PCR: A Reação em Cadeia da Polimerase

A reação em cadeia de polimerase, ou PCR, é uma técnica usada para amplificar o DNA através do termociclismo – ciles de temperatura mudam em intervalos de tempo fixos. Usando uma polimerase de DNA termoestável, o PCR pode criar numerosas cópias de DNA a partir de blocos de construção de DNA chamados dNTPs. Há três etapas no PCR: desnaturação, ressarcialização e alongamento. A desnaturação é o primeiro passo do ciclo e faz com que o DNA derreta, interrompendo as ligações de hidrogênio entre as bases resultando em DNA mono-encalhado. A ressarência reduz a temperatura o suficiente para permitir a ligação dos primers oligonucleotídeos ao modelo de DNA. Durante a etapa de alongamento, a polimerase de DNA sintetizará novo DNA de dupla cadeia.

Este vídeo fornece uma introdução ao procedimento PCR. Os princípios básicos do PCR são descritos, bem como um procedimento passo-a-passo para a configuração de uma reação pcr generalizada. O vídeo mostra os componentes necessários para uma reação de PCR, inclui instruções para o design do primer e fornece dicas úteis para garantir reações bem-sucedidas do PCR.