Deze video beschrijft een techniek om borstkankercelmonsters voor te bereiden op metabolietprofilering. Borstkankercellen worden behandeld met estradiol, dat zich bindt aan de oestrogeenreceptor alfa en verandering veroorzaakt in de samenstelling van de metaboliet.
Protocol
1. Metabolomics Assay Monstervoorbereiding Celkweek en -behandeling Zaai 400.000 MCF7 cellen per 10 cm plaat in groeimedium. Bereid voor elke behandeling drie monsters voor. Gebruik twee platen in elk monster om voldoende cellen te ontvangen voor de detectie. Verwijder op dag 3 het medium en voeg 5 ml vers medium met of zonder 10-8 M Estradiol of E2 toe aan de cellen. Behandel de cellen gedurende 24 uur (37 °C in bevochtigde 5% CO2-atmosfeer). Voorbeeldverza…
Sample Preparation for Metabolomics: A Method to Prepare Cell Samples for Metabolite Profiling. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20227, doi: (2023).