Ensayo de gradiente de temperatura: un método para probar la preferencia de temperatura en larvas de Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Liu, J., et al. Un ensayo de gradiente de temperatura para determinar las preferencias térmicas de larvas de Drosophila. J. Vis. (2018).
Las moscas de la fruta drosophila pueden distinguir pequeños cambios de temperatura y, por lo tanto, seleccionar ambientes con condiciones térmicas favorables. Este video describe un ensayo conductual que prueba la preferencia de temperatura de las larvas de Drosophila en un gradiente térmico lineal.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Liu et al. Un ensayo de gradiente de temperatura para determinar las preferencias térmicas de larvas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2018). 1. Configuración del gradiente de temperatura Preparar gradiente monodireccional Para crear un ambiente húmedo durante los ensayos, coloque los dos bloques de aluminio conectados a dos baños de agua sobre toallas de papel mojado, separados por 10 cm(Figura 1…
Representative Results
Figura 1: Configuraciones de ensayo de degradado simples y bidireccionales. (A) Configuración de gradiente monodireccional con dos placas de ensayo de aluminio en dos bloques de aluminio. Las temperaturas de los bloques de aluminio se controlan circulando por el agua circulante desde dos baños de agua. (B) La disposición de los tres bloques de aluminio, baños de agua y una placa de al…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Citar este artigo
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).