In vivo beeldvorming met behulp van twee-foton laser scanning microscopie (2PLSM) maakt de studie van levende cellen en neuronale processen in de intacte hersenen. De techniek hier gepresenteerde maakt de beeldvorming van hetzelfde gebied van de hersenen op verschillende tijdstippen (chronische imaging) met microscopische resolutie waardoor het volgen van dendritische spines die de kleine structuren die de meerderheid van de postsynaptische prikkelende locaties in het CZS te vertegenwoordigen. Het vermogen om helder fijne corticale structuren op te lossen via verschillende tijdstippen heeft vele voordelen, met name in de studie van de hersenen plasticiteit waarin morfologische veranderingen in synapsen en circuit remodelleren kan helpen verklaren onderliggende mechanismen. In deze video-en aanvullend materiaal, tonen we een protocol voor chronische in vivo beeldvorming van de intacte hersenen met behulp van een verdunde-schedel voorbereiding. De verdunde-schedel preparaat is een minimaal invasieve benadering, die potentiële schade aan de dura en / of cortex voorkomt, waardoor het begin van een ontstekingsreactie. Wanneer dit protocol correct wordt uitgevoerd, is het mogelijk om duidelijk de evolutie in de dendritische wervelkolom kenmerken in de intacte hersenen gedurende een langere periode van tijd.