샘플의 품질 평가에 다음과 같은 기준을 포함​​합니다. 8. 냉동 보관 분해 시간이 분석에 따라 다를 수 있지만, 최상의 결과를 컬렉션의 2 주 이내에 DBS 샘플을 동결. 실험실 수준의 냉장고에있는 방습제와 함께 샘플을 동결. 생물학적 시료와 같이, 동결 – 해동 C를 최소화ycles, DBS 샘플의 일부 분석은 여섯 동결 해동 사이클 9-11까지 저하의 증거를 보여주지하고 있지만.

Representative Results

그림 1. 마른 핏자국 샘플. 콜렉션 카드가 건조하는 과정에서 네 개의 유효 수집 명소로 표시됩니다. 더 큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오. 그림 2. 좋은과 나쁜 말린 핏자국 샘플. 성공 (오른쪽)과 실패 (왼쪽) DBS 수집의 결과가 표시됩니다. 큰 메신저를 보려면 여기를 클릭하십시오나이. 그림 3. 관리자의 태도 및 직원 심 대사 질환의 위험 6과 관련된 사례.이 그림은 버크, LF, 벅스, OM, Ertel, K. & Okechukwu, 균형 가족 사업과 관련하여 C. 관리자의 사례에서 수정 된 직원들의 심장 혈관을 예측 다양한 의료 설정에서 위험과 수면 기간 산업 보건 심리학 115, 316-329 (2010)의. 저널. 직원 '일과 가정의 필요를 돕는에 대한 개방성과 창조성의 중간 또는 낮은 일 가족 점수로 관리자에 노출 된 직원, 두 개 이상의 심혈관 위험 (현재 흡연자, 비만, 고혈압 또는 과대 광고를 갖는 통계적으로 유의 한 증가 확률이rtension, 높은 콜레스테롤 수치, 높은 당화 혈색소 (헤모글로빈 A1C) 또는 당뇨병 진단). 최고 및 중간 패널은 건조 핏자국과 (도 안정적으로 건조 핏자국으로 측정 할 수있다) 의료 기기의 지점에 의해 평가 헤모글로빈 A1C에 의해 평가 총 콜레스테롤에 대한 표준 편차 ± 평균값을 묘사. 하단 패널은 관리자 별 심혈관 질환의 위험을 보여줍니다. 직접 치료를 제공하는 간호사 및 기타 직원으로 제한 분석하는 일 · 가정 문제와 관련된 낮은 창의력과 개방성을 가진 관리자에 노출이 개인에 특히 중요 할 수 있음을 나타냅니다 (OR 낮은 WF의 점수 = 6.4, P = 0.01). 모든 모델은 연령, 성별, 임금, 교육, 인종 / 민족, 그리고 현장에 대해 제어 할 수 있습니다. 더 큰 이미지를 보려면 여기를 클릭하십시오.

Discussion

생체 의학, 세포 생물학, 유전학, 심리학, 사회학, 인구 통계학, 사회 역학 등 다양한 분야에 걸쳐 매우 유용한 도구입니다. 각 분야 내에서 초기 단계의 타당성과 신뢰성 바이오 마커 연구는 숨겨진 질환의 위험을 모두 발견하고 건강 결과의 길이 방향 예측을 제공하는 데 사용되었다. 이러한 경우, 정확한 생체는, 내구성 (즉, 그들은 바이오 마커를 추출하기 위해 시료 채취 및 실험실 분석의 구현 사이의 지연을 살아남을 수 있음) (모델의 다양한 유용) 다목적가 필요합니다.

DBS 수집이 비교적 간단한 과정이지만, 몇 가지 기술은 수집 장소의 볼륨을 최대화 할 수 있습니다. 수집을 시작하기 전에, 참가자의 손을 보장하는 것은 따뜻하고, 손가락에 손상이 갈 일단 따라서 혈관이 팽창 된 것을, 혈액의 흐름을 도움이 될 것입니다. 손 온열 장치를 사용하거나 갖는참가자 따뜻한 물에 손을 실행할는이 과정에 도움이 될 수 있습니다. 수집 전에 손가락 착유 손가락 끝에 혈액을 뽑아 혈액 흐름을 돕기 위해 손을 따뜻하게하는 것이다. 착유는 연습을 향상시키는 과정이다. 수집가들이 가장 편안하고 효율적인 찾을 어떤 기술을 사용해야하지만 가장 일반적인 방법은 집의 반대 손으로 참가자의 손 착유 포함한다. 이 방법은 반대 손은 참가자의 손목을 안정시킬 수있는 동안 수집가의 샘이 깊은 참가자의 손바닥에 작동합니다. 한 참가자의 왼손 손가락에서 혈액을 수집 한 경우 예를 들어, 집은 오른손으로 자신의 왼쪽 손과 우유와 함께 참가자의 손목을 안정 것이다. 착유 오히려 손가락 끝으로 피를 뽑아 근육에 작업 손 위의 피부를 당겨, 확고한 그립을 사용하지 포함하는 동안 만든 일반적인 실수. 그것은 핀을 피하는 것도 중요칭 단단히 혈액의 흐름을 방해 둘, nonmilking 손으로 참가자의 손목을 재밌 착유 손 또는 손가락.

손가락을 천공 할 때, 확실하게 배출하기 전에 손가락으로 란셋을 눌러 가능한 한 구멍이 깊은합니다. 얕은 구멍이 적은 혈액의 흐름을 빠르게 응고가 발생합니다. 손가락을 천공 한 후, 신속하게 작업하는 열쇠입니다. 얇은 피가 쉽게 수집 및 큰 반점이 발생합니다. 천자 후 혈액이 응고 될 때까지 더욱 더 점성이됩니다. 카드 큰 부피의 핏자국을 수집하는 데 필요한 시간이 덜.

이상적으로 참가자의 혈액이 자신의 무게 떨어질 것이다 인하의 얇은 충분하지만, 어떤 사람의 혈액이 두껍거나 혈전 다른 사람보다는 빨리으로이 모든 참가자의 경우되지 않습니다. 피가 손가락에서 빠지지 너무 두꺼우면, 필터 카드 컬렉션의 혈액에 회부해야합니다. ㅁ혈액에 카드를 가져 오는 도중 그것은 오히려 그냥 카드에 혈액을 dabbing보다, 가능한 한 오랫동안을 위해 손가락에 매달려있는 동안 드롭과 접촉 카드를 유지하는 것이 중요합니다. 이 스폿의 크기를 최대화하는 손가락으로부터 혈액 풀을 도울 것이다. 이 기술은 피와 카드 사이의 접촉을 유지하기 위해 꾸준한 손을 필요로한다. 양손을 사용하여, 하나는 카드를 보유하는 참가자의 손을 견고하게하고, 서로 접촉에 두 손을 유지하는 것은 함께 카드와 혈액을 안정화하는 데 도움이 있습니다.

이러한 심 대사 위험 평가 등의 고급 연구 분야는 오랫동안 같은 C-반응성 단백질 (CRP), 인슐린 및 당화 혈색소 (당화 혈색소) 초기 위험 탐지 및 방지 노력뿐만 아니라, "하드 엔드 포인트"의 생체와 같은 생체에 의존 심혈관 질환 (CVD) 위험과 CVD 관련 사망 12. 임상 역학 자주 prospectivel하는 바이오 마커를 평가Y는 심장 질환과 타입 II 당뇨병과 같은 심 대사 위험의 결과를 예측하고있다. 아마도 가장 널리 프레이밍 햄 위험 점수, CVD (13)을 예측하는 유틸리티를 보여 주었다 혈압, HDL 콜레스테롤 수치, 총 콜레스테롤 수준을 포함하는 복합 모든 생체의 사용입니다. 그러나, 프레이밍 햄의 점수는 몇 가지 기술적 인 논쟁을 경험하고, 심장 혈관 연구에 관한보다 정확하고 특정 바이오 마커의 필요성을 제안, 건강, 사회적, 환경 적 요인을 연결에 초점을 맞춘 연구에 한계가있다.

ELISA 또는 DBS 샘플의 분석이 가능하고 유사한 기술을 사용하여 시판 키트 수가있다. DBS 샘플의 분석에 필요한 솔루션 2로 건조 된 샘플을 가지고 특정 최적화 용출 단계를 사용합니다. 더 많은 분석을위한 분석은 1을 개발하고 있습니다로이 연구의 확장 영역입니다. 일 중이미 검증되고 널리 사용되는 전자 분석법은 콜레스테롤이, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, 렙틴 (17), 그리고 18 cyotkines. 진단 검사 의학의 워싱턴 대학의학과 (UW 연구소 메드) 바이오 마커 연구소 (: 마크 Wener과 감독) 등의 DBS의 분석, 전문 실험실은 여러 가지가있을 수 있습니다.

오히려 외로운 바이오 마커보다 생체의 패널, 심장 혈관 및 당뇨병 연구 분야의 가장 유용하다는 것을 염두에 베어링, 생체는 유틸리티를 극대화하기 위해 상황에 맞는 다양한 요소와 함께 고려 될 필요가있다. 바이오 마커 연구에 재정적 및 데이터 수집 시간에, 그러나 비용이 많이들 수 있습니다. 위스콘신이 정확하고, 튼튼하고, 다목적 바이오 마커를 선택하는 것이 중요합니다 동안 따라서, 직장과 가족 바이오 마커 연구는 저렴 적절한 바이오 마커를 선택하면 실용성에 뿌리를해야하며, 신속하게 수집 할 수 있습니다일 용이성. 또한, 실제적인 고려는 종종 동시에 하나의 프로 시저 내에서 가격, 품질, 속도를 최대화 할 수없는 결과를 초래할. 여기에 필드와 인구 연구 내에서 건강 바이오 마커 연구의 다음 단계를 거짓말. 바이오 마커 연구 분야 극적인 성장기 중이다하지만 대부분의 작업은 아직 오는 것이다.

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

아동 건강의 유니스 케네디 슈라이버 국립 연구소 :이 작품은 건강의 국립 연구소와 미국 질병 통제 및 예방 센터를 통해 협력 합의에 의해 재정 지원 작업, 가족 및 건강 네트워크 (www.WorkFamilyHealthNetwork.org)에 의해 지원되었다 인간 발달 (그랜트 # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), 국립 연구소 (부여 # U01AG027669)를 노화에, 행동 과학 과학 연구, 국립 심장 폐 혈액 연구소 (R01HL107240), 그리고 직업에 대한 국립 연구소의 사무실 안전 보건 (그랜트 # U01OH008788, U01HD059773). 윌리엄 T. 그랜트 재단, 알프레드 P 슬로안 재단, 어린이와 가족을위한 관리의 보조금은 추가 자금을 제공하고 있습니다. 이 책의 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 이러한 기관 및 사무실의 공식 견해를 대변하지 않습니다.

Materials

Asepti II Microbial Wipes EcoLab D12330345 3rd party shipping
Bio-hazard waste bags VWR 14220-092 High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil
Bio-hazard waste barrel Tyco 58578-092 8g. Slide lid
Sharps Container BD Medical BD305487 1.4 qt.
Chux VWR 82020-845 Absorbent bench underpads 
Gloves VWR XSmall: 89038-267 Powder-free, latex-free nitrile gloves
Small: 89038-268
Medium: 89038-270
Large: 89038-272
XLarge: 89038-274
Hand sanitizer (e.g., Purell) Johnson & Johnson 89040-210 3rd party shipping
Alcohol wipes WEBCOL and CURITY 82003-856 Prep pads
Gauze VERSALON 82004-826 Non-woven sponges
Band-Aids Nutramax Stat Strips 15431-475
Lancets Owen Mumford 82028-060 3.0 mm, 21 ga. 
Protein paper collection cards Whatman Custom-build 903 Protein Saver Collection paper
Desiccant VWR 61161-319 Humidity sponges
Specimen bags Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip 56766-370 6” x 9”
Specimen storage cooler Igloo Playmate Mini 4 qt.; direct from manufacturer

Referências

  1. McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
  2. Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. . Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , (1992).
  3. Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
  4. Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
  5. Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager’s practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
  6. Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
  7. . International Civil Aviation Organization.. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
  8. McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
  9. McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
  10. McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
  11. Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
  12. D’Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
  13. McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
  14. McDade, T. W., Ice, G. H., James, G. D. . Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. , 181-207 (2007).
  15. Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
  16. Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
  17. Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).

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Citar este artigo
Ostler, M. W., Porter, J. H., Buxton, O. M. Dried Blood Spot Collection of Health Biomarkers to Maximize Participation in Population Studies. J. Vis. Exp. (83), e50973, doi:10.3791/50973 (2014).

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