Las células del gusto son altamente especializado, con características histológicas, moleculares y fisiológicos que permiten la detección de una amplia gama de estímulos simples y moléculas químicas complejas contenidas en los alimentos. En papilas humana, individual fungiformes contener de cero a un máximo de 20 papilas gustativas. No existe un protocolo establecido para el cultivo de células gustativas humanos, aunque la capacidad de mantener las células del gusto papilas en la cultura de los ciclos múltiples de la célula sería de considerable utilidad para la caracterización de las propiedades moleculares, regeneradoras y funcionales de estas células sensoriales únicas. Los primeros estudios de las células gustativas se han realizado utilizando recién células aisladas en cultivo primario, cultivos de explantes de los roedores, o semi-intactas las papilas gustativas en cortes de tejido ^1,2,3,4. Aunque cada una de estas preparaciones tiene ventajas, el desarrollo de cultivos a largo plazo se han proporcionado beneficios significativos, en particular para los estudios de células sabor proliferación y diferenciaciónrentiation. Varios grupos, incluyendo el nuestro, se han interesado en el desarrollo y establecimiento de modelos de cultivo de células gustativas. La mayoría de los intentos de las células gustativas de la cultura han informado de viabilidad limitada, con las células por lo general no duran más allá de 3-5 días ^5,6,7,8. Recientemente hemos informado de un método exitoso para el cultivo prolongado de las células gustativas de roedores ^9. Estamos aquí informe por primera vez el establecimiento de un sistema de cultivo in vitro de células aisladas de humanos fungiformes papilas gustativas. Las células de las papilas fungiformes humana obtenidas por biopsia se mantuvieron con éxito en la cultura durante más de ocho pasos (12 meses) sin pérdida de viabilidad. Las células muestran muchas características moleculares y fisiológicos característicos de las células gustativas maduros. Gustducin y la fosfolipasa C β2, (PLC-β2) mRNA se detectó en muchas células por reacción en cadena de la polimerasa-transcriptasa y confirmados por secuenciación. Análisis de inmunohistoquímica demostraron la presencia de ráfagasducin y el PLC β2-expresión en las células gustativas cultivadas. Cultivadas células fungiformes humanos también mostraron aumentos en el calcio intracelular en respuesta a concentraciones apropiadas de los estímulos de sabor que indican que varios receptores del sabor y al menos algunas de las vías de señalización estaban presentes. Estos resultados indican que suficientes células del gusto de los humanos adultos pueden ser generados y mantenidos durante al menos ocho pasajes. Muchas de las células conservan las características fisiológicas y bioquímicas de las células aisladas de forma aguda el epitelio gusto de adultos para apoyar su uso como un sistema modelo de gusto. Este sistema permitirá realizar más estudios sobre los procesos implicados en la proliferación, diferenciación y función de mamíferos, células receptoras del gusto de una preparación in vitro.

Papilas fungiformes el gusto humano utiliza para el establecimiento de la cultura humana de células fungiformes fueron donados para la investigación tras el consentimiento informado adecuado bajo protocolos de investigación que fueron revisadosy aprobado por el comité del IRB. El protocolo (# 0934) fue aprobado por los Asociados Schulman Junta de Revisión Institucional Inc., Cincinnati, OH. Protocolo escrito a continuación se basa en los parámetros publicados reportados por Ozdener et al. 2011 ^10.