Este artigo descreve uma técnica para remover o puparium de um inseto, mantendo a pupa interna intacta e, portanto, apta para uma investigação mais aprofundada. O protocolo de exemplo mostra o procedimento com Drosophila guttifera; no entanto, essa técnica é aplicável a outras espécies de Drosophila.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Fukutomi et al., Métodos para Encenação de Períodos Pupal e Medição da Pigmentação das Asas de Drosophila guttifera, J. Vis. Exp. (2018). 1. Remoção de pupário NOTA Pupas de Drosophila são cobertas por uma estrutura chamada puparium. Um inseto de Muscomorpha (moscas) não derrama sua cutícula larval na pupação; em vez disso, endurece a cut…
Representative Results
Figura 1. Ilustração da remoção de pupário. (A) Coloque um lado ventral de pupa sobre um pedaço de fita dupla face. Remova a parte anterior do pupário. (B) Quebre o pupário com fórceps do lado ventral. (C) Depois de quebrar o puparium, tire a pupa usando um pincel.
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
Drosophila guttifera
The Drosophila Species Stock Center at the U.C. San Diego
15130-1971.10
Drosophila guttifera, a fruit fly species used in this article
NICETACK double sided tape
Nichiban
NW-15SF
Double sided tape, for removing puparium
Dumont #5 forceps
Fine Science Tools
11252-20
Forceps, for removing puparium
Van Gogh VISUAL Paint brush
Talens Japan
GWVR-#5/0
Paint brush, for removing puparium
Stereomicroscope
Olympus
SZX16
Stereomicroscope, for morphological observation
Digital camera
Olympus
DSE-330-A
Digital camera, for imaging
Falcon standard tissue culture dish
Corning
353002
Plastic Petri dish (diameter 60 mm x height 15 mm)