Dissociation à cellule unique de Caenorhabditis elegans: Une méthode pour isoler les cellules vivantes
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Allemagne, E.M., et autres. Isolement des populations spécifiques de neurones du ver rond Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Cette vidéo décrit une méthode pour dissocier les vers entiers en une suspension à cellule unique adaptée au FACS ou à l’immunoprécipitation des cellules intactes.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Germany et coll., Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Préparation et collecte de vers âgés pour l’isolement cellulaire REMARQUE: Expliqué ci-dessous est l’isolement des neuron…
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Citar este artigo
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).