Temperatuurgradiënttest: een methode om de temperatuurvoorkeur bij Drosophila-larven te testen
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J.Vis. Exp. (2018).
Drosophila-fruitvliegen kunnen kleine temperatuurveranderingen onderscheiden en daarom omgevingen met gunstige thermische omstandigheden selecteren. Deze video beschrijft een gedragstest die de temperatuurvoorkeur van Drosophila-larven test op een lineaire thermische gradiënt.
Protocol
Dit protocol is een uittreksel uit Liu et al. Een temperatuurgradiënttest om thermische voorkeuren van Drosophila-larven te bepalen, J. Vis. Exp. (2018). 1. Temperatuurverloop instellen Eenrichtingsgradiënt voorbereiden Om tijdens de test een vochtige omgeving te creëren, plaatst u de twee aluminium blokken die zijn verbonden met twee waterbaden op natte papieren handdoeken, gescheiden door 10 cm (figuur 1A</…
Representative Results
Figuur 1: Enkele en bidirectionele gradiënttestopstellingen. (A) Single-directionele gradiënt setup met twee aluminium assay platen op twee aluminium blokken. De temperaturen van de aluminium blokken worden geregeld door circulerend water uit twee waterbaden. (B) De opstelling van de drie aluminium blokken, waterbaden en een aluminium plaat (250 x 220 mm) voor een bidirectionele gradië…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Citar este artigo
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).