إجراء 1.5 ساعة لتحديد معوي أنواع الثقافات مباشرة من الدم
Summary
بروتوكول السريع لتحديد المباشرة للالمعوية البرازية والأنواع الأخرى من معوي ثقافة الدم إيجابية باستخدام حمض الببتيد الأحماض النووية في مقايسة فلوري التهجين الموضع (FISH السلطة الوطنية الفلسطينية).
Abstract
المعوية هي سبب شائع للتجرثم مع هاء البرازية هي الأنواع السائدة تليها faecium هاء. لأن المقاومة للأمبيسلين وفانكومايسين في E. لا يزال من غير المألوف مقارنة البرازية المقاومة في faecium هاء ، وتطوير الاختبارات السريعة السماح التفريق بين الأنواع enterococcal المهم للعلاج المناسب والمراقبة المقاومة. وهاء البرازية FISH السلطة الوطنية الفلسطينية OE مقايسة (AdvanDx ، وبرن ، MA) يستخدم أنواعا معينة من الحيوانات الببتيد حمض النووي (السلطة الفلسطينية) تحقيقات في مضان التهجين في تنسيق الموقع ويوفر الوقت لنتائج 1.5 ساعة وإمكانية توفير معلومات مهمة عن أنواع محددة العلاج. وقد أجريت دراسات متعددة المراكز لتقييم أداء E. 1.5 ساعة البرازية / عمر الفاروق الداخلي FISH السلطة الوطنية الفلسطينية إلى إجراء مقارنة الأصلي مقايسة 2.5 ساعة وأساليب البكتريولوجيا معيار لتحديد المعوية مباشرة من زجاجة الدم ثقافة إيجابية.
Protocol
Discussion
وهاء يمكن البرازية / عمر الفاروق مقايسة FISH السلطة الوطنية الفلسطينية لتوفير تحديد معوي 2-3 أيام في وقت سابق من طرق الثقافة القياسية. إجراء تقصير للمقايسة (1.5 hourr) على التعرف السريع والتي يمكن استخدامها لتحسين النهج المتبع في العلاج المضادة للميكروبات ونتائج المرضى. وقد أجريت دراسة واحدة لدعم هذا عن طريق فورست ، وآخرون (6). على مدى سنتين متتاليتين ابتداء من عام 2005 حددت مختبر الميكروبيولوجيا مكورات إيجابية الجرام في أزواج وسلاسل المتزايد في زجاجات ثقافة الدم عن طريق الأساليب التقليدية والميكروبيولوجية في عام 2006 مضيفا ان E. البرازية / عمر الفاروق السلطة الوطنية الفلسطينية الأسماك. بالإضافة خوارزمية العلاج التي وضعها فريق المؤسسات مضادات الميكروبات (AMT) على الاستخدام الفعال للبيانات السمكية السلطة الوطنية الفلسطينية التي تم إنشاؤها بواسطة المختبر في الوقت المناسب. والنتيجة الأولية المقررة الوقت من ثقافة الدم التعادل لتنفيذ المعالجة الفعالة المضادة للجراثيم قبل وبعد وضعت السلطة الوطنية الفلسطينية السمكية في سير عمل المختبرات. تم قياس شدة الموقع ، ومرض المريض والعلاج تجريبية مضادة للميكروبات. وجرى تقييم ما مجموعه 224 مريضا في المستشفى حصلت مع enterococcal تجرثم مع 129 في الفترة التي سبقت التدخل و 95 في الفترة FISH السلطة الوطنية الفلسطينية. حددت السلطة الوطنية الفلسطينية FISH E. البرازية 3 أيام في وقت سابق من الثقافات التقليدية (1.1 مقابل 4.1 يوم ، ف <0.001). حددت السلطة الوطنية الفلسطينية FISH E. faecium الوسيط 2.3 يوم في وقت سابق (1.1 مقابل 3.4 يوم ، ف <0.001) وكان مرتبطا مع تخفيضات كبيرة إحصائيا في الوقت المناسب لبدء العلاج الفعال (1.3 مقابل 3.1 يوم ، ف <0.001) ، وانخفض لمدة 30 يوما وفيات (26 ٪ مقابل 45 ٪ ، ع = 0.04). وخلص إلى أن هذه المجموعة E. أسفرت البرازية / عمر الفاروق مقايسة السمكية بالتعاون مع السلطة الوطنية الفلسطينية خوارزمية AMT العلاج في وقت سابق من بدء العلاج المناسب التجريبية المضادة للميكروبات للمرضى المصابين بعدوى المستشفيات E. faecium تجرثم الدم.
- يجب أن لا تستعمل الكواشف بعد لا ينبغي تواريخ انتهاء الصلاحية المطبوع على التسميات والكواشف يمكن تعديلها في أي شكل من الأشكال. ينبغي أن تبقى في الثلاجة عندما لا تكون قيد الاستعمال أو أنها يمكن أن تفقد قوتها.
- ثقافة زجاجات الدم تحتاج إلى أن تكون مختلطة قبل أخذ العينات.
- من المهم عدم السماح للطرف زجاجة بالقطارة للمس مسحة الدم لأن هذا قد يسبب تلوث المواد عبر بين الشرائح ، أو التسبب في تلوث الكاشف.
- تأكد من المحافظة على المياه والاستحمام كتلة التدفئة في 55 درجة مئوية ثابتة
- لا تستخدم سوى مرشحات تصفية النطاق المزدوج أو الألوان لن يتم تمييزها بوضوح.
- لا تستخدم شرائح مجهرية أخرى من شرائح ميكروسكوب أو التهجين لن يحدث.
- من المهم أن مجهر يعمل بشكل صحيح. تأكد من لمبة المجهر هو ضمن عدد من الساعات المعتمدة للاستخدام.
- لم يتم الكشف عن بعض الأنواع النادرة التي تحدث المعوية عن طريق المسبار السلطة الوطنية الفلسطينية لأنواع التهجين المعوية الأخرى ، مثل asinii E. ، E.dispar ، haemoperoxidus E. ، cecorum E. ، columbae E. ، saccharolyticus E. ، المفرد هاء وهاء . كبريتية.
- يتم تعريف هاء هاء كما moraviensis بسبب التشابه تسلسل البرازية.
- بعض سلالات بكتيريا تنتج ذبحية مضان إيجابية كاذبة الأخضر بسبب التشابه تسلسل.
- لم يتم تقييمها زجاجات VersaTREK ثقافة الدم خلال الدراسات السريرية. أداء للكشف عن E. والمعوية البرازية غيرها من النيابة. مع زجاجات VersaTREK ثقافة الدم غير معروف.
- وقد تألق ذاتي الخضراء إيجابية كاذبة تحدث إذا تم استخدام معيار FITC مرشح بدلا من تصفية النطاق المزدوج.
- قد تحدث نتائج سلبية كاذبة نادرا بسبب النمو مختلطة أو بسبب خطأ في تقنية الفحص.
- ونوع وحالة الأجهزة المستخدمة تؤثر على المظهر المرئي للصورة التي تم الحصول عليها. قد مضان varydue لنوع المجهر العاملين ، ومصدر الضوء ومستوى الرنا الريباسي في الخلايا
- هناك حاجة إلى عزلة على وسائل الاعلام الصلبة للتمييز نمو مختلطة مع غيرها من الكائنات وتحديد مزارع الدم ايجابية مما أسفر عن النتيجة السلبية.
- لم يتم التحقق من صحة المنتج مع عينات أخرى من الثقافات الدم.
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وكانت الدراسات التي ترعاها AdvanDx.
Materials
Reagents
E. faecalis/OE PNA FISH is comprised of the following kit components:
- Fixation Solution Fixation Solution 3 mL phosphate-buffered saline with detergent.
- E. faecalis/OE PNA E. faecalis/OE PNA 1.5 mL PNA probes in hybridization. solution. Contains 30% formamide.
- 60x Wash Solution 60x Wash Solution 50 mL Tris-buffered saline with detergent
- Mounting Medium Mounting Medium 3 mL photobleaching inhibitor in Glycerol
- Quality control slides
- AdvanDX
Referências
- Oliveira, K., Chapin, K. C., Musgnug, M. C., Haase, G., Weber-Heynemann, J., DeGirolami, P. C., Dakos, J., Stender, H. Rapid identification and differentiation of Enterococcus faecalis and other Enterococcus species directly from positive blood cultures by dual color fluorescence in situ hybridization using PNA probes. , (2002).
- Chapin, K. C., Musgnug, M. C., Oliveira, K., DeGirolami, P. C., Dakos, J., Johansen, J. T., Procop, G. W., Wilson, D., Padilla, E., Gonzalez, V., Stender, H. Multicenter evaluation of E. faecalis PNA FISH for rapid identification and differentiation of Enterococcus faecalis and other Enterococcus species directly from positive blood cultures. , (2003).
- Rausei, V., Youssef, E., Morgan, M. Direct identification of Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, and Candida albicans from blood cultures using fluorescence in situ hybridization with nucleic acid probes. , (2005).
- Novak-Weekley, S. M., LaForga, M., Carey, L., Frazier, L. Validation of S. aureus PNA FISH, E. faecalis PNA FISH & C. albicans PNA FISH for Rapid Identification of Positive Blood Culture Bottles. , (2006).
- Johnson, J. K., Roberts, A. A., Forrest, G. N., Lincalis, D. P., Venezia, R. A. Rapid Identification of Enterococcus Species in Positive Blood Cultures with Therapeutic Implications. , (2006).
