Preparación del tejido corneal donante para la queratoplastia endotelial

1. El programa de instalación: una técnica aséptica 11 Encienda campana de flujo laminar (LFH). Encienda la unidad de control de gas nitrógeno. Asegúrese de que la manguera se conecta entre la unidad de la consola y el tanque de nitrógeno. Conecte el gas. Configuración de gas se debe establecer en 50-60 psi en el tanque regulador. La presión de la turbina de la unidad debe leer 3,3 a 3,4 bares. Pulse el botón de prueba. La presión atmosférica se lee en las 700 y las bombas 1 y 2 debe ser inferior a 200. La unidad emitirá un pitido cuando se haya completado la prueba. Don máscara con protección para los ojos, según corresponda, y la tapa. Lávese las manos y los guantes no estériles don. Coloque los kits estériles dentro de envolturas LFH y abierto para establecer el campo estéril. Coloque un vaso para medicamentos estériles y un recipiente de plástico estéril con una gasa estéril al lado del campo estéril establecida. Vierta el alcohol isopropílico estéril en una taza de medición. Limpie la sonda paquimetría con hisopo con alcohol / almohadilla y la sonda lugar, la punta hacia abajo, en la copa de la medicina. La punta de la sonda debe empapar en alcohol isopropílico durante 10 minutos. Después de la sonda paquimetría ha empapado durante 10 minutos, enjuague la punta de la sonda con agua estéril de la jeringa precargada para eliminar el alcohol y la sonda a cabo en la cuenca de plástico. Utilizando una técnica aséptica, abrir y soltar elementos estériles (guantes estériles, las cuchillas, las cámaras de visión y la córnea) en el campo estéril a menos que ya forman parte del paquete de pre-hechos. Obtener tejido de la córnea en los medios de preservación y el lugar en el interior LFH (Figura 2). Abra vial (s) y disponer de la tapa (s) en un receptáculo séptico apropiado. Deseche los guantes no estériles. Don guantes estériles. Coloque preenvasado cuenca de plástico para el lado del campo donde se encuentra paquímetro. Conecte la línea de infusión para llave de paso y lugar a final de punta de línea de infusión fuera de la campana de asegurar la línea de tal forma que se impida la línea exterior de la campana vuelva a entrar en el capó y tocar el campo estéril. Realice la transferencia del tejido de la córnea. Verter cuidadosamente el tejido y medio, en un SIngle movimiento, desde el vial existente a una cámara de visualización estéril. Asegúrese de mantener la cara endotelial hacia arriba. Colocar la tapa en la cámara. Mantenga las cámaras que contienen los tejidos y los medios de comunicación en el campo estéril. Retire el vial (s) de LFH. Retire y deseche los guantes estériles. De Spike solución salina balanceada (BSS) botella con gotero. Cuelgue botella de BSS estéril de aproximadamente cuatro pies de la superficie de área de trabajo. Abrir dos pares de guantes estériles y bata estéril con una toalla. Realizar seis minutos matorral quirúrgica y secarse las manos. Ponga en bata estéril, a continuación, los dos pares de guantes estériles. Abra las cajas de instrumentos y colocar el contenido en el campo estéril. Dispense 10-20 cc de solución BSS en metal o una taza de la cuenca. Llene la pipeta estéril con solución BSS. Conectar llave de paso y la línea de infusión al puerto de infusión de la cámara anterior y al ras con BSS de manera que una pequeña cantidad es visible en la parte superior del pistón. Posición artificial de cámara en el LFHla parte superior de una gasa. Baja el pistón girando el anillo de ajuste del injerto a la izquierda. 2. Procedimiento Con unas pinzas, agarre suavemente la córnea por el borde de la esclera. Abrir llave de paso para lavar el sistema con BSS mientras cuidadosamente centrado córnea en la parte superior del pistón con la cara hacia abajo endotelial. Si las burbujas son visibles por debajo de la córnea, continúe infundiendo con BSS y mover levemente la córnea para eliminarlos. Suspender la infusión, una vez las burbujas de aire. Asegurarse de que la córnea se centra en el pistón (Figura 3a). Coloque la cubierta de la cámara anterior en el anillo de la base de bloqueo hasta que las lengüetas de la tapa de ajuste en los espacios abiertos en la base. Cierre de la tapa en la base girando tapa hacia la derecha 15 °. Levante el pistón hacia arriba y apriete por completo (Figura 3b). Con un dedo con guante estéril, tocar la parte superior de la córnea para asegurar que existe una presión suficiente para realizar el procedimiento. Compruebe mediante la colocación de sonda de paquimetría en la superficie of córnea para obtener lectura de espesor (Figura 4). La desviación estándar debe ser inferior a 10. Si no, volver a tomar la medición. Con la mano enguantada estéril, que no se utilizó para realizar la paquimetría, pasar la manguera de la turbina a la mano que realizó paquimetría y enrosque el tubo de la turbina en la unidad de control. Tener el registro técnico de asistencia a la lectura paquimetría. Quítese los guantes contaminados. Usar la pluma estériles dibuje una línea de 4 mm desde el limbo hacia el centro de la córnea (o no marcar si el cirujano prefiere no marcar). Utilizar pipeta para colocar cinco gotas de BS en la parte superior de la córnea. A menos que se proporcionan instrucciones específicas por el cirujano, la cabeza de corte 300 micras se utilizará si la medición paquimetría pre-corte es inferior a 600 micras. Si más de 600 micras, la cabeza de corte 350 micras será utilizado. Con rosca hacia usted y el número hacia arriba, coloque la hoja en el lado derecho de la cabeza del microqueratomo, el extremo puntiagudo primero, evitando el contacto wiª de la hoja. Sosteniendo la cabeza a cada lado, la cabeza del tornillo en la turbina. Apriete la cámara artificial con los dedos. Tornillo de la turbina en la manguera de la turbina. Prueba de la oscilación de la hoja presionando el pedal de vacío una vez, sumergiendo la cabeza de corte en el agua estéril y el pulso de la turbina durante 5 segundos. Vuelva a apretar el pistón. Lugar microqueratomo en la base con el poste de montaje y la posición a las cinco. Mantenga pulsado el pedal de la turbina a oscilar de la hoja (Figura 5a). Utilizando los dedos índice y pulgar, mantenga a medio camino microqueratomo entre la base y la parte superior de la turbina. Girar la muñeca para hacer un liso, incluso cortar a través de ya través de la córnea. Suelte el pedal de la turbina y levante microqueratomo recta fuera de la unidad. Presione el pedal de vacío para apagar vacío (Figura 5b). Ponte un guante estéril y la lectura vuelva a comprobar la paquimetría corneal después de la tapa se extrae mediante la colocación de la sonda en la superficie de la córnea para obtener lectura del espesor segundo esConsciente de que el tejido es muy delgada y se daña fácilmente. Retire guante contaminado. Tener asistencia técnico registre la lectura paquimetría segundo. Usar la pluma estéril marcado, coloque una marca si se solicita por parte del cirujano, en el borde periférico de mediados de la cama estromal residual en la cámara artificial. Coloque unas gotas de BSS estéril en lecho estromal residual. Retire la tapa de la córnea anterior microqueratomo (Figura 6) y sustituirla en la córnea antes de retirar la córnea de la cámara anterior artificial. La tapa debe estar centrada en la córnea periférica con marca para alinear la tapa correcta en su caso. Utilice lanza hisopo para volver a colocar con cuidado la tapa en la córnea. Utilice lanza nueva para absorber cualquier SRS debajo de la tapa anterior. Abrir llave de paso, girar la cámara al revés e inferior del pistón lo suficientemente lento como para evitar que se deforme la córnea. Desbloqueo base y permitir que la presión del flujo de NBS para empujar la taza cámara artificial de la base. Con unas pinzas, tire suavemente de unt el borde de la córnea en 9, 12 y tres posiciones para aflojarlo de la copa. Una vez aflojado, utilice unas pinzas en la posición de las 12 horas para remover la córnea. Colocar la córnea en la cámara de visualización, hasta el lado endotelial (Figura 7). Coloque la tapa de la cámara de observación. Retire guante estéril. Apriete ver tapa de la cámara. Realizar la evaluación posterior a la corte con lámpara de hendidura y microscopia especular de los resultados de la córnea y el registro. Coloque la cámara (s) en la sección correspondiente en el refrigerador. Paquete para el transporte de cirujano (Figura 8). 3. Los resultados representativos Disección adecuada microqueratomo mecánico de los resultados de los donantes de córnea en liso, uniforme tejido lamelar corneal donante. Esto se muestra por una tomografía de coherencia óptica (OCT) de la imagen de la córnea en sección transversal (Figura 9). El final de tejido corneal posterior debe ser de un espesor suficiente como medida por pachymetria. En los últimos 6 meses en el Banco de Ojos de Michigan, la media de pre-procesamiento de grosor de la córnea fue 558 micras, y post-procesamiento de espesor del tejido corneal posterior fue de 158 micras. Ochenta y siete por ciento de microqueratomo-diseccionado tejido de un donante mide entre 100-200 micras, un 10,9% medido> 200 micras y 2,1% medido <100 micras. El tejido corneal posterior debe mantener alta densidad de células endoteliales (ECD) para proporcionar una mejor función endotelial al receptor del trasplante. La microscopía especular se utiliza para medir ECD. En los últimos 6 meses, todo el tejido de la córnea considerará elegible para la queratoplastia endotelial de la ojo de Michigan del Banco tiene una ECD de> 2200 células / mm 2. Noventa y nueve por ciento del tejido precortadas DSAEK tenía un post-procesamiento ECD> 2400 células / mm 2, y 19% tenían un ECD> 3000 células / mm 2. El cambio medio en el pre y post-procesamiento de ECD fue insignificante en el 1,2% (p = 0,0003, a la par de dos colas t-test).Las complicaciones que pueden presentarse durante el procedimiento incluyen la pérdida de presión, la disección asimétrica, y la sangría significativa de tejido (lo que resulta en la pérdida de células del endotelio corneal). Disección inadecuada también puede producir una perforación del tejido. Figura 1. Esquema general de la Preparación de tejido corneal para endotelial Queratoplastia Figuras 1a a 1e son de sección transversal representaciones de la preparación córnea donante. Figuras 1f a 1i son de sección transversal representaciones de la córnea del receptor del trasplante durante la cirugía DSAEK. La córnea del donante se monta en una cámara anterior artificial y con la cabeza disecada microqueratomo. Después de la disección de tejidos, los dos láminas están separadas, pero la parte anterior de láminas (PAC) se coloca de nuevo en la cama se mantuvo la córnea para el transporte para el cirujano. En ella sala de operaciones, el cirujano utiliza un trépano para cortar el tejido corneal central verticalmente a través de láminas anterior y posterior. Después del corte trépano, la córnea periférica de donantes se retira del campo. La lámina posterior está suavemente eliminado de la lámina anterior con una espátula. El donante posterior de lámina (tejidos DSAEK) sustituye a la parte enferma de la córnea del receptor (1i). El paciente tiene una córnea enferma posterior a ser eliminado. La córnea posterior enfermo se anotó con un instrumento intraocular (retroceso del gancho Sinsky) en un círculo de gran diámetro. Después de anotar la córnea enferma, la membrana posterior de la córnea se ha eliminado. El donante posterior de lámina (tejidos DSAEK) se coloca en el ojo del receptor. Figura 2. Tejido corneal en medios de comunicación. El tejido corneal es en los medios de conservación después de hectáreasrvesting del donante. Figura 3. Tejido de la córnea en la cámara anterior artificial. Tejido corneal está montado sobre la cámara anterior artificial antes de anillo de bloqueo de base o la disección del tejido. Tejido corneal está montado en la cámara anterior artificial con anillo de base de bloqueo sellado sobre el tejido. Figura 4. El espesor del tejido corneal Check. El espesor de la córnea se comprueba mediante sonda de ultrasonido en la superficie de paquimetría de la córnea. Figura 5. Disección de tejido corneal. Lámina del microkeratome se coloca en la base con poste de montaje y la posición a las cinco. Microqueratomose hace pasar a través de la córnea para hacer la disección lamelar. Figura 6. Cap anterior de la córnea después de la disección. La tapa córnea anterior es libre después de la disección microqueratomo se ha completado. Figura 7. Disección de la córnea en la Visualización de la Cámara. Después de la disección se ha completado, la córnea se devuelve a la cámara de visualización para el transporte. Figura 8. Córnea en el embalaje para el transporte. La córnea en la cámara de visión es entonces bien embalados para su transporte al cirujano. Figura 9. Octubre Aspecto de la córnea. El octubre delcórnea definitiva disecados (en sección transversal) muestra que la córnea se divide en dos mitades. El interfaz es más intensamente reflectante que el tejido circundante, como se indica por la flecha.