Journal
/
생화학
/
Strategisk screening og karakterisering av Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for vellykket krystallisering
JoVE 신문
생화학
This content is Free Access.
JoVE 신문 생화학
Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization

Strategisk screening og karakterisering av Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for vellykket krystallisering

DOI:
10.3791/60747-v

•

09:19 min

•

March 16, 2020

•

, , , , , ,
1Laboratory of Biomolecular Research,Paul Scherrer Institute, 2Department of Biology,ETH Zürich, 3Center for Radiopharmaceutical Sciences,Paul Scherrer Institute, 4Laboratory of Molecular Biology,Medical Research Council

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:45Cell Membrane Solubilization and Protein Extraction
  • 03:53UV-VIS Spectroscopy
  • 04:33Automated Size-Exclusion Chromatography of Rhodopsin and Rhodopsin Mini-Go Complex
  • 06:04Deglycosylation
  • 06:44Results: UV-VIS Spectroscopy, SEC, and SDS-PAGE
  • 08:34Conclusion

Summary

자동 번역

자동 번역

Denne rapporten beskriver screening av ulike vaskemidler for å forberede den visuelle GPCR, rhodopsin, og dens kompleks med mini-Go. Biokjemiske metoder som karakteriserer kvaliteten på komplekset på forskjellige stadier under rensing er demonstrert. Denne protokollen kan generaliseres til andre membranproteinkomplekser for deres fremtidige strukturelle studier.

Tags

Keywords: GPCRMini-G ProteinSignal TransductionMembrane Protein ComplexDetergent ScreeningCrystallizationHEK293 CellsAffinity Purification9-cis RetinalBuffer Exchange

Article

Embed

플레이리스트에 추가

Usage Statistics

Related Videos

check_url/kr/60747?article_type=v

Protein Complex Affinity Capture fra Cryomilled pattedyrceller
check_url/kr/60747?article_type=v

Måling av G-proteinkoblet reseptor-signalering via radiomerket GTP-binding
check_url/kr/60747?article_type=v

Biokjemiske og strukturelle karakteristikk av karbohydrater Transport substrat-binding-protein SP0092
check_url/kr/60747?article_type=v

Voksende Protein krystaller med forskjellige dimensjoner bruke automatisert krystallisering kombinert med In Situ dynamisk lysspredning
check_url/kr/60747?article_type=v

Ionebytte kromatografi (IEX) koblet til multi-Angle lysspredning (MALS) for proteiner og karakterisering
check_url/kr/60747?article_type=v

Derivatisering av proteinkrystaller med I3C ved hjelp av tilfeldig mikroseede matrix screening
check_url/kr/60747?article_type=v

Krystallisering og strukturell bestemmelse av et enzym:Substrat kompleks av seriell krystallografi i en allsidig mikrofluidisk chip
check_url/kr/60747?article_type=v

Målesammensetning av CD95 Dødsinduserende signalkompleks og behandling av Procaspase-8 i dette komplekset
check_url/kr/60747?article_type=v

Proteinkrystallisering med høy gjennomstrømning via mikrodialyse
check_url/kr/60747?article_type=v

Høy gjennomstrømningsscreening for å oppnå krystalltreff for proteinkrystallografi

Read Article