キイロショウジョウバエの精巣は、迅速にかつ効率的に解剖針を用いて、成人男性から分離することができます。練習すれば、人は容易に1つまたは2つの間に抗体または酵素ベースのアッセイのためのハイスループットシーケンシング以上の伝統的な分子生物学的手法により、または蛋白質のDNAやRNAの解析に十分な精巣の量を分離することができます。
キイロショウジョウバエの精巣は、幹細胞の維持と分化、減数分裂、そして相馬生殖細胞の相互作用の研究にとって重要なモデルを提供しています。精巣は、通常、0から3日間蛹のケースから羽化した後の成人男性から分離されています。野生型ハエの精巣は、容易にそれらが黄色なので、他の組織と区別が、 白色変異ハエの精巣は、室内実験のための共通の遺伝的背景には、ハエの腸への形状と色の両方で類似しているされています。黒い背景にガラスの顕微鏡スライド上に郭清を行うことはかなり容易に睾丸を識別することができます。精巣は、解剖針を用いてハエから削除されます。精巣の解剖用ピンセットを使用するプロトコルと比較して、私たちの手法は盛んに実行されている個人は400から600精巣をもたらし、時間あたり200から300の野生型のハエから精巣を解剖できるように、はるかに高速です。 白ハエからまたは精巣のサイズを小さくする変異体からの精巣は、細かく分析し、通常1時間あたり200〜400精巣を得ることが困難です。
我々は、成人男性のキイロショウジョウバエの精巣を分離するためのプロトコルを提供しています。技術は自分の両手を調整が必要なので、スキルは練習が付属しています。
The authors have nothing to disclose.
著者は、我々の研究室にこの手法を導入するためのバシアVaginに感謝。