אופטוגנטיקה מאפשרת שימוש באור כדי לתפעל נוירונים מהונדסים גנטית כדי לבטא חלבונים רגישים לאור-opsins ספציפיים שהפעלת האור שלהם גורמת לשינוי במצב הנוירון. כאן אנו מתארים גישה אופטוגנטית בדרוזופילה באמצעות opsin Channelrhodopsin2. פרוטוקול הדוגמה כולל מבחני אופטוגנטיקה שנקבעו כדי לחקור את המעגלים העצביים שמאחורי התנהגות הבריחה של הזבוב.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך דה פריס ו קלנדינין, גירוי אופטוגנטי של התנהגות בריחה ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013). 1. צור זבובים Channelrhodopsin קרוס UAS-ChR2 טס עם הנהג Gal4 על פי בחירתך, אנו משתמשים G105-Gal4, אשר בא לידי ביטוי נוירונים פומה-1 באונה האופטית. כדי למנוע את האפשרות של …
Representative Results
איור 1: הגדרה ניסיונית המציגה את הפלטפורמה עם המחזיק האנכי וארבע זרועות הקירור המחזיקות כיורי חום עם מערכי LED מודבקים אליהם. (A)ההגדרה תחת תאורת הסביבה. (B)ההגדרה כאשר נוריות LED מוארות. (ג)מבט מקרוב על נורית תלת-…
Materials
Reagent
All-trans Retinal
Advance Scientific Chemical Inc
R3041
Equipment
Heat Sink 9.2 C/W
Luxeonstar
LPD30-30B
30 mm square X 30 mm high
Carclo 18° Tri-Lens
Luxeonstar
10507
Blue Rebel LED on Tri-Star Base
Luxeonstar
MR-B0030-20T
470 nm, 174 lm @ 700 mA.
700 mA BuckPuck DC Driver
Luxeonstar
3021-D-E-700
Wiring Harness for BuckPuck Driver
Luxeonstar
3021-HE
Pre-cut thermal adhesive tape
Luxeonstar
LXT-S-12
20 mm Hex Base
Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID
McMaster-Carr
5307K49
Snap-Loc Coolant Hose Connector
McMaster-Carr
5307K39
¼" NPT Male
Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply