Este video describe la disociación no enzimática del tejido humano fresco para obtener células viables. La técnica se utiliza para el análisis cualitativo y cuantitativo de células positivas CD45 (linfocitos/leucocitos) presentes en varios tejidos humanos normales y malignos.
Protocol
1. Preparación del homogeneato de tejido La disección de tejidos resecados (tejido maligno y normal reseccionado del quirófano) se encuentran en el laboratorio de patología por personal capacitado para su recogida inmediata. Tumor, NANT (tomado la distancia más alejada del tumor como sea posible) y fragmentos de tejido normales se procesan rutinariamente dentro de 1 – 3 horas de escisión quirúrgica en un laboratorio BSL2 utilizando procedimientos estándar de bioseguridad para tejidos humanos. Se ilustra…
Representative Results
Figura 1: Gráfico de flujo de protocolo. Se muestra nuestro procedimiento para procesar tejidos humanos frescos y algunos enfoques analíticos que posteriormente se pueden utilizar para evaluar los linfocitos que se infiltran en los tejidos humanos. Figura 2: Imagen manchada de H&E de una huella de tej…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
GentleMacs Dissociator
Miltenyi Biotec
130-093-235
BD Medimachine is somewhat equivalent
Centrifuge 5810 R
Eppendorf
or other standard table top centrifuge
Centrifuge 5417 R
Eppendorf
or other standard microcentrifuge
Esco Class II A2 Biosafety Cabinet
ESCO global
or other standard BSL2 hood
Inverted Microscope
Nikon eclipse TS100
or other microscope compatible for a hemacytometer