一个在培养皿中的功能电机组：脊髓植和肌肉细胞共培养
Summary
体外培养肌细胞是不够的模型来概括神经支配的肌肉<em>在体内</em>。可以复制功能的运动单位<em>在体外</em>分化人类的主要肌肉细胞用鼠胚胎脊髓植支配。本文介绍了如何建立脊髓植和肌肉细胞共培养。
Abstract
人类的主要肌肉细胞单层培养aneurally很少自发的，因为在一个神经组件的情况下，细胞分化是有限的和运动神经元的刺激，失踪1人的合同。这些限制妨碍在体外培养的肌肉细胞中的许多神经肌肉疾病的研究。重要的是，单层，培养肌细胞的实验限制是可以克服的功能神经支配的肌纤维与脊髓外植体，在联合培养。
在这里，我们实现了高效，正确支配人类的主要肌肉细胞所需的不同步骤，根据Askanas 2开发的方法，导致完成分化和纤维收缩。这样做，肌肉细胞共同培养大鼠胚胎脊髓植13.5海关，背根节还连着脊髓切片。几天后，肌肉FIBERS开始合同，并最终成为通过支配跨横纹肌从外植体，连接到肌肉细胞的脊髓投射功能的突起。这种结构可以维持很多个月，只需定期交流培养基。
这宝贵的工具的应用有很多，因为它代表了一种对人体肌肉的发展和支配的多学科分析的功能模型。事实上，一个完整的从头神经肌肉交界处安装发生在培养皿中，让每一步，从根本上和生理范围内，一个容易的多参数测量。
只是举出几个例子，基因和/或蛋白质的研究，可以直接进行联合培养。此外，前和突触后的效果可以明确，并分别在神经肌肉接头处评估，从不同的物种，因为这两个组件，老鼠和人，分别为。共培养神经肌肉也可以从肌肉或神经肌肉疾病患者分离出人体肌肉细胞进行，因而可以作为候选药物的筛选工具。最后，没有特殊的设备，但需要定期BSL2设施重现功能的运动单位在培养皿。因此，这种方法是有价值的肌肉以及肌肉神经肌肉功能的生理和机理研究研究社区，在正常和疾病的情况下。
Protocol
Discussion
生理体外的工具来研究肌肉细胞的功能，在正常和病理情况下是最高的myologists的利益，因为肌肉细胞培养不重述多种细胞和细胞类型连接的重要性的。增加肌肉细胞纯化的运动神经元是不够的，因为雪旺氏细胞的存在是必需的支配有效率5，它不是拓扑（3D +特约经销）有关的协议描述这里实现功能的运动单位被成功地用于建立神经支配的肌肉细胞， 在体外和在一个完整的NMJ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
支持我们的工作是由瑞士国家科学基金会（民阵），瑞士在系统生物学（SystemsX.ch），美国肌肉萎缩症协会（MDA）含量，协会法国驳LES肌病（AFM），美国线粒体疾病基金会倡议（UMDF的），Gebert联阵基金会罕见疾病计划（GRF），瑞士肌肉疾病（SSEM / FSRMM），瑞士人寿“Jubiläumsstiftung献给Volksgesundheit和medizinische Forschung”，罗氏研究基金会和大学的研究学会巴塞尔。
Materials
| Name of reagent | Company | Catalog Number |
| HBSS | Gibco/Invitrogen | 14170 |
| MEM | Gibco/Invitrogen | 31095 |
| Medium 199 | Gibco/Invitrogen | 31153 |
| Fetal Bovine Serum | Fetal Clone Perbio | SH30066.03 |
| Insuline | Sigma | I9278 |
| Human EGF | Sigma | E9644 |
| Human FGF | Sigma | F0291 |
| Penicillin/streptomycin solution | Gibco | 15140 |
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