성공적인 결정화를 위한 시각적 GPCR-mini-G 단백질 신호 복합체의 전략적 스크리닝 및 특성화

JoVE 신문
생화학

This content is Free Access.

JoVE 신문 생화학

Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

성공적인 결정화를 위한 시각적 GPCR-mini-G 단백질 신호 복합체의 전략적 스크리닝 및 특성화

DOI:

10.3791/60747-v

•

09:19 min

•

March 16, 2020

•

Filip Pamula², Jonas Mühle, Alain Blanc, Rony Nehmé, Patricia C. Edwards, Christopher G. Tate, Ching-Ju Tsai

¹Laboratory of Biomolecular Research,Paul Scherrer Institute, ²Department of Biology,ETH Zürich, ³Center for Radiopharmaceutical Sciences,Paul Scherrer Institute, ⁴Laboratory of Molecular Biology,Medical Research Council

Chapters

00:04Introduction
00:45Cell Membrane Solubilization and Protein Extraction
03:53UV-VIS Spectroscopy
04:33Automated Size-Exclusion Chromatography of Rhodopsin and Rhodopsin Mini-Go Complex
06:04Deglycosylation
06:44Results: UV-VIS Spectroscopy, SEC, and SDS-PAGE
08:34Conclusion

Summary

자동 번역

이 보고서는 시각적 GPCR, 로도프신 및 mini-G_o와그 복합체를 준비하기위한 다른 세제의 선별을 설명합니다. 정제 동안 다른 단계에서 복합체의 품질을 특성화하는 생화학적 방법이 입증되었습니다. 이 프로토콜은 그들의 미래 구조 연구를 위해 다른 막 단백질 복합체로 일반화될 수 있다.

성공적인 결정화를 위한 시각적 GPCR-mini-G 단백질 신호 복합체의 전략적 스크리닝 및 특성화

•

•

•

Chapters

Summary

자동 번역

Tags

Article

Embed

플레이리스트에 추가

Usage Statistics

Related Videos

Cryomilled 포유 동물 세포에서 단백질 단지 선호도 캡처

무선 표지 된 GTP 결합을 통한 G- 단백질 결합 수용체 신호 측정

탄수화물 전송 기질 바인딩 단백질 SP0092의 생 화 학적 및 구조적 특성

사용 하 여 다른 크기와 성장 단백질 결정 자동화 현장에서 동적 산란과 함께 결정 화

단백질 분리 및 특성에 대 한 다 각 산란 (MALS)를 결합 하는 이온 교환 크로마토그래피 (전류 구동)

무작위 마이크로시드 매트릭스 스크리닝을 사용하여 I3C로 단백질 결정의 파생

다목적 미세 유체 칩의 직렬 결정학에 의한 효소의 결정화 및 구조적 결정: 기질 복합체

이 단지에서 CD95 사망 유도 신호 복합체 및 프로카스파스-8의 처리 구성 측정

Microdialysis를 통한 High-Throughput Protein Crystallization

단백질 결정학을 위한 결정 적중을 얻기 위한 고처리량 스크리닝

Read Article