Test del gradiente di temperatura: un metodo per testare la preferenza di temperatura nelle larve di Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Liu, J., et al. J. Vis. Exp. (2018).
I moscerini della frutta Drosophila possono distinguere piccoli cambiamenti di temperatura e quindi selezionare ambienti con condizioni termiche favorevoli. Questo video descrive un saggio comportamentale che testa la preferenza di temperatura delle larve di Drosophila su un gradiente termico lineare.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Liu et al. Un saggio del gradiente di temperatura per determinare le preferenze termiche delle larve di Drosophila, J. Vis. Exp. 1. Configurazione del gradiente di temperatura Preparare la sfumatura direzionale singola Per creare un ambiente umido durante i test, posizionare i due blocchi di alluminio collegati a due bagni d’acqua su tovaglioli di carta bagnati, separati da 10 cm(Figura 1</str…
Representative Results
Figura 1: Configurazioni di test del gradiente singolo e bidirezionale. (A) Configurazione a gradiente direzionale singolo con due piastre di dosaggio in alluminio su due blocchi di alluminio. Le temperature dei blocchi di alluminio sono controllate dall’acqua circolante da due bagni d’acqua. (B) La disposizione dei tre blocchi di alluminio, dei bagni d’acqua e di una piastra di alluminio…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Citar este artigo
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).