Den här artikeln visar en optimerad procedur för avbildning av neurala substrat av auditiv stimulering i sångfågel hjärnan med funktionell magnetisk resonanstomografi (fMRI). Det beskriver framställningen av de ljudstimuli, positionering av ämnet och förvärvet och efterföljande analyser av fMRI data.
Neurobiologi fågelsång, som en modell för mänskligt tal, är en uttalad forskningsområde i Behavioral Neuroscience. I elektrofysiologi och molekylära metoder kan utredningen av antingen olika stimuli på några neuroner, eller en stimulans i stora delar av hjärnan, blodets syresättning nivåberoende (BOLD) funktionell magnetisk resonanstomografi (fMRI) kan kombinera både fördelar, dvs jämföra neurala aktiveringen inducerad av olika stimuli i hela hjärnan på en gång. fMRI i sångfåglar är utmanande på grund av den lilla storleken på deras hjärnor och eftersom deras ben och särskilt deras skalle innefattar många luftkaviteter, framkalla viktiga mottaglighet artefakter. Gradient-eko (GE) har BOLD fMRI framgångsrikt tillämpats på sångfåglar 1-5 (för en översikt, se 6). Dessa studier fokuserar på de primära och sekundära områden auditiva hjärnan, vilka är områden fria från mottaglighetsalleler artefakter. Men eftersom proccesser av intresse kan förekomma utanför dessa regioner, är hela hjärnan BOLD fMRI krävs med en MRI-sekvens mindre mottagliga för dessa artefakter. Detta kan uppnås genom användning av spinn-eko (SE) Bold fMRI 7,8. I den här artikeln beskriver vi hur du använder denna teknik i sebrafink (Taeniopygia guttata), vilket är små sångfåglar med en kroppsvikt på 15-25 g studerats i beteendevetenskap neurovetenskap av fågelsång. Huvudtemat för fMRI studier på sångfåglar är sång perception och sång lärande. Den auditiva naturen av stimuli i kombination med den svaga FETSTIL känsligheten hos SE (jämfört med GE) baserade fMRI sekvenser gör genomförandet av denna teknik mycket utmanande.
I denna rapport beskriver vi ett optimerat protokoll för detaljerad in vivo karakterisering av neurala substrat av auditiv stimulering i sövda sebrafink.
I linje med det som presenteras protokoll, majoriteten av funktionella studier hjärnaktiveringen hos djur med hjälp BOLD fMRI, söva djuren under förvärvet. Utbildning djuren att vänja dem till magneten miljön och skannern buller under läsperioder är också möjligt, men ganska tidskrävande och utmanande och därför sä…
The authors have nothing to disclose.
Denna forskning har finansierats med bidrag från Research Foundation – Flandern (FWO, projekt Nr G.0420.02 och G.0443.11N), Hercules Foundation (bidrag Nr AUHA0012), samlade åtgärder (GOA finansiering) från universitetet i Antwerpen, och delvis sponsras av EG – FP6 projekt Dimi, LSHB-CT-2005 till 512.146 och EG – FP6 projekt EMIL LSHC-CT-2004 till 503.569 till A.VdL. G.DG och CP är forskarassistenter av Research Foundation – Flandern (FWO).
Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments |
Isoflurane anaesthetic | Isoflo | 05260-05 | |
PC-Sam hardware/software | SA-Instruments | http://www.i4sa.com | |
Monitoring and gating system | 1025 | ||
MR-compatible small rodent heater system | Model 1025 compatible | ||
Rectal temperature probe | RTP-102B | 7”, 0.044” | |
7T MR scanner | Bruker Biospin | PHS 70/16 | |
Paravision software | 5.1 | ||
Gradient Insert | BGA9S | 400 mT/m, 300A, 500V | |
Gradient Amplifiers | Copley Co., USA | C256 | |
Transmit resonators | Inner diameter: 72 mm, transmit only, active decoupled | ||
Receiver antenna – 20 mm quadrature Mouse Head | Receive only, active decoupled | ||
WaveLab software | Steinberg | ||
Praat software | Paul Boersma, University of Amsterdam | http://www.praat.org | |
Non-magnetic dynamic speakers | Visation, Germany | HK 150 | |
Fiber optic microphone | Optoacoustics, | Optimic 1160 | |
Sound amplifier | Phonic corporation | MM 1002a | |
Presentation software | Neurobehavioral Systems Inc. | ||
MRIcro | Chris Rorden | http://www.cabiatl.com/mricro/mricro/ | |
Statistical Parametric Mapping (SPM) | Welcome Trust Centre for Neuroimaging | 8 | http://www.fil.ion.ucl.ac.uk/spm/ |