キューティクルの破壊:ショ ウジョウバエ幼虫 から血中リンパを採取する方法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:ライメルス、T.A.とPfleger、C.M.ショウジョウバエのリンパ腺と血球を調べる方法.J. ヴィス・エクス(2016).
ショウジョウバエの溶血は、幼虫および成人期に全身を循環する血液および間質液の両方として機能する。このビデオでは、循環細胞を定量化するために幼虫のヘモリンフを収集するプロトコルについて説明します。
Protocol
このプロトコルは、ライメルスとPflegerからの抜粋です,ショウジョウバエラルヴェのリンパ腺と血球を調べる方法, J. Vis. Exp. (2016). 1. 循環性ヘモサイト濃度 このアッセイの発達段階とほぼ同じ幼虫を得るために、メスが2〜6時間の一定期間卵を産むことを許可することによって卵の採取を制限する。 1xリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で満たされた皿?…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
Citar este artigo
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).