समझ कैसे neuronal dendrites के रूप में जटिल सेल आकार, विकास के दौरान प्राप्त कर रहे हैं, यह महत्वपूर्ण है करने के लिए सही परख microtubule संगठन करने में सक्षम हो. यहाँ हम एक मजबूत immunohistological लेबलिंग वृक्ष के समान द्रुमायण न्यूरॉन संवेदी dendrites के microtubule संगठन, ट्रेकिआ, मांसपेशियों की जांच के लिए विधि का वर्णन, और अन्य<em> ड्रोसोफिला</em> लार्वा शरीर दीवार के ऊतकों.
समझ कैसे जटिल सेल आकार में मतभेद प्राप्त कर रहे हैं, यह महत्वपूर्ण है सही microtubule संगठन का पालन करें. ड्रोसोफिला लार्वा शरीर दीवार में कई प्रकार की कोशिकाओं है कि सेल और ऊतक morphogenesis का अध्ययन करने के लिए मॉडल हैं हैं. उदाहरण के लिए tracheae ट्यूब 1 morphogenesis, और ड्रोसोफिला लार्वा का संवेदी न्यूरॉन्स एक प्राथमिक प्रणाली सामान्य और वृक्ष के समान भेदभाव 2-5 और 6 अध: पतन के न्यूरॉन वर्ग विशेष तंत्र की व्याख्या के लिए बन गए हैं वृक्ष के समान द्रुमायण (डीए) की जांच करने के लिए उपयोग किया जाता है .
dendrite शाखाओं के आकार में काफी न्यूरॉन वर्गों के बीच में भिन्नता है, कर सकते हैं और एक एकल 7,8 न्यूरॉन के विभिन्न शाखाओं के बीच भी. डीए न्यूरॉन्स में आनुवंशिक अध्ययन का सुझाव है कि अंतर cytoskeletal संगठन वृक्ष के समान शाखा 4,9-11 आकार में रूपात्मक मतभेद आबाद कर सकते हैं. हम एक के लिए एक मजबूत प्रतिरक्षाविज्ञानी लेबलिंग विधि प्रदान करते हैंvivo डीए संवेदी न्यूरॉन dendrite कुंज में microtubule संगठन (आंकड़े 1, 2, 1 मूवी) में ssay. इस प्रोटोकॉल विच्छेदन और पहली instar लार्वा के immunostaining, एक मंच है जब सक्रिय संवेदी न्यूरॉन dendrite परिणाम और शाखाओं में बंटी संगठन 12,13 उत्पन्न हो रही है दिखाता है .
संवेदी न्यूरॉन्स को धुंधला करने के अलावा, इस पद्धति मजबूत मांसपेशियों में microtubule संगठन की लेबलिंग (सिनेमा 2, 3), (चित्रा 3, मूवी 3) ट्रेकिआ, और शरीर के अन्य दीवार के ऊतकों को प्राप्त होता है. यह बगल में शरीर दीवार में microtubule संगठन तंत्र है कि जब जांच का विश्लेषण करने के इच्छुक जांचकर्ताओं के लिए मूल्यवान है नियंत्रण ऊतकों और सेल आकार.
समझ कैसे जटिल सेल आकृतियों इसे प्राप्त कर रहे हैं करने के लिए सही परख microtubule संगठन के लिए सक्षम होना महत्वपूर्ण है. यहाँ हम परख वृक्ष के समान द्रुमायण न्यूरॉन संवेदी dendrites के microtubule संगठन के लिए एक मजबूत immunohistologi…
The authors have nothing to disclose.
हम वित्त पोषण के लिए आरआईकेईएन धन्यवाद. P10-Gal4 Alain विन्सेन्ट (Université पॉल Sabatier, टूलूज़, फ्रांस) की एक तरह का उपहार था.
Name of the reagent | Company |
Catalogue number |
Comments (optional) |
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Forceps | Dumont | 11251-20 | |
Microscissors | FST | 15000-08 | |
Mouse anti-α-tubulin (Clone: DM1A) | Sigma | T9026 | Dilution 1/1000 |
Mouse anti-Futsch (Clone: 22C10), supernatant |
Developmental Studies Hybridoma Bank |
22C10 | Dilution 1/1000 |
Rat anti-CD8 (Clone: 5H10) | Caltag | MCD0800 | Dilution 1/1000 |
Alexa Fluor 488 anti-mouse IgG | Invitrogen | A-11001 | Dilution 1/500 |
Cy3 anti-Rat IgG | Jackson Immunoresearch | 712-166-150 | Dilution 1/200 |