干细胞衍生病毒Ag特异性T淋巴细胞抑制小鼠HBV复制

急性感染后，适应性免疫系统（即体液和细胞免疫）控制与HBV相关的急性肝炎的大部分。然而，在乙肝病毒流行地区的一些人无法消除病毒，随后转化为慢性个体。全球超过25%的慢性病患者（超过2.5亿人）发展为渐进性肝病，导致肝硬化和/或肝细胞癌（HCC）1。因此，尽管现有^疫苗2和许多抗病毒药物正在研制中，但根除持续感染的细胞仍然是一个普遍的健康问题。HBV感染的标准治疗包括IFN-α、核苷和核苷酸类似物。这些制剂具有直接的抗病毒活性和免疫调节能力。然而，HBe抗原（Ag）的血清转化⁺具有抗HBe抗体（Ab）的载体和血清HBV脱氧核糖核酸（DNA）的流失在大约20%的治疗患者中单独出现，病毒的整个免疫控制经核实，HBsAg的剥夺^{不超过5%3。}此外，对治疗的反应往往不持久。使用重组HBs Ag进行预防性疫苗接种在预防感染方面非常有效，但治疗性HBs Ag疫苗接种无效。显然，T细胞介导的免疫反应在控制HBV感染和肝损伤方面起着关键作用;然而，在慢性肝炎患者中，HBV反应性T细胞经常被删除、功能失调或转换耗尽4，5，6。因此，在持续性乙肝病毒感染者中，没有试图通过抗病毒疗法、免疫调节细胞因子或治疗性免疫恢复HBV特异性免疫（即T细胞基免疫）的努力取得了成功。

HBV AG特异性T细胞的收养细胞转移（ACT）是一种有效的治疗方法，旨在最终根除剩余的肝细胞wih HBV^7，8。HBV特异性CTP在HBV感染小鼠中已被证明会导致暂时性、轻度肝炎，肝细胞核糖核酸（RNA）转录本的显著下降。在这些研究中，CTL没有抑制HBV基因的转录，但提高了HBV^转录9的降解。HBV特异性CTL对预防病毒感染和调解HBV10、11的清除非常重要。对于基于ACT的补救措施，HBV特异性T细胞在体外扩张，具有高反应性，用于体内再定居，建议其为理想的方法12、13、14;然而，目前的方法在产生、分离和从患者身上产生、分离和生长适当数量的HBV特异性T细胞的能力方面受到限制，以进行潜在的治疗。

尽管临床试验通过针对受HBV病毒感染的肝细胞的工程T细胞提供细胞治疗的安全性、实用性和前瞻性治疗活性，但人们担心这种不良影响由于错误配对T细胞受体（TCR）15、16、非特异性TCR17的离目标Ag识别和由嵌合Ag受体（CAR）对靶向脱毒性的交叉反应，自体免疫反应发生^18,19与健康组织。目前，转基因T细胞，只有短期的持久性在体内，通常是中间或后期效应T细胞。迄今为止，多能干细胞（PSCs）是唯一可用于产生大量天真的单型Ag特异性T细胞20、21、22、23的来源。诱导PSCs（iPSCs）通过使用多个转录因子的基因转导，从患者的体细胞中转换。因此，iPSC具有与胚胎干细胞（ESCs）24相似的特性。由于具有无限自我更新能力的灵活性和可能性，除了组织替代外，基于iPSC的治疗可以广泛应用于再生医学。此外，iPSC的底层军团可能会显著改善目前的基于细胞的疗法。

该方法的总体目标是从 iPSC（即 iPSC-CTL）生成大量 HBV 特异性 CTL，用于基于 ACT 的免疫治疗。与替代技术的优点是，HBV 特异性 iPSC-CTL 具有单型 TCR 和天真的表型，这导致在 ACT 之后产生更多的记忆 T 细胞发育。证明HBV特异性iPSC-CTL的ACT可增加肝^功能CD8+T细胞的迁移，减少被管理小鼠肝脏和血液中的HBV复制。这种方法揭示了病毒Ag特异性iPSC-CTLs在HBV免疫治疗中的潜在用途，并可能用于生成用于病毒免疫治疗的其他病毒Ag特异性iPSC-T细胞。