한천 장착: 장기 이미징을 위한 살아있는 제브라피시 배아 를 장착하는 기본 방법
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: Hagedorn E. J., 외. 개발 블라툴라의 외과 융합에 의해 파라바이오틱 얼룩말 물고기 배아의 생성. J. 비스 익스펙. (2016).
이 비디오는 낮은 용융 아가로즈를 사용하여 6 웰 플레이트에 살아있는 제브라피시 배아를 장착하는 단계별 지침을 설명합니다. 또한 살아있는 배아의 이미지를 획득하고 소프트웨어를 사용하여 분석하는 프로세스를 제공합니다.
Protocol
1. 현미경 설정, 이미지 수집, 처리 및 분석 0.8% 낮은 융점(LMP) 아가로즈 준비: 0.8g LMP 아가로즈를 100ml E3에 넣고 완전히 용해될 때까지 가열합니다. 뜨거운 동안, LMP 아가로즈 의 알리 쿼트 1 ml 37 °C 가열 블록에서 1.5 ml 마이크로 퍼지 튜브로. LMP 아가로즈는 37°C에서 용융 상태로 유지됩니다. 4 mg / ml (25x), pH 7.0 트리카인을 LMP 아가로즈 의 각 1 ml 알리쿼트에 37 °C. 참고 :</stro…
Materials
| LMP agarose (Ultrapure LMP agarose) | Invitrogen | 16520100 |
| Tricaine (powder) (Tricaine Methanesulfonato, Tricaine-S) | Western Chemical Inc | MS 222 |
| Glass-bottom 6-well plates used for imaging | MatTek | P06G1.5-20-F |
| 10 ml pipette pump (green) (Pipette Pump Pipettor) | Novatech International | F37898-0000 |
Citar este artigo
Agar Mounting: A Basic Method of Mounting Live Zebrafish Embryos for Long-Term Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20187, doi: (2023).