Cornea donorweefsel Voorbereiding voor endothelial keratoplasty

1. Setup: aseptische techniek 11 Zet Laminar Flow Hood (LFH). Zet de stikstof gas regeleenheid. Zorg ervoor dat de slang is aangesloten tussen de unit en stikstof tank. Schakel gas op. Gas-instelling moet worden ingesteld tot 50-60 PSI op de regelaar tank. Turbine druk op de eenheid zou moeten lezen 3,3 tot 3,4 Bars. Druk op de knop Test. Atmosferische druk in de 700s en pompen 1 en 2 dient beneden 200. Het apparaat piept als het testen is voltooid. Don masker met oogbescherming, voor zover van toepassing, en de dop. Was uw handen en Don niet-steriele handschoenen. Leg steriele kits binnen LFH en open wraps tot steriele veld vast te stellen. Plaats een steriele medicijnen beker en een steriele plastic bak met een steriel gaasje naast de gevestigde steriele veld. Giet steriele isopropylalcohol in de geneeskunde kop. Veeg pachymetrie sonde met alcoholdoekje / pad en plaats sonde, punt naar beneden, in de geneeskunde beker. De sonde moet weken in isopropylalcohol voor 10 minuten. Na pachymetrie sonde heeft geweekt gedurende 10 minuten, spoel de sonde met steriel water uit de voorgevulde spuit aan alcohol en plaats sonde te verwijderen in de plastic bak. Met behulp van aseptische techniek, open en steriele voorwerpen (messen, steriele handschoenen, en cornea bekijken van kamers) te laten vallen op steriele veld, tenzij al deel uit van de pre-en-klare pakket. Haal het hoornvlies weefsel in het behoud media en plaats in LFH (figuur 2). Open flacon (s) en gooi het deksel (s) in een geschikt biologisch gevaarlijk stopcontact. Gooi niet-steriele handschoenen. Don steriele handschoenen. Plaats voorverpakte plastic bak aan de zijkant van het veld waar Pachymeter bevindt. Sluit de infuuslijn aan kraan en plaats spike einde van de infusie lijn buiten de kap het veiligstellen van de lijn op een zodanige wijze dat de lijn te voorkomen buitenkant van de kap van opnieuw invoeren van de kap en het aanraken van de steriele veld. Voer hoornvliesweefsel overdracht. Giet het weefsel en medium in een single beweging, van de bestaande flacon naar een steriele kamer bekijken. Zorg ervoor dat de endotheliale kant te houden. Plaats de dop op de kamer. Houd kamers die weefsel en media op steriele veld. Verwijder de flacon (s) van LFH. Verwijder en gooi steriele handschoenen. Spike gebalanceerde zoutoplossing (BSS) fles met infuuslijn. Hang fles steriel BSS ongeveer vier meter van de werkplek oppervlak. Open twee paar steriele handschoenen en steriele jurk met een handdoek. Voer zes minuten chirurgische scrub en droge handen. Trek steriele schort, dan beide paren van steriele handschoenen. Open instrument dozen en plaats de inhoud op het steriele veld. Doseer 10 tot 20 cc van BSS oplossing in metalen bak of medicijnen beker. Vul steriele pipet met BSS oplossing. Sluit de kraan en infuuslijn aan infusie-poort van de voorste kamer en zo spoelen met BSS dat een kleine hoeveelheid zichtbaar is op de top van de zuiger. Positie kunstmatige kamer in LFH optop van gaas. Lagere zuiger door te draaien graft aanscherping ring tegen de klok in. 2. Procedure Met behulp van een tang voorzichtig te vatten hoornvlies door sclerale rand. Open kraan van het systeem spoelen met BSS terwijl zorgvuldig centreren van het hoornvlies op de top van de zuiger met de endotheliale naar beneden. Als er luchtbelletjes zichtbaar zijn onder het hoornvlies, de infusie met de BSS en iets verplaatsen van het hoornvlies om ze te verwijderen. Stop infusie eenmaal luchtbellen worden verwijderd. Controleer of de cornea gecentreerd op de zuiger (figuur 3a). Positie voorste kamer deksel op de basis vergrendeling ring zo dat de lipjes van het deksel passen in de open ruimtes op de basis. Slotplaatje in de basis door te draaien met de klok mee deksel 15 °. Hef zuiger omhoog en draai volledig (figuur 3b). Met een steriel gehandschoende vinger, aan te raken top van het hoornvlies om ervoor te zorgen dat er voldoende druk om de procedure uit te voeren. Controleer pachymetrie door het plaatsen op het oppervlak probe of hoornvlies om de dikte te verkrijgen (Figuur 4). De standaardafwijking moet kleiner zijn dan 10. Zo niet, heroveren meting. Met de steriele handschoen die niet werd gebruikt om de pachymetrie uit te voeren, langs de turbine slang aan op de hand die pachymetrie uitgevoerd en schroef de turbine slang in de controle-eenheid. Laat de assisterende monteur plaat pachymetrie lezen. Verwijder verontreinigde handschoenen. Met behulp van steriele markering pen, trek je een lijn van 4 mm limbus naar het midden van het hoornvlies (of niet markeren als chirurg geeft de voorkeur aan geen markering). Gebruik pipet vijf druppels BSS bovenop het hoornvlies. Tenzij specifieke instructies door de chirurg de 300 pm snijkop worden gebruikt als de voorgesneden pachymetrie meting minder dan 600 um. Als meer dan 600 pm, 350 pm de snijkop worden gebruikt. Met draad naar u en het aantal naar boven, laadt mes in rechterkant van microkeratoom hoofd, wees uiteinde eerst, het vermijden van contact wie het mes. Houd het hoofd aan elke zijde, draai het hoofd naar turbine. Draai de kunstmatige kamer met de vingers. Schroef de turbine op turbine slang. Test het blad trilling door te drukken op het vacuüm pedaal een keer, kopje onder de snijkop in de steriel water en de polsslag van de turbine voor 5 seconden. Draai zuiger. Plaats microkeratoom op de basis met montage bericht en positie om vijf uur. Houd turbine pedaal mes (figuur 5a) oscilleren. Met behulp van duim en wijsvinger, houdt microkeratoom halverwege tussen de onderkant en de bovenkant van de turbine. Draai de pols om een ​​glad, zelfs dwars door en over het hoornvlies te maken. Release turbine pedaal en til microkeratoom recht af eenheid. Druk vacuüm pedaal uit te schakelen vacuüm (figuur 5b). Don een steriele handschoen en controleer pachymetrie lezing na het hoornvlies is verwijderd door het plaatsen van sonde op de corneale oppervlak van de tweede dikte lezen zijn te verkrijgenzich ervan bewust dat het weefsel is zeer dun en kan gemakkelijk beschadigd raken. Verontreinigde handschoen. Heb helpen technicus record tweede pachymetrie lezen. Met behulp van steriele stift plaats een merk op verzoek van de chirurg, op het midden van de perifere rand van het resterende stromale bed in de kunstmatige kamer. Plaats een paar druppels steriel BSS op resterende stromale bed. Verwijder de voorste cornea dop van de microkeratoom (Figuur 6) en vervang hem op het hoornvlies voordat u het hoornvlies van kunstmatige voorste kamer. Cap moet worden gericht op het hoornvlies behulp van een perifeer-markering op de kap af te stemmen correct indien van toepassing. Gebruik wattenstaafje speer om de dop voorzichtig te herpositioneren op het hoornvlies. Gebruik verse speer aan een BSS te absorberen onder voorste kap. Open kraan, draai kamer ondersteboven en onderste zuiger langzaam genoeg om het hoornvlies te voorkomen vervormen. Unlock basis en laat de druk van de BSS stroom naar de kunstmatige kamer beker te duwen van de basis. Met een pincet, trek eent de cornea rand 9, 12 en drie posities te los van de beker. Eenmaal los, een tang op de 12 uur positie om het hoornvlies te verwijderen. Plaats het hoornvlies in het weergavegebied kamer, endotheliale kant naar boven (figuur 7). Plaats het deksel op de bezichtiging kamer. Verwijder de steriele handschoen. Draai het bekijken van kamer deksel. Post-cut spleetlamp de evaluatie en de spiegelende microscopie van hoornvlies en registreer uw bevindingen. Plaats kamer (s) in de juiste sectie van koelkast. Pakket voor het vervoer naar chirurg (figuur 8). 3. Representatieve resultaten Een goede mechanische microkeratoom dissectie van de donor hoornvlies leidt tot een soepele, gelijkmatige lamellaire hoornvlies donorweefsel. Dit blijkt uit een optische coherentie tomografie (OCT) beeld van het hoornvlies in doorsnede (Figuur 9). De laatste achterste hoornvliesweefsel moet zijn van voldoende dikte zoals gemeten door pachymetry. In de afgelopen 6 maanden op de Michigan Eye Bank, de gemiddelde pre-processing dikte van het hoornvlies is 558 micron, en post-processing dikte van de achterste hoornvliesweefsel was 158 micron. Zevenentachtig procent van de microkeratoom-ontleed donorweefsel gemeten tussen 100-200 micron, 10,9% gemeten> 200 micron, en 2,1% gemeten <100 micron. De achterste hoornvliesweefsel moeten behouden hoge endotheelcellen dichtheid (ECD) tot een verbeterde werking van het endotheel te verstrekken aan de transplantatie ontvanger. Specular microscopie wordt gebruikt om ECD te meten. In de afgelopen 6 maanden, alle van de hoornvliesweefsel geacht in aanmerking komen voor endotheliale keratoplasty van de Michigan Eye Bank had een ECD van> 2200 cellen / mm 2. Negenennegentig procent van de voorgesneden DSAEK weefsel had een post-processing ECD> 2400 cellen / mm 2, en 19% had een ECD> 3000 cellen / mm 2. De gemiddelde verandering in pre-tot post-processing ECD was te verwaarlozen met 1,2% (p = 0,0003, twee gepaarde-tailed t-test).Complicaties die kunnen optreden tijdens de procedure zijn: verlies van druk, asymmetrische dissectie, en belangrijke weefsel inspringen (resulterend in corneale endotheelcellen verlies). Onjuiste ontleding kan ook leiden tot weefsel perforatie. Figuur 1. Algemene regeling van hoornvliesweefsel Voorbereiding voor endothelial keratoplasty figuren 1a naar 1e zijn doorsnede representaties van de donor hoornvlies voorbereiding. Figuren 1F aan 1i zijn doorsnede voorstellingen van het hoornvlies de transplantatie ontvanger tijdens DSAEK operatie. De donor hoornvlies is gemonteerd op een kunstmatige voorste kamer en ontleed met de microkeratoom hoofd. Na het weefsel dissectie, de twee lamellen zijn gescheiden, maar de voorste lamellen (cap) wordt geplaatst terug op het bed bleef het hoornvlies voor het transport naar de chirurg. In dede operatiekamer, de chirurg maakt gebruik van een trephine naar de centrale hoornvliesweefsel verticaal doorgesneden zowel anterieure en posterieure lamel. Na trephine snijden, wordt de perifere donor hoornvlies verwijderd uit het veld. De achterste lamel wordt voorzichtig verwijderd uit de voorste lamel met een spatel. De donor achterste lamellen (DSAEK weefsel) vervangt de zieke gedeelte van de ontvanger hoornvlies (1i). De patiënt een zieke achterste hoornvlies worden verwijderd. De zieke achterste hoornvlies wordt gescoord met een intra-oculaire instrument (reverse Sinsky haak) in een grote cirkel met een diameter. Na het scoren van het zieke hoornvlies, wordt de achterste hoornvlies membraan verwijderd. De donor achterste lamellen (DSAEK weefsel) wordt geplaatst in het oog van de ontvanger. Figuur 2. Hoornvliesweefsel in Media. Hoornvliesweefsel is in het behoud media na harvesting van donor. Figuur 3. Hoornvliesweefsel op Artificial voorste kamer. Hoornvliesweefsel wordt gemonteerd op de kunstmatige voorste kamer voorafgaande basis borgring of weefsel dissectie. Hoornvliesweefsel wordt gemonteerd op kunstmatige voorste kamer met voet borgring afgesloten over het weefsel. Figuur 4. Hoornvliesweefsel Dikte te controleren. De dikte van het hoornvlies wordt gecontroleerd met behulp van echografie pachymetrie sonde op het oppervlak van het hoornvlies. Figuur 5. Hoornvliesweefsel Dissection. Microkeratoom blad wordt geplaatst op de basis met montage bericht en positie om vijf uur. Microkeratoomwordt door de cornea lamellaire ontleding maken. Figuur 6. Anterior Cap van het hoornvlies na de sectie. De voorste hoornvlies dop is gratis na microkeratoom dissectie is voltooid. Figuur 7. Ontleed Cornea in Weergavevoorkeuren Kamer. Na de sectie is voltooid, het hoornvlies wordt teruggegeven aan de weergave kamer voor transport. Figuur 8. Cornea in verpakkingen voor transport. Het hoornvlies in het weergavegebied kamer wordt vervolgens veilig verpakt voor transport naar de chirurg. Figuur 9. Oktober Verschijning van het hoornvlies. De LGO in hetuiteindelijke ontleed hoornvlies (in doorsnede) blijkt dat de cornea in twee helften verdeeld. De interface is intenser reflecterend dan het omringende weefsel zoals aangegeven door de pijl.