Alimentation FITC-Dextran : une méthode pour quantifier la perméabilité intestinale chez C. elegans

Published: April 30, 2023

Abstract

Source : Le, T. A. N., et autres. Mesure des effets des bactéries et des produits chimiques sur la perméabilité intestinale de Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019). 

Cette vidéo introduit une méthode de visualisation et de mesure de l’intégrité du lumen intestinal C. elegans en alimentant les vers étiquetés FITC dextran.  Le protocole d’exemple montre l’analyse faite avec des vers traités par 3,3′-diindolylmethane (DIM)-traités et pathogènes-alimentés.

Protocol

Ce protocole est un extrait de Le et al, Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). Préparation des plaques NGM pour tester les effets d’un produit chimique (DIM) sur la permé…

Representative Results

Figure 1 : L’effet du DIM sur la perméabilité intestinale de C. elegans nourri p. aeruginosa. Images de microscopie de vers de (A) E. coli OP50 sans alimentation FITC-dextran, (B) E. coli avec alimentation FITC-dextran, (C) P. aeruginosa</em…

Materials

3,3’-diindolylmethane  Sigma D9568
90×15 mm Petri dishes SPL Life Sciences, South Korea 10090
Bactor Agar Beckton Dickinson REF. 214010
Formaldehyde solution  Sigma F1635
Caenorhabditis elegans N2 Caenorhabditis Genetics Center (CGC) Wild type 
Cholesterol Sigma C3045
Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene Corning Incorporated REF. 3631
Dimethyl sulfoxide Sigma D2650
Escherichia coli OP50 Caenorhabditis Genetics Center (CGC)
Fluorescein isothiocyanate – dextran Sigma FD10S
Harmony software  PerkinElmer verson 3.5
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Bioreagents BP2213-1
Fluoromount aqueous mounting medium Sigma F4680
Operetta CLS High-Content Analysis System PerkinElmer  HH16000000
Peptone Merck EMD 1.07213.1000
Pseudomonas aeruginosa PA01 Korean Collection for Type Culture KCTC NO. 1637
Sodium Chloride Fisher Bioreagents BP358-1
Stereo Microscope Nikon, Japan SMZ800N

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Citar este artigo
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).

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