Summary

동물 행동 평가와 컨볼루션 신경망의 통합으로 와사비-알코올 맛-냄새 상호작용 연구

Published: August 16, 2024
doi:

Summary

이 기사에서는 와사비로 인한 따끔거림에 대한 알코올 음료의 냄새를 맡을 때 억제 능력을 측정하는 일련의 방법에 대해 설명합니다.

Abstract

음식 준비에 일반적으로 사용되는 상업용 와사비 페이스트에는 섭취 시 자극적인 감각을 유발하는 화학감각 이소티오시아네이트(ITC)의 상동 화합물이 포함되어 있습니다. 식이 알코올 음료의 냄새를 맡는 것이 와사비의 매운맛에 미치는 영향은 연구된 적이 없습니다. 대부분의 관능평가 연구가 개별 식품과 음료에 개별적으로 초점을 맞추는 반면, 와사비를 섭취할 때 술 냄새를 맡는 후각 연구에 대한 연구는 부족합니다. 여기에서는 동물 행동 연구와 컨볼루션 신경망을 결합하여 쥐가 술 냄새를 맡고 와사비를 섭취할 때 쥐의 얼굴 표정을 분석하는 방법론을 개발합니다. 그 결과, 훈련되고 검증된 딥 러닝 모델이 사전 교육 자료 필터링 없이 와사비 음성 주류 양성 그룹 클래스에 속하는 와사비와 알코올의 동시 처리를 묘사하는 이미지의 29%를 인식한다는 것을 보여줍니다. 선택된 비디오 프레임 이미지로부터 얻어진 쥐의 찡그린 얼굴 척도 점수의 통계적 분석은 술의 유무 사이에 유의한 차이(P < 0.01)를 보여줍니다. 이 발견은 식이 알코올 음료가 쥐에서 와사비 유도 반응을 감소시키는 영향을 미칠 수 있음을 시사합니다. 이 조합 방법론은 향후 개별 ITC 화합물 스크리닝 및 스피릿 성분의 관능 분석에 대한 잠재력을 가지고 있습니다. 그러나 알코올에 의한 와사비 매운맛 억제의 기본 메커니즘을 조사하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.

Introduction

일반적으로 와사비로 알려진 와사비아 자포니카는 식품 준비 1,2에서 인정을 받았습니다. 섭취 시 눈물, 재채기 또는 기침을 특징으로 하는 강렬한 감각 경험은 잘 알려져 있습니다. 와사비의 이러한 독특한 매운맛은 화학감각 이소티오시아네이트(ITC)의 상동 화합물에 기인할 수 있습니다. 이들은 ω-알케닐 및 ω-메틸티오알킬 이소티오시아네이트로 분류할 수 있는 휘발성 유기황 식물 화학 물질입니다3. 이러한 화합물 중 알릴 이소티오시아네이트(AITC)는 양 고추냉이 및 겨자와 같은 십자화과에 속하는 식물에서 발견되는 가장 우세한 천연 ITC 제품입니다4. 상업용 와사비 페이스트는 일반적으로 양 고추냉이로 제조되므로 AITC는 이러한 상업용 제품의 품질 관리에 사용되는 화학 마커입니다5.

식이 알코올 음료와 와사비를 넣은 요리를 함께 먹는 것은 문화적 성향의 한 예라고 할 수 있다6. 주관적으로 이 조합은 와사비와 증류주 사이의 매운맛과 열을 보완하여 전반적인 요리 경험을 향상시킬 수 있습니다. 동물 질적 행동 평가(QBA)는 단기 또는 장기 외부 자극에 대한 반응으로 피험자의 행동 변화를 수치 용어7를 사용하여 검사하는 포괄적인 전체 동물 방법론적 접근 방식입니다. 이 방법에는 통증 테스트, 운동 테스트, 학습 및 기억력 테스트, 설치류 모델8을 위해 특별히 설계된 감정 테스트가 포함됩니다. 그러나 후각과 함께 구음의 시너지 감각 평가를 조사한 연구는 지금까지 문헌에서 드물게 남아 있습니다 9,10. 화학감각에 관한 대부분의 연구는 개인의 식품과 음료 섭취를 개별적으로 조사하는 것에 국한되어 있다11. 따라서 와사비를 섭취하는 동안 술을 킁킁거리는 행위와 관련된 맛과 냄새의 상호작용에 대한 연구가 부족합니다.

와사비에 의한 찌르는 느낌은 통각(nociception)의 한 형태로 여겨지므로12, 동물행동평가는 설치류 동물의 통각감각반응을 평가하는 데 매우 적합하다 8,13,14. MGS(mouse Griace scale) 점수로 알려진 마우스의 통각을 평가하는 방법은 Langford et al.15,16에 의해 개발되었습니다. 이 행동 연구 방법은 실험 쥐가 보여준 얼굴 표정 분석에 의존하는 통증 관련 평가 접근 방식입니다. 실험 설정은 투명 케이지와 비디오 녹화를 위한 2개의 카메라를 포함하여 간단합니다. 자동 데이터 캡처를 위한 첨단 기술(17,18,19)을 통합함으로써 정량적 및 질적 행동 측정을 얻을 수 있어 행동 모니터링 중 동물 복지를 향상시킬 수 있습니다(20). 결과적으로, MGS는 중단되지 않고 임시방편적인 방식으로 동물에 대한 다양한 외부 자극의 영향을 연구하는 데 적용될 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. 그러나 채점 과정에는 토론자가 평가할 수 있도록 몇 개(10개 미만)의 비디오 프레임 이미지만 선택되며 사전 교육이 필요합니다. 많은 수의 샘플 이미지를 스코어링하는 것은 노동 집약적일 수 있습니다. 이 시간 소모적인 문제를 극복하기 위해 여러 연구에서 MGS 점수21,22를 예측하기 위해 기계 학습 기술을 사용했습니다. 그러나 MGS는 지속적인 측정이라는 점에 유의하는 것이 중요합니다. 따라서 다중 클래스 분류 모델은 와사비를 동시에 섭취하고 액체 냄새를 맡는 쥐의 이미지가 일반 쥐의 이미지와 유사한지 여부를 결정하는 것과 같은 논리적이고 범주적인 문제를 평가하는 데 더 적합합니다.

이 연구에서는 생쥐의 맛-냄새 상호작용을 조사하는 방법론을 제안하였다. 이 방법론은 동물 행동 연구와 CNN(Convolutional Neural Network)을 결합하여 쥐 피험자의 얼굴 표정을 분석합니다. 두 마리의 쥐가 정상적인 행동 조건에서, 와사비에 의한 통각을 경험하는 동안, 그리고 특별히 설계된 케이지에서 술을 냄새를 맡는 동안 세 번 관찰되었습니다. 생쥐의 얼굴 표정은 비디오로 녹화되었으며, 생성된 프레임 이미지는 딥 러닝(DL) 모델의 아키텍처를 최적화하는 데 활용되었습니다. 그런 다음 독립적인 이미지 데이터 세트를 사용하여 모델을 검증하고 실험 그룹에서 획득한 이미지를 분류하기 위해 배포했습니다. 쥐가 와사비 섭취 중 동시에 술 냄새를 맡았을 때 와사비 톡 쏘는 맛이 억제되는 정도를 확인하기 위해 인공 지능이 제공하는 통찰력은 다른 데이터 분석 방법인 MGS 점수16점과의 교차 검증을 통해 더욱 확증되었습니다.

Protocol

이 연구에서는 체중이 17-25g 사이인 7주 된 ICR 수컷 마우스 두 마리를 동물 행동 평가에 활용했습니다. 모든 주거 및 실험 절차는 교육 및 연구에서 인간 및 동물 피험자 사용에 관한 홍콩 침례 대학 위원회의 승인을 받았습니다. 동물실은 25°C의 온도와 40%-70%의 실내 습도로 12시간 명암 주기로 유지되었습니다. 1. 케이지 디자인 케이지 구성을 위해 8mm x 8mm x …

Representative Results

이 연구의 주요 목적은 생쥐의 미각-후각 상호 작용을 조사하기 위한 강력한 프레임워크를 확립하는 것입니다. 이 프레임워크는 인공 지능과 QBA의 사용을 통합하여 예측 분류 모델을 개발합니다. 또한 DL에서 얻은 통찰력은 내부 독립 분석을 위해 정량적 MGS 평가와 교차 검증됩니다. 이 방법론의 주요 응용 프로그램은 쥐가 식이 알코올 음료의 냄새를 맡을 때 와사비 호출 통각의 억제 정도를 조사…

Discussion

이 연구에서 미각-후각 상호작용을 연구하기 위해 제안된 방법은 Langford et al.16에 의해 개발된 생쥐의 통증 얼굴 표정을 위한 행동 코딩의 원래 방법을 기반으로 합니다. 최근에 발표 된 여러 기사는 자동 마우스 얼굴 추적 및 후속 MGS 점수 21,26,27,28에 대한 CNN을 소개했습니다. CNN을 ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Z. Cai는 Kwok Yat Wai Endowed Chair of Environmental and Biological Analysis의 설립을 위한 Kwok Chung Bo Fun Charitable Fund의 재정적 지원에 감사드립니다.

Materials

Absolute ethanol (EtOH) VWR Chemicals BDH CAS# 64-17-5
Acrylonitrile butadiene styrene bricks Jiahuifeng Flagship Store https://shop.paizi10.com/jiahuifeng/chanpin.html
Acrylonitrile butadiene styrene plates Jiahuifeng Flagship Store https://shop.paizi10.com/jiahuifeng/chanpin.html
Allyl isothiocyanate (AITC) Sigma-Aldrich CAS# 57-06-7
Anhydrous dimethyl sulfoxide Sigma-Aldrich CAS# 67-68-5
Chinese spirit Yanghe Qingci https://www.chinayanghe.com/article/45551.html
Commercial wasabi S&B FOODS INC. https://www.sbfoods-worldwide.com
Formic acid (FA) VWR Chemicals BDH CAS# 64-18-6
GraphPad Prism 5 GraphPad https://www.graphpad.com
HPLC-grade acetonitrile (ACN) VWR Chemicals BDH CAS# 75-05-8
HPLC-grade methanol (MeOH) VWR Chemicals BDH CAS# 67-56-1
Microsoft Excel 2016 Microsoft https://www.microsoft.com 
Microsoft PowerPoint 2016 Microsoft https://www.microsoft.com
Milli-Q water system Millipore https://www.merckmillipore.com
Mouse: ICR Laboratory Animal Services Centre (The Chinese University of Hong Kong, Hong Kong, China) N/A
Peanut butter Skippy https://www.peanutbutter.com/peanut-butter/creamy
Python v.3.10 Python Software Foundation https://www.python.org 
Transparent acrylic plates Taobao Store https://item.taobao.com/item.htm?_u=32l3b7k63381&id=60996545797
0&spm=a1z09.2.0.0.77572e8dFPM
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Ngan, H., Qi, Z., Yan, H., Song, Y., Wang, T., Cai, Z. Integration of Animal Behavioral Assessment and Convolutional Neural Network to Study Wasabi-Alcohol Taste-Smell Interaction. J. Vis. Exp. (210), e66981, doi:10.3791/66981 (2024).

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