강제 진동 기술을 사용하여 마우스의 호흡기 시스템 역학의 평가

아래에서 설명하는 절차는 동물 케어 (CCAC)에 캐나다위원회의 지침에 따라 맥길 대학 기관 동물 관리위원회에 의해 승인되었습니다. 1. 준비 단계 솔루션 : 메타 콜린 : 50 밀리그램 / ML에서 재고 솔루션을 준비하고 5를 테스트 할 농도에 따라 직렬 희석 (1:1)를 확인합니다. 솔루션 5 nebulizing 전에 실내 온도에 도달 할 수 있습니다. 마취제 : 다른 요법은 생쥐 (표 1)의 여러 변종 문헌에보고되었다. 주 : 레지 1은 현재 프로토콜에서 사용되었다. 장비 : 현재 프로토콜은 flexiWare 7 소프트웨어에서 지원하는 두 개의 flexiVent 세대 중 하나에 적용됩니다. 연구의 정의 및 계획, 실험 Sessio : 소프트웨어 기능은 3 개의 모듈 아래에 그룹화됩니다n과 검토 및보고. 시스템 (flexiVent FX 전용) 및 / 켜거나 소프트웨어를 시작합니다. 첫 번째 실험 세션이나 그 이전 언제든지 학습 구조를 미리 정의 할 연구 정의 및 계획 모듈을 엽니 다. 만들기 새로운 연구 버튼을 클릭하고, 연구 결과를 생성 프로토콜을 설명하고 연구하는 실험 집단과 과목을 정의하는 마법사를 따르십시오. 실험 세션 모듈을 열고 연구와 템플릿 선택을위한 스타트 업 순서에 따라 실험 세션을 시작합니다. 측정 사이트에 대한 주제를 할당하고 그 무게를 확인합니다. 운영 소프트웨어에 설명 된 단계를 수행하여 시스템의 교정을 진행합니다. 당신은 교정 Y-튜브에 사용되는 정맥 (단계 1.3.3)를 첨부 한 지점하라는 메시지가 표시됩니다. 중요한 단계. 반복 하오얻어진 보정 값이 허용 범위를 벗어난 경우 t는 1.2.6 단계. (보정 값의 모듈 특정 허용 범위에 대한 flexiVent FX 또는 flexiWare 7 사용자 설명서를 참조하십시오). 취소 실험을 시작하기 위해 준비하지 않는 환기 및 데이터 기록을 시작하라는 메시지를 표시합니다. 이들은 나중에 지점에서 시작할 수 있습니다. 주제 : 마취제의 적절한 용량 (표 1)를 사용하여 피사체를 마취. 피사체가 마취의 수술 수준에 도달했는지 확인합니다. 주제는 발가락 핀치에 어떤 반응을 보여주지해야하며, 그 호흡은 정기적 수고하지해야합니다. 기관 절개술을 수행하고 기관을 cannulate. 그 뒷면에 동물을 배치하고 열 소스 (마우스에서 약 45 센티미터 과열을 방지하기 위해에 위치한 60 와트 전구 예를 들어, 온도 조절 난방 담요 또는 램프) 제공합니다. 청소 일전자 목 알코올 지역의 피부 절개를 만들고 부드럽게 submaxillary 선하고 취재 근육 층을 분리하여 기관을 노출합니다. 부드럽게 마이크로 포셉 한 쌍을 사용하여기도를 들어 올려 아래에 봉합을 전달합니다. 그것을 단면 않고기도에 작은 절개를 만들 수있는 후두 가까운 연골의 두 개의 링 사이에 잘​​라. 절개로 이전 보정 캐 뉼러를 삽입하고 기관 내부 부드럽게 약 5 반지의 길이 주를 사전 :. 본 실험은 1.2 cm 긴 금속 18 게이지 정맥을 사용하여 수행되었다합니다. 중요한 단계. 봉합사를 사용 장소에 정맥을 고정합니다. 첨부 정맥 주위에 완벽한 밀봉을 형성해야한다. 2. 기계 환기 인공 호흡기에 가까운 동물을 가져옵니다. 사전 정의를 선택하여 기계 환기를 시작합니다또는 환기 표시기의 정의 환기 프로필입니다. Y-튜브를 통해 인공 호흡기에 동물을 연결합니다. 중요한 단계. 인공 호흡기에 동물을 맞추고 기관 캐뉼라가 가능한 정맥 폐쇄 나 기관 트위스트를 방지하기 위해 인공 호흡기와 같은 수준에 있는지 확인합니다. 중요한 단계. 정맥 삽입 및 첨부 파일을 확인 섭동 이름을 두 번 클릭하여 깊은 인플레이션 섭동을 실행합니다. 누설의 유무, 시스템은 과도한 볼륨 변위 (그림 1)하지 않고 3 초 동안 30 CMH 2 O의 압력을 유지 할 수 있어야한다. 이러한 정맥 폐쇄 또는 잘못된 위치를 나타낼 수로 기록 된 볼륨 및 압력 흔적도없이 오프셋의 증상이나 변형으로 부드럽게해야합니다. 필요한 경우, 심장 박동과 체온 모니터링을위한 중요한 사인 트랜스 듀서를 연결합니다. 데이터 기록은 eithe 시작할 수 있습니다스크립트를 통해 수동 또는 자동으로 R. 3. 폐 기능 측정 측정 또는 명령 (예 : 천식 환자용 호흡 보조기를 두시 라고요 활성화, 이벤트 마커) 높은 통제하고 반복적 인 실험 과정을 (그림 2)에 대한 미리 정의 된 또는 사용자 정의 스크립트를 사용하여 자동화 할 수 있습니다. 매개 변수의 수에 상승을주는 교란 여섯 가족은 기준에 따라 호흡 시스템 역학을 설명하는 데 사용하고 주어진 과제 (표 2)에 따라 할 수있다. 중요한 단계. 측정을 시작할 준비가되면 폐쇄 폐 영역을 보충하고 폐 볼륨 히스토리를 표준화하는 깊은 인플레를 실행합니다. 중요한 단계. 테스트 측정 (예를 들어, PV가-P 또는 PV가-V)를 실행하여 자연 흡기 노력의 부재를 확인합니다. 선택한 데이터 집합 뷰에서 압력 신호 트레이스를 관찰합니다. 단계적 PV 곡선으로,압력 고원은 잘, 아래쪽 변형으로 정의되어야한다. 압력 아래 스윙은 동물에서 흡기 노력 (그림 3)를 나타냅니다. 제목을 두 번 클릭하여 선택한 스크립트를 시작합니다. 본 연구에 사용 된 스크립트는 일반적으로 측정을 포함 : 세중의에서 기준 측정의 시퀀스입니다. . 흡입 메타 콜린 참고기도 응답의 평가를위한 분무기의 활성화 : 시스템에 연결되면, 분무기에 식염수 또는 메타 콜린의 용액 약 100 μl를로드합니다. 분무가 자동으로 시작되고 중지됩니다. 분무기의 활성화에 따라 약 3 분의 기간 동안 밀접하게 간격 측정 (매 15 초)의 순서. 프롬프트가 또 다른 도전을 수행하고 측정의 순서를 반복합니다. 주 : B의 면봉으로 분무기 마운트 내부 건조etween 문제는 흡기 라인에서 건물까지의 물방울 결로를 방지 할 수 있습니다. 실험의 끝에, 환기를 중지하고 피사체를 분리합니다. 운영 소프트웨어의 다음 주제로 전환하고 그 무게를 확인합니다. 중요한 단계. 헹구고 분무기, 어댑터, Y-튜브,과 과목 사이의 정맥을 건조. 3.6 단계 1.2.6를 반복합니다. 하루의 끝에서, 실험 세션을 닫습니다. 헹굼 및 건조 분무기, 어댑터, Y-튜브, 및 정맥을 제조 업체의 지침에 따라 실험실을 떠나기 전에 시스템 호기 밸브를 청소해야합니다. 4. 데이터 분석 소프트웨어가 자동으로 계산하고 교란과 관련된 매개 변수를 표시합니다. 또한 데이터에 대한 수학적 모델의 적합을 반영하는 결정 계수 (COD)를 제공합니다. 다핵 각 데이터 집합소프트웨어에 의해 제외로 fficient COD가 표시됩니다. 실험 세션의 검토는, 데이터를 재 분석 및 내보내기 시나리오의 생성은 소프트웨어의 검토 및보고 모듈에서 수행됩니다. 검토 및보고 모듈을 엽니 만 충분한 COD를 갖는 데이터 집합을 포함하도록주의하면서 수출 시나리오를 만들 수 있습니다. 필요한 파라미터, 압력 또는 흐름 볼륨 커브, 원시 데이터 집합 신호 또는 스프레드 시트 응용 프로그램에 따라 정보 (표 3 참조)로 내보낼 수 있습니다. 시간의 함수로 각 매개 변수와 플롯의 평균 기준선 측정은 모든 측정 (그림 4 참조). 그런 다음, 곡선 아래의 면적을 계산 곡선의 일반적인 프로파일을 분석하거나 통계 분석을 수행하도록 선택할 수 있습니다. 메타 콜린의 농도의 함수로기도 응답의 결과를 표현하는 각각의 주제에 대해 매개 변수 및 실험 조건 별 하나를 결정점 (예를 들어, 피크) 또는 각 메타 콜린 공격 후 특정 시간. 각 실험 조건 (표 4, 그림 5)의 그룹 평균과 보고서 나 플롯 결과를 계산합니다. 정규화를 적용 (예 : % 기준선) 또는 통계 분석을 수행, 당신은 또한 주어진 매개 변수 기준 값 (그림 5C PC 200)의 두배를 생산 농도를 계산 고려할 수 있습니다.