C. elegans Rastreamento de movimento: um método para avaliar a locomoção em worms
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Davies, A. G. et al. Um ensaio para medir os efeitos do etanol na velocidade de locomoção de caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2015).
Este vídeo descreve o uso de software de vídeo e rastreamento para gravar o movimento do worm em uma arena. O protocolo de exemplo mede o efeito da exposição ao etanol na locomoção de vermes.
Protocol
O protocolo a seguir é um trecho de Davies et al, An Assay for Measurement the Effects of Ethanol on the Locomotion Speed of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015). Passos a serem realizados no dia anterior ao ensaio Escolha vermes de estágio L4 para placas de médio de crescimento de nematoide fresco (NGM) semeada…
Materials
| C. elegans strains | Caenorhabditis Genetics Center | ||
| 60 x 15 mm Petri plates, triple vented | Greiner Bio-One | 628161 | Other plate brands will suffice. |
| NGM agar | Various | NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O | |
| Forceps | Various | e.g., Fisher Scientific #10300 | |
| 37 °C Incubator | Various | For drying agar | |
| Copper rings | Plumbmaster | STK#35583 (48 cap thread gasket) | 1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings |
| 100% ethanol | Various | ||
| Parafilm M | Bemis | PM996 | |
| CCD camera | QImaging | RET-4000R-F-M-12 | This camera has a large field of view. |
| Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective | Leica | MZ6 | Discontinued model, M60 is current equivalent. |
| Light source | Schott | A08923 | 3”x3” backlight for even illumination across the field of view |
| Imaging and tracking software | Media Cybernetics | ImagePro-Plus v6.0-6.3 | Newer versions of the software have tracking functions. |
Citar este artigo
C. elegans Movement Tracking: A Method to Assess Locomotion in Worms. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20163, doi: (2023).