Sıcaklık Gradyan Testi: Drosophila Larvalarında Sıcaklık Tercihini Test Etmek İçin Bir Yöntem
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Liu, J., vd. Drosophila Larvalarının Termal Tercihlerini Belirlemek için Bir Sıcaklık Gradyan Tahlil. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila meyve sinekleri sıcaklıktaki küçük değişiklikleri ayırt edebilir ve bu nedenle uygun termal koşullara sahip ortamları seçebilir. Bu video, Drosophila larvalarının sıcaklık tercihini doğrusal bir termal gradyan üzerinde test eden davranışsal bir testi açıklar.
Protocol
Bu protokol Liu ve ark.’dan bir alıntıdır. Drosophila Larvalarının Termal Tercihlerini Belirlemek için Sıcaklık Gradyan Tahlili, J. Vis. Exp. (2018). 1. Sıcaklık Gradyan Kurulumu Tek yönlü degrade hazırlama Tahliller sırasında nemli bir ortam ortamı oluşturmak için, iki su banyosuna bağlı iki alüminyum bloğu 10 cm (Şekil 1A)ile ayrılmış ıslak kağıt havlularayerleştirin.</li…
Representative Results
Şekil 1: Tek ve çift yönlü degrade test kurulumları. (A) İki alüminyum blok üzerinde iki alüminyum test plakası ile tek yönlü gradyan kurulumu. Alüminyum blokların sıcaklıkları, iki su banyosundan gelen suyun sirkülasyonu ile kontrol edilir. (B) Üç alüminyum bloğun, su banyolarının ve alüminyum plakanın (250 x 220 mm) çift yönlü gradyan için düzenlenmesi. So…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Citar este artigo
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).