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सफल क्रिस्टलीकरण के लिए विजुअल जीपीसीआर-मिनी-जी प्रोटीन सिग्नलिंग कॉम्प्लेक्स की रणनीतिक स्क्रीनिंग और लक्षण वर्णन
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Strategic Screening and Characterization of the Visual GPCR-mini-G Protein Signaling Complex for Successful Crystallization
DOI:

09:19 min

March 16, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:45Cell Membrane Solubilization and Protein Extraction
  • 03:53UV-VIS Spectroscopy
  • 04:33Automated Size-Exclusion Chromatography of Rhodopsin and Rhodopsin Mini-Go Complex
  • 06:04Deglycosylation
  • 06:44Results: UV-VIS Spectroscopy, SEC, and SDS-PAGE
  • 08:34Conclusion

Summary

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इस रिपोर्ट में विजुअल जीपीसीआर, रोडोप्सिन और मिनी-जीके साथ इसके कॉम्प्लेक्स को तैयार करने के लिए विभिन्न डिटर्जेंट की स्क्रीनिंग का वर्णन किया गया है । शुद्धिकरण के दौरान विभिन्न चरणों में परिसर की गुणवत्ता की विशेषता वाले जैव रासायनिक तरीकों का प्रदर्शन किया जाता है। इस प्रोटोकॉल को उनके भविष्य के संरचनात्मक अध्ययनों के लिए अन्य झिल्ली प्रोटीन परिसरों में सामान्यीकृत किया जा सकता है।

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