Summary

Un approccio chirurgico rivisto per indurre idramici endolymphatic in Guinea Pig

Published: June 04, 2020
doi:

Summary

Questo articolo dimostra un approccio extradurale per annientare il sacco endolofico della cavia e ferire il condotto endolintico con un plettro fine al fine di indurre idrami sperimentali endomphatic.

Abstract

Gli idramici endolofili sono un allargamento dei supporti scalatici che è più spesso associato alla malattia di Meniere, anche se i meccanismi di fitofisiologia rimangono poco chiari. Al fine di studiare adeguatamente gli attributi degli idramici endolizzatici, come le origini della perdita dell’udito a bassa frequenza, è necessario un modello affidabile. La cavia è un buon modello perché sente nelle regioni a bassa frequenza che sono putatively colpite da idramici. Ricerche precedenti hanno dimostrato che gli idropi endolofilici possono essere indotti chirurgicamente attraverso approcci intradurali o extradottici che comportano la perforazione sul condotto endolinofico e sul sacco. Tuttavia, non si sa se fosse possibile creare un modello di idrapiliadico utilizzando un approccio extradurale che evitava pericolose perforazioni sul condotto endolittico e sul sac. L’obiettivo di questo studio era dimostrare un approccio extradurale rivisto per indurre idropi endolincici sperimentali a 30 giorni post-operatori, cancellando il sacco endolinctico e ferendo il condotto endolintico con un plettro fine. La dimensione del campione era composta da sette cavie. Sono state effettuate misurazioni funzionali dell’udito e sono state successivamente raccolte le ossa temporali per l’analisi istologica. L’approccio ha avuto un tasso di successo dell’86% nel raggiungere idropi endollymphatic. Il rischio di perdita di liquido cerebrospinale era minimo. Nel campione non si sono verificati decessi perioperatori i feriti o le lesioni al canale semicircolare posteriore. Il metodo presentato dimostra un modo sicuro e affidabile per indurre idropi endolofici ad un punto temporale relativamente rapido di 30 giorni. Le implicazioni cliniche sono che il metodo presentato fornisce un modello affidabile per esplorare ulteriormente le origini della perdita dell’udito a bassa frequenza che possono essere associati idropici endolinfatici.

Introduction

Gli idropi endolofilici sono un allargamento dei media scala. La presenza di idropi endolofilici può essere misurata utilizzando l’area trasversale dei supporti scalari. Si pensa che gli idramici endolofici clinici possano essere associati alla perdita dell’udito neurosensoriale a bassa frequenza, come quella osservata nella malattia di Meniere. Ma l’origine o le sono le origini dell’ipoacusia rimangono poco chiare. Per studiare adeguatamente le origini della perdita dell’udito a bassa frequenza associata agli idramici endolinfatici, è necessario un modello affidabile.

Nel 1965, Kimura e Schuknecht descrissero come indurre idropi endolofici nella cavia usando un approccio intradurale1. La loro tecnica prevedeva l’utilizzo di un approccio fossa cranico posteriore per accedere all’opercolo e alla fossa subarcuate. I passaggi hanno comportato l’incisione della dura, la ritrazione del cervelletto con una soluzione Ringer imbevuta di cotone e la perforazione attraverso il condotto endolizzico e la parte intermedia del sacco endolintico. La cera ossea è stata poi posta nell’opercolo per separare il condotto endolofico dal sacco endolfatico. Il difetto craniotomia è stato chiuso mettendo polvere di gelatina assorbibile (ad esempio, Gelfoam) e riapperificando i muscoli sovrastanti. Prove istologiche di idropi endolinfatici sono state costantemente trovate nei giorni post-operatori 1, 3, 7, 14, 21 e 30, dimostrando che l’approccio intradurale era un metodo affidabile per indurre idropi endolinfatici itologici. Utilizzando lo stesso approccio intradurale di Kimura e Schuknecht, ma con diversi tempi, Salt e DeMott hanno confermato che i supporti scala nel secondo turno della coclea sono stati significativamente ingranditi al giorno 4 e oltre2. Mentre l’effettiva morbilità di indurre una perdita di liquido cerebrospinale (CSF) utilizzando Kimura e l’approccio intradurale di Schuknecht non è stata riportata nello studio originale, la presenza di una perdita di CSF potrebbe aumentare il rischio di meningite. È stato suggerito che la perdita di CSF potrebbe portare ad un deflusso di perilymph, con conseguente espansione temporanea simultanea del volume endolinizzatore nel porcellino d’India3. Un approccio extradurale per indurre idramici endolinatici sarebbe un’opzione più sicura.

Nel 1989, Andrews e Bohmer hanno descritto due approcci chirurgici extraassiali per raggiungere il sacco endolymphatic e il condotto, attraverso un approccio centrale alla fossa cranica o un approccio cranico posteriore, per annientare il sacco endolofico4. Hanno descritto la rimozione dell’opercolo con un trapano di diamante, e poi la perforazione fuori dalla parte intermedia del sacco endolintico o utilizzando un plettro fine per interrompere il sacco endolittico e il condotto. Nel 1993, Lee, Wright e Meyerhoff descrissero un approccio simile, che includeva la perforazione attraverso il sacco endolofico e il condotto, ma differiva in quanto allo stesso tempo ostruivano l’acquedotto cocleare5. Hanno dimostrato la presenza di idropi endolinfatici, come valutato tramite istologia, a quattro settimane dopo aver cancellato il sacco endolittico e ostacolato l’acquedotto cocleare. Megerian et al. è stato il primo a pubblicare un video dimostrando un’annientamento extradurale del sacco e del condotto endolittico che prevedeva la perforazione direttamente sulla porzione mediale dell’operculum per entrare nel sacco endolittico e del condotto6. Hanno dimostrato prove istologiche di idropi endolinfatici in una cavia sacrificata a 28 settimane dopo l’intervento chirurgico, così come la perdita dell’udito nella regione a16kHz 6 . Non si sa se fosse possibile indurre idratico endolittico e perdita dell’udito a bassa frequenza da un momento all’altro utilizzando approcci extramotiviali.

L’obiettivo generale di questa relazione è dimostrare un approccio extradurale per indurre idropi endolincici sperimentali a 30 giorni post-operatori, cancellando il sacco endolofico e ferendo il condotto endolofico con un piccone fine. La logica alla base dell’uso di questa tecnica è il vantaggio di evitare la necessità di perforare sull’osso temporale pettoso, eliminando così il rischio di ferire accidentalmente la dura e causando una perdita di CSF, mitigando la possibilità di ferire il canale semicircolare posteriore e riducendo il rischio di lesioni al sinus sigmoide.

Protocol

Tutte le procedure elencate immediatamente di seguito nella sezione Protocollo sono state condotte come descritto nei protocolli approvati dalla Washington University nel Comitato per la cura e l’uso degli animali istituzionali di St. Louis. 1. Induzione anestetica e monitoraggio dei segni vitali NOT:</ Questo studio ha utilizzato cavie pigmentate di ceppo NIH ottenute da una colonia riproduttiva interna. Utilizzare porcellini d’Indi…

Representative Results

Il metodo presentato ha utilizzato un approccio extradurale per annientare il sacco endolofico e ferire il condotto endolintico con un plettro fine in sette cavie costituito da due maschi e cinque femmine. La durata media dell’intervento chirurgico è stata di 2 ore dall’incisione alla chiusura. Il tempo totale di perforazione variava da 5 a 10 minuti. Fino a 4 ore erano necessarie fino a 4 ore per la cavia per emergere completamente dall’anestesia. Nel campione non sono stati verificati …

Discussion

Il metodo extradurale presentato ha avuto un tasso di successo dell’86% nel raggiungere idrop endolinfatici storici confermati e perdita dell’udito a bassa frequenza. Il metodo ha ottenuto in modo affidabile prove istologiche di idramici enortici dal giorno post-operatorio 30, coerente con studi precedenti che hanno utilizzato un approccio intradurale2. L’importanza del metodo rispetto ai metodi esistenti è che non è necessaria una perdita di CSF, eliminando così una potenziale variabile confus…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ringraziamo Shannon M. Lefler per l’assistenza con le cifre e la Tabella dei Materiali. La ricerca riportata in questa pubblicazione è stata sostenuta dall’Istituto Nazionale di Sordità e Altri Disturbi della Comunicazione all’interno dei National Institutes of Health, attraverso la borsa di studio “Sviluppo di Clinica/Ricercatori in Orfera Accademica”, il numero di premio T32DC000022 (C.V.V.) e da R01 DC014997 (J.T.L. Il contenuto è di esclusiva responsabilità degli autori e non rappresenta necessariamente le opinioni ufficiali dei National Institutes of Health.

Materials

12 mL syringe Henke-Sass Wolf 5100-X00V0
1 mL and 3 mL syringe BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-87 15859152
27.5 butterfly gauge needle Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson) 448407
4-0 suture McKesson 1034507
4×4 gauze sponges Dukal (Ordered form McKesson) 374454
60mL syringe Fisher Sci 22-031-375
Anspach otologic drill Anspach SC2100
atipamezole Zoetis 107204-6
autoclave Fisher sci 15-103-0508
autoclave bags McKesson 524881
bayonet separator Olympus AL 130564
bupivicaine auro Medics Pharma 555150-169-10
clear sterile drape 3M 1020
cotton balls Fisherbrand (ordered from Fisher Sci) 22-456-885
cotton swabs McKesson 508716
diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm Anspach QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD
diaper pad McKesson 945330
disposable 15 blade Swann-Morton 0305
enrofloxacin Hospira 0409-4888-01
epinephrine McKesson 63739-0456
eye ointment Dechra Vet Products 17033-211-38
Freer elevator Grace Medical 215100FX
gelfoam Pfizer (Ordered from McKesson) 82830
hair trimmers Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon) 078400-020-000
iodine scrub Purdue Pharma (ordered from mcKesson) 521243
iris scissors Olympus CL-542114
ketamine Henry Schein Animal Health 55853
lactated ringers B. Braun Medical (ordered from McKesson) 186662
lancet knife by Rosen Grace Medical 151100FX referred to as curette in the text
lubricant Milex (ordered from Cooper Surgical) MX5030
masking tape 3M (ordered from fisher sci 19047259
metal rectangle basin Amazon B07NQDBC6T
needle holder Olympus CR 213015-ENT
needles: 27 gage, 18 gauge BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-48 14-826-5D
neonatal warming isollete Air Borne Life Support Systems 731-1800
operating microscope Carl Zeiss OPMI pico
oxygen tank AirGas OX USP200
pulse ox CapnoTrue (Ordered from Medacx) M-3090112001
rectal probe with heating blanket Harvard Apparatus probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214
red body holder Lichtenhan Lab N/A In-house product
right angle Olympus BV-230337
rosen needle Olympus AM-130566 customized, it is the instrument I use to tear the sac
rubber tubing for O2 administration Fisher Sci 14-171-104
saran wrap Fisher Sci NC9617977
stereotactic head holder WUSTL Instrument Machine Shop N/A In-house product
sterile drapes Cardinal Health 7553
suction tube by Baron Grace Medical 034903FX 034905FX #3 and #5 Suction
tissue forceps adson brown Grace Medical 325112FX
Weitlander retractor Olympus Grace Medical BL200011 100313FX
xylazine Akorn 59399-110-20

References

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J. Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker. Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).
  3. Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study. Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).
  4. Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).
  5. Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).
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check_url/kr/60597?article_type=t

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Cite This Article
Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, C. A., Lichtenhan, J. T. A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig. J. Vis. Exp. (160), e60597, doi:10.3791/60597 (2020).

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