Organkondisjonerte medium: Genererer medium fra høstede organceller for metastatiske kreftstudier
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Piaseczny, M.M., et al. Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior. J. Vis. Exp.(2016).
Denne videoen beskriver en metode for å generere et organkondisjonert medium avledet fra muselever. Dette modellsystemet kan brukes til å identifisere og studere organ-avledede løselige faktorer og deres effekter på organtropismen og metastatisk oppførsel av kreftceller.
Protocol
1. Generering av lunge- og hjernekondisjonerte medier I en steril vevskultur hette, invertere PBS rør som inneholder lunge eller hjerne tre ganger for å fjerne gjenværende blod fra organer og aspirere PBS som inneholder blod. Gjenta med frisk kald PBS til løsningen vises klar uten tegn på blod. Plasser lunger og hjerner i separate 60 mm2 glass petri retter. Bruk to sterile skalpellblader, hakk lunger eller hjerner ved å kutte frem og tilbake gjentatte ganger til vevsfragmenter e…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Citar este artigo
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).