Manikür Bozulması: Drosophila Larvalarından Hemolimf Toplama Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Reimels, T. A. ve Pfleger, C.M. Drosophila Larvalarında Lenf Bezi ve Hemositleri İnceleme Yöntemleri. J. Vis. Exp. (2016).
Drosophila hemolimf, larva ve yetişkin aşamalarında vücutta dolaşan hem kan hem de interstisyel sıvı görevi görür. Bu videoda, dolaşımdaki hücreleri ölçmek için larva hemolimfini toplamak için bir protokol açıklanmaktadır.
Protocol
Bu protokol Reimels ve Pfleger’den bir alıntıdır, Drosophila Larvalarında Lenf Bezi ve Hemositleri İnceleme Yöntemleri, J. Vis. Exp. (2016). 1. Dolaşımdaki Hemosit Konsantrasyonu Bu test için kabaca aynı gelişim aşamasında larva elde etmek için, dişilerin 2 – 6 saatlik sabit bir süre boyunca yumurta bırakmasına izin vererek yumurta toplamayı kısıtlayın. Larvaları 1x fosfat tamponlu salin (PBS) ile dolu diseksiyon kabı kuyularında t…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
Citar este artigo
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).