供体角膜内皮角膜移植术的组织准备

1。设置：无菌技术11 打开层流罩（LFH）。 打开氮气控制单元。确保软管控制台单元和氮气罐之间的连接。打开气。设置应设置燃气50-60 PSI稳压罐。汽轮机压力单位应改为3.3至3.4条。 按测试按钮。大气压力会读在737-700和泵1和2应该是低于200。单位测试完成时，会发出蜂鸣声。唐面具保护眼睛，如适用，并盖。洗手和唐非无菌手套。 LFH和开放的包裹内放置无菌包，建立无菌区。 将消毒药杯和一个既定的无菌场旁边的无菌纱布，无菌塑料脸盆。药杯倒入无菌异丙醇。用酒精棉球/垫和地方探头尖到药杯，测厚仪探头。探针尖端应为10 m的浸泡在异丙醇inutes。测厚仪探头浸泡10分钟后，从预充式注射器无菌水冲洗探头尖端去除酒精和地方探头在塑料盆。 使用无菌技术，打开拖放到无菌区无菌物品（叶片，无菌手套，和角膜的观察室），除非已预制包的一部分。 在保护媒体和内的LFH地方（ 图2）获取的角膜组织。 打开小瓶（S）和生物危害到一个合适的插座盖（S）的处置。丢弃非无菌手套。 戴上无菌手套。将预先包装的塑料盆地位于测厚仪领域的一面。输液线连接活塞和地方穗输液线年底油烟机的安全线，在这样一种方式，以防止外界的引擎盖线，从重返引擎盖和接触无菌领域之外。 执行角膜组织转移。轻轻倒入组织和媒体，在SIngle议案，从现有的小瓶一个无菌观看室。务必保持血管内皮的一面向上。放置帽室。含无菌区的组织和媒体保持商会。将LFH小瓶（S）。取下并丢弃无菌手套。 穗平衡盐溶液（BSS）瓶输液线。挂瓶的无菌的BSS约四个工作区域表面英尺。 打开两对无菌手套和消毒用毛巾袍。 执行六分钟的手术擦洗和干手器。 放在无菌袍，然后双方对无菌手套。 到无菌的领域，打开仪器箱和地方的内容。 成金属盆或药杯免除10-20 CC BSS解决方案。无菌吸管填充BSS解决方案。活塞和输液线注入前房端口连接和与BSS冲洗，使少量活塞顶部可见。 在LFH位置人工室返回纱布。降低活塞移植紧缩环逆时针转动。 2。程序使用镊子，轻轻抓住角膜巩膜轮辋。打开活塞冲洗BSS系统的同时，认真围绕角膜内皮方活塞顶部下来。如果气泡下方的角膜可见，继续与BSS注入及角膜轻微移动，删除它们。气泡一旦被删除，停止输液。确保角膜中心活塞（ 图3a）。 前房盖基地锁紧环的位置，使基地空地盖适合的标签。锁定转化基地盖盖顺时针旋转15°转动。提高活塞和完全拧紧（ 图3b）。 用无菌手套的手指，轻触角膜上，以确保有足够的压力来执行程序。 检查表面O探头放在测厚仪f角膜获得厚度读数（ 图4）。标准偏差必须小于10。如果没有，重新夺回测量。随着无菌手套的手，没有被用来执行测厚仪，通过涡轮软管手进行测厚仪和涡轮软管拧到控制单元。有协助技术员纪录测厚仪阅读。 脱去污染的手套。 使用无菌标记笔，画出向角膜中心（或不标记，如果医生喜欢没有标记）从4毫米缘线。使用吸管放置在角膜上五滴的BSS。 除非是由医生提供的具体说明，预先切开的角膜厚度测量，如果是小于600微米，300微米切割头将。如果超过600微米，350微米切割头将被使用。 对你和数量朝上面临与线程，加载到角膜头部右侧的刀片，首先指出年底，避免接触无线网络TH的刀片。 持头，每边拧到涡轮头。人工室用手指拧紧。 涡轮软管拧到涡轮机。 测试真空踏板一次，按5秒，淹没在无菌水切割头和脉冲涡轮叶片振荡。 重新拧紧活塞。 安装后，并在五点钟的位置上，基地的地方角膜。按住涡轮踏板振荡刀片（ 图5a）。 用食指和拇指，保持角膜之间的中间基地和涡轮机的顶部。转动手腕使平稳，甚至穿过整个角膜。推出涡轮踏板和直客单位解除角膜。按真空踏板，关闭真空（ 图5b）。 戴上无菌手套和复检后角膜帽测厚仪阅读被删除放置在角膜表面的探头获得第二厚度读数注意到，该组织是非常薄，很容易损坏。脱掉污染的手套。有协助技术员纪录第二测厚仪阅读。 使用无菌记号笔，放置一个标志，如果按医生的要求，在人工腔残余基质床中旬外围边缘。残余基质床放置到无菌的BSS几滴。 删除从角膜前角膜帽（ 图6），并取代人工前房角膜在角膜上，然后删除它。第应集中在角膜周边标志着以正确对齐帽，如果适用。使用拭子矛轻轻地定位在角膜上的帽。使用新鲜的矛吸收前盖下方任何的BSS。 打开活塞，转腔倒够慢下活塞，以防止变形角膜。解锁基地，并允许从BSS流量的压力，以推动基地的人工腔杯。用钳子，轻轻拉T的角膜在9轮辋，12日和3点钟位置，松开杯。一旦松动，在12点钟位置使用镊子取出角膜。观看室，内 ​​皮朝上（ 图7）放置在角膜。放置在观看室的盖子。取出无菌手套。 观看室盖拧紧。 执行后切裂隙灯角膜和记录结果的评价和反射镜。 地方商会（S）在适当的冰箱节。 以外科医生为运输包装（ 图8）。 3。代表结果适当的机械角膜光滑，均匀的层状角膜供体组织捐献角膜的结果清扫。这是光学相干断层扫描（OCT）图像截面的角膜（ 图9）所示。最后后的角膜组织，应该是足够的厚度由pachymet测量RY。在密歇根州的眼库在过去6个月，平均处理前角膜厚度为558微米，后处理后的角膜组织的厚度为158微米。 87％的100-200微米之间，10.9％计算> 200微米，2.1％计算<100微米的角膜，解剖捐助测量组织。 后的角膜组织，必须保留内皮细胞高密度（ECD）提供改善血管内皮功能的移植。反射镜是用来衡量幼儿。在过去6个月内，所有被视为资格来自密歇根州的眼库内皮角膜移植术的角膜组织幼儿> 2200细胞/毫米2。九十九％的预切DSAEK组织后处理幼儿> 2400细胞/毫米2，和19％的幼儿> 3000细胞/ mm 2。在预先处理后幼儿的平均变化是微不足道的1.2％（P = 0.0003，配对双尾t检​​验）。在手术过程中可能发生的并发症包括亏损的压力，非对称夹层，和显着的组织压痕造成角膜内皮细胞丢失。不当的夹层也可以导致组织穿孔。 图1。内皮角膜移植术图1a至1E角膜组织制备的总体方案截面表示捐献角膜的准备。 图1F 1I DSAEK手术移植的角膜截面交涉。 捐献角膜是安装在一个人工前房解剖角膜头。 组织剥离后，两片层是独立的，但前薄板（帽）的位置上保持角膜床运输医生。 在手术室，外科医生使用环钻角膜组织中央垂直穿过前部和后部的鳞片。 周边捐献角膜环钻切割后，从外地被删除。 后瓣前瓣用锅铲轻轻取出。捐助后瓣（DSAEK组织）取代收件人的角膜病变（1I）的一部分。 病人患病后角膜被删除。 病后角膜人工仪器在一个大直径的圆（反向Sinsky钩）与取得。 进球后的角膜病变，角膜后膜被删除。 捐助后瓣（DSAEK组织）被放置在收件人的眼睛。 图2。在媒体的角膜组织。角膜组织后，房委会在保护媒体rvesting来自捐助国。 图3。前房人工角膜组织。 角膜组织被装上人工前房事先基地锁紧环或组织清扫。 锁定基地组织在密封环安装到人工前房角膜组织。 图4。角膜组织厚度检查。检查角膜厚度，角膜表面上使用超声波测厚仪探头。 图5。角膜组织解剖。 角膜刀片的基础上安装后，并在五点钟的位置。 角膜通过角膜层状剥离。 图6。解剖后的角膜。前角膜帽是免费的角膜剥离后的前盖是完整的。 图7。解剖查看商会角膜剥离完成后，角膜返回运输观看室。 图8。在运输包装的角膜。在观看室的角膜，然后安全地包装运输的外科医生。 图9。华侨城华侨城外观角膜。最后解剖角膜（截面）显示，角膜被分裂成两部分。接口是更强烈的反射比周围组织，如箭头所示。