Voksen zebrafisk elektrofysiologi: En metode til at måle neuronernes ekstracellulære elektriske aktivitet i Vivo
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Johnston, L., et al. Elektrofysiologisk optagelse i hjernen af intakt voksen zebrafisk. J. Vis. Exp. (2013)
Protokollen beskriver proceduren for at udføre elektrofysiologi hos voksne zebrafisk. Denne metode kan bruges til måling af neural aktivitet in vivo.
Protocol
1. Elektrofysiologi Sluk for intubation stop-cock og hurtigt afbryde Luer lås forbinder intubation base til tricaine drop. Flyt det intakte intubationsopsætning til elektrofysiologimikroskopet og opret forbindelse til perfusionssystemet. Tænd for habitatvandet og perfuse med en hastighed på 1 ml / min i ~ 1 time for at vaske tricainen ud. Ved hjælp af en mikromanipulator under visuel kontrol skal du placere den sekundære elektrode, så elektrodespidsen kan indsæt…
Materials
| Habitat water | pH 7.0-7.4, conductivity of 400-450 μS; maintained by Instant Ocean and Sodium Bicarbonate |
||
| 0.4% Tris-Buffered Tricaine | Sigma-Aldrich | E10521 | pH 7.2-7.4; stored at -20 oC |
| 60 ml Luer lock syringe tubes | Becton, Dickinson and Company | 309653 | |
| 3-way Stopcocks with Luer connections | |||
| 0.010 in Silver wire | A-M Systems, Inc. | ||
| Q-series electrode holder | |||
| Fisherbrand 100 mm x 15 mm Petri dish | Fisher Scientific | NC9299146 | |
| 34 G Beveled needle | World Precision Instruments, Inc. | NF34BV | |
| 37 cm x 42 cm Kimwip | Kimberly-Clark Professional | TW31KEM | |
| 1/8 in diameter tube | |||
| 1 mm diameter tube | |||
| Microscope (Leica MZ APO) | Another microscope can be used |
Citar este artigo
Adult Zebrafish Electrophysiology: A Method to Measure the Extracellular Electrical Activity of Neurons In Vivo. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20192, doi: (2023).