Summary

Hamsterlar ve Dorsal Skin Kutanöz Leishmaniasis: Antileishmanial Uyuşturucu Tarama için Faydalı Model

Published: April 21, 2012
doi:

Summary

Intradermal enjeksiyonu ile kutanöz leishmaniasis için deneysel Hamster model Optimizasyonu<em> Leishmania</em> Dorsal deriyi promastigotları. Bu yaklaşım, aşılama sırasında, takip, lezyon karakterizasyonu, tedavilerin uygulama ve klinik örneklerin alınması yararlıdır. Yiyecek ve su için harekettir, arama, oyun ve sosyal aktiviteler korunur.

Abstract

Geleneksel olarak, hamster deneysel burun veya haydut olarak aşılanır. Ancak bu sitelerde bir ülser her zaman gerçekleşir değil, lezyon büyüklüğü ölçümü zor bir işlemdir ve hayvanlar nedeniyle lezyonun, yemek nefes ve hareket zorluğu gösterir. Kutanöz leishmaniasis, genç erişkin erkek ve kadın için altın hamster hamster modeli optimize etmek için (Mesocricetus auratus) 1 ile 1,5 x l0 7 Leishmania türlerinin promastigotları ve daha sonraki lezyonların ilerlemesi ile sırt derisine intradermal enjekte edildi kadar değerlendirildi 16 hafta sonrası enfeksiyon. Farklı türleri tarafından enfeksiyona duyarlı olarak Leishmania karşı ilaçları değerlendirmek için biyo-modeli yeterli kabul edilir çünkü altın hamsteri seçildi. Kronik fakat kontrollü lezyonlar ve insanlarda görülen benzer bulguları ile klinik bir evrim hamster sonuçlarının deri enfeksiyonu. Bu nedenle, o kurulmasısertleştirmek ve ülserlerin alanına göre lezyonun boyutu ölçerek enfeksiyon f ölçüde mümkündür. Bu yaklaşım, aşılama sırasında, çok yönlülüğü ve kolay yönetim kanıtlamış, farklı tedavilerden sonra klinik örneklerin farklı yolları ve alınması yoluyla Tipik lezyonlar (ülserler), tedavilerin uygulama takip ve karakterizasyonu. Bu yöntem hareket ile ilgili hayvan yaşam kalitesi, gıda ve su, oyun ve isalso korunmuş sosyal faaliyetler için arama kullanarak.

Protocol

1. Hamsterlerin Enfeksiyon 1. Hayvanlar 140-160 g ağırlığında kendilenmiş kadın ve erkek altın hamster (Mesocricetus auratus), 6-8 hafta kullanılır. Onlar standart kemirgen kuru gıda ile beslenen ve su ad libitum ile sağlanan, ısı kontrollü konaklama, hayvan tesiste yer alır. Hayvanları kapsayan tüm işlemler Deney Hayvanları Kullanım kurumsal Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Dermotropic Leishmania parazitleri …

Discussion

Kutanöz leishmaniasis tropik ve neotropics endemiktir. Genellikle küçük olduğundan kütanöz nodüllerden gros mukozal doku tahribine arasındadır klinik belirtileri, bir değişken spektrumunun bir grup hastalığı olarak adlandırılır. En mevcut ilaçlar pahalı, uzun tedavi rejimleri gerektiren ve yeni ilaçların keşfi gerektiren, giderek etkisiz hale gelmektedir.

Fare modelinde yaygın olarak kullanılan ama bazı dezavantajlara sahiptir. Oldukça BALB / c görüldüğü gibi …

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

COLCIENCIAS ve Tropikal Hastalıklar karşı Ürünleri Geliştirme Merkezi – – CIDEPRO Bu çalışma Antioquia Üniversitesi (Codi), Fen ve Teknoloji Geliştirme Kolombiyalı Enstitüsü Araştırma Komitesi hibe ile desteklenmiştir.

Materials

Name of the reagent Tipo Company Catalogue number
Ketamine Reagent Holliday –Scott S.A  
Xilacine Reagent Synthesis  
PBS Reagent GIBCO 14190-136
Digital caliper Equipment Fisher 15-077-958
Giemsa Reagent SIGMA GS1L-1L
Formalin Reagent Nova lab 11273
Paraffin Reagent Pechiney Plastic Packaging PM-996
Haemotoxilin Reagent Nova lab 10870103
Eosin   Nova lab 10870203
Kodak Ektachem dry chemistry Equipment Kodak Ektachem DT-60
meglumine antimoniate Reagent Aventis  
Microscopy Equipment Nikon YS2-T

Referências

  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
  3. Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
  4. Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
  5. Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
  6. Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
  7. Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
  8. Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
  9. Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
  10. Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
  11. Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
  12. Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
  13. Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
  14. Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).

Play Video

Citar este artigo
Robledo, S. M., Carrillo, L. M., Daza, A., Restrepo, A. M., Muñoz, D. L., Tobón, J., Murillo, J. D., López, A., Ríos, C., Mesa, C. V., Upegui, Y. A., Valencia-Tobón, A., Mondragón-Shem, K., RodrÍguez, B., Vélez, I. D. Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs. J. Vis. Exp. (62), e3533, doi:10.3791/3533 (2012).

View Video