ショウジョウバエ 光遺伝学:神経回路を操作する方法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:ド・フリース、S.E.、クランディニン、ショウジョウバエメラノガスターにおける脱出行動の光遺伝学的刺激.J. ヴィス・エクス(2013).
光遺伝学は、光の活性化がニューロンの状態の変化を引き起こす特定のオプシン光感受性タンパク質を発現させるために遺伝子操作されたニューロンを操作するために光を使用することを可能にする。ここでは、オプシン・チャネロドプシン2を用いた ショウジョウバエ における光遺伝学的アプローチについて説明する。このプロトコルの例は、ハエのエスケープ行動の背後にある神経回路を研究するために設定された光遺伝学的アッセイを特徴としています。
Protocol
このプロトコルは、ド・フリースとクランディニン、ショウジョウバエメラノガスター 、J.ヴィスExp.(2013)における脱出行動の光遺伝学的刺激からの抜粋です。 1. チャネロドプシンハエを生成する クロスUAS-ChR2は、お選びのGal4ドライバーと一緒に飛んで、我々は、光学ローブのFoma-1ニューロンで発現されているG105-Gal4を使用しています。 青?…
Representative Results
図1:垂直ホルダーと4つのクーラントホースアームが付いたLEDアレイを取り付けたヒートシンクを持つプラットフォームを示す実験的なセットアップ。 (A) アンビエントイルミネーション下のセットアップ。(B) LEDが点灯したときのセットアップ。(C) ヒートシンク上のトライスターL…
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
Citar este artigo
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).