Adult Zebrafish Electrophysiology: Eine Methode zur Messung der extrazellulären elektrischen Aktivität von Neuronen in Vivo
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Johnston, L., et al. Elektrophysiologische Aufnahme im Gehirn von intakten erwachsenen Zebrafischen. J. Vis. (2013)
Das Protokoll beschreibt das Verfahren zur Durchführung der Elektrophysiologie bei erwachsenen Zebrafischen. Diese Methode kann zur Messung der neuronalen Aktivität in vivoverwendetwerden.
Protocol
1. Elektrophysiologie Schalten Sie den Intubationsstopp-Hahn aus und trennen Sie schnell das Luer-Schloss, das die Intubationsbasis mit dem Tricain-Tropfen verbindet. Bewegen Sie das intakte Intubations-Setup an das Elektrophysiologiemikroskop und verbinden Sie es mit dem Perfusionssystem. Schalten Sie das Lebensraumwasser ein und durchdringen Sie mit einer Rate von 1 ml/min für 1 Stunde, um das Tricain auszuwaschen. Positionieren Sie die Sekundärelektrode mit einem M…
Materials
| Habitat water | pH 7.0-7.4, conductivity of 400-450 μS; maintained by Instant Ocean and Sodium Bicarbonate |
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| 0.4% Tris-Buffered Tricaine | Sigma-Aldrich | E10521 | pH 7.2-7.4; stored at -20 oC |
| 60 ml Luer lock syringe tubes | Becton, Dickinson and Company | 309653 | |
| 3-way Stopcocks with Luer connections | |||
| 0.010 in Silver wire | A-M Systems, Inc. | ||
| Q-series electrode holder | |||
| Fisherbrand 100 mm x 15 mm Petri dish | Fisher Scientific | NC9299146 | |
| 34 G Beveled needle | World Precision Instruments, Inc. | NF34BV | |
| 37 cm x 42 cm Kimwip | Kimberly-Clark Professional | TW31KEM | |
| 1/8 in diameter tube | |||
| 1 mm diameter tube | |||
| Microscope (Leica MZ APO) | Another microscope can be used |
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Adult Zebrafish Electrophysiology: A Method to Measure the Extracellular Electrical Activity of Neurons In Vivo. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20192, doi: (2023).