सीधी बातचीत के साथ 3 डी सह-संस्कृति: मोनोसाइट्स के साथ कैंसर कोशिकाओं को सह-खेती करना उनकी बातचीत का अध्ययन करने के लिए
Published: April 30, 2023
Abstract
स्रोत: एस्पिनोज़ा-सैनचेज़, एट अल. एक एक्सट्रासेलुलर मैट्रिक्स एक्सट्रैक्ट (ईसीएमई) आधारित त्रि-आयामी प्रणाली में मोनोसाइट्स और प्राथमिक स्तन कैंसर कोशिकाओं के बीच संचार का विश्लेषण करते हैं। जे विस एक्सप्रेस। (2018).
यह वीडियो एक बाहुलर मैट्रिक्स निकालने (ECME) आधारित वातावरण में उनकी बातचीत का अध्ययन करने के लिए मोनोसाइट्स के साथ स्तन कैंसर कोशिकाओं की 3 डी सह-संस्कृति का वर्णन करता है। यह विधि कोलेजन क्षरण, प्रतिरक्षा कोशिका भर्ती और सेल आक्रमण जैसी विशिष्ट विशेषताओं का अध्ययन करने में मदद करती है।
Protocol
1.3D सह संस्कृतियों के साथ सीधे बातचीत एमआरएनए और प्रोटीन अभिव्यक्ति के विश्लेषण के लिए संस्कृति के बाद प्रत्येक सेल वंश की स्वतंत्र छंटाई की अनुमति देने के लिए सेल संस्कृति से पहले विभिन्न फ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
| U937 | American Type Culture Collection ATCC | CRL-1593.2 | Monocytic cell line/histiocytic lymphoma |
| THP-1 | American Type Culture Collection ATCC | TIB-202 | Monocytic cell line/acute monocytic leukemia |
| MCF-10A | American Type Culture Collection ATCC | CRL-10317 | Non-transformed breast cell line |
| MCF-7 | American Type Culture Collection ATCC | HTB-22 | Breast Cancer Cell line |
| MDA-MB-231 | American Type Culture Collection ATCC | HTB-26 | Breast Cancer Cell line |
| RPMI 1640 medium | GIBCO BRL Life Technologies | 11875-093 | |
| DMEM/F12 | GIBCO BRL Life Technologies | 11039-021 | |
| Antibiotic/Antimycotic | GIBCO BRL Life Technologies | 15240-062 | 100 U/mL penicillin, 100 µg/mL streptomycin, and 0.25 µg/mL Fungizone |
| Fetal Bovine Serum | GIBCO BRL Life Technologies | 16000-044 | |
| Horse serum | GIBCO BRL Life Technologies | 16050114 | |
| 0.05% Trypsin-EDTA 1X | GIBCO BRL Life Technologies | 25300-062 | |
| PBS 1X (Phosphate Buffered Saline | GIBCO BRL Life Technologies | 20012-027 | |
| Epidermal Growth Factor (EGF) | PeproTech | AF-100-15 (1.00mg) | |
| Insulin | SIGMA-ALDRICH | I1882-100MG | |
| Hydrocortisone | SIGMA-ALDRICH | H088-5G | |
| Cholera toxin Vibrio cholerae | SIGMA-ALDRICH | C8052-1MG | |
| Matrigel | Corning Inc | 356237 | Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) mouse sarcoma, extracellular matrix extract, Store at -20°C until use at 4°C |
| Lab-Tek chamber slide with cover (8 well) | Nalge Nunc International | 177402 |
Citar este artigo
3D Co-culture with Direct Interaction: Co-culturing Cancer Cells with Monocytes to Study Their Interaction. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20216, doi: (2023).