성인 얼룩말 피시 전기 생리학 : Vivo에서 뉴런의 세포 외 전기 활동을 측정하는 방법

1. 전기 생리학

1. 삽관 스톱 콕을 차단하고 트리카인 드립에 삽관 기지를 연결하는 Luer 잠금 장치를 신속하게 분리합니다.
   1. 그대로 삽관 설정을 전기생리학 현미경으로 이동하고 관류 시스템에 연결합니다.
   2. 트리카인을 씻어내기 위해 서식지 물을 켜고 ~ 1 시간 동안 1 ml / 분의 속도로 퍼퓨즈하십시오.
2. 시각 제어 하에 미세 조작기를 사용하여 이차 전극을 배치하여 전극 끝이 동물의 콧구멍에 삽입하거나 위턱 뒤의 딥에 삽입할 수 있도록 합니다.
3. 두개골 개구부에 1차 전극 바늘을 삽입합니다. 바늘을 조직에 삽입하여 팁이 광학 텍텀 내에서 상당히 피상적인 위치에 놓이게 됩니다.
   1. 전극이 너무 깊으면 전기 신호가 작을 수 있습니다.
4. 1차 및 이차 기준 전극 사이에 기록된 전기적 차이를 수집하고 분석한다. 이 과정을 통해 세포외 기록을 얻을 수 있습니다.
   1. 0.1kHz의 로우 패스 필터와 1Hz의 하이 패스 필터로 5kHz 샘플 속도로 갭 프리 모드에서 데이터를 수집합니다.
   2. 서식지 물이 최소 45 분 동안 침투 할 때까지 전기 생리 활성을 기록하지 마십시오.
   3. 실험 약물의 첨가 전에 적어도 15 분 동안 네이티브 활동의 기준선을 기록한다. 선택의 실험 약물과 관류를 시작하고 원하는 시간 동안 기록. 건강한 준비에서는 2-3 시간 동안 신경 활동을 기록 할 수 있습니다.