Общая цель этой процедуры заключается в получении количественной микроструктурной информации гиппокампа у крысы с легкой черепно-мозговой травмой. Это делается с использованием передового диффузионного взвешенного протокола магнитно-резонансной томографии и анализа параметрических диффузионных карт.
Легкая черепно-мозговая травма (mTBI) является наиболее распространенным типом приобретенных черепно-мозговой травмы. Поскольку пациенты с черепно-мозговой травмой демонстрируют огромную изменчивость и неоднородность (возраст, пол, тип травмы, другие возможные патологии и т.д.), модели животных играют ключевую роль в распутывании факторов, которые являются ограничениями в клинических исследованиях. Они обеспечивают стандартизированную и контролируемую обстановку для изучения биологических механизмов травми и ремонта после ТБИ. Однако не все модели животных эффективно имитируют диффузную и тонкую природу mTBI. Например, широко используемые контролируемые корковые воздействия (CCI) и боковой жидкости ударных травм (LFPI) модели используют краниотомии подвергать мозг и вызвать широкое координационного травмы, которые обычно не видели в mTBI. Таким образом, эти экспериментальные модели не являются действительными для имитации mTBI. Таким образом, соответствующая модель должна использоваться для исследования mTBI. Модель падения веса Marmarou для крыс причиняет подобные микроструктурные изменения и познавательные ухудшения как у пациентов которые выдерживают слабую травму; поэтому эта модель была выбрана для этого протокола. Обычные компьютерной томографии и магнитно-резонансной томографии (МРТ) обычно не показывают никаких повреждений после легкой травмы, потому что mTBI вызывает часто только тонкие и диффузные травмы. С диффузией взвешенных МРТ, можно исследовать микроструктурные свойства ткани мозга, которые могут обеспечить более глубокое понимание микроскопических изменений после легкой травмы. Таким образом, цель этого исследования заключается в получении количественной информации о выбранном регионе интересов (т.е. гиппокамп) для последующей прогрессии заболевания после получения легкой и диффузной черепно-мозговой травмы.
Травматическая черепно-мозговая травма (TBI) получила больше внимания в последние годы, как стало ясно, что эти травмы головного мозга может привести к пожизненной когнитивных, физических, эмоциональных и социальных последствий1. Несмотря на это повышение осведомленности, мягкий TBI (mTBI, или сотрясение мозга) по-прежнему часто занижены и недиагностированы. MTBI был назван молчаливой эпидемии, и лица с историей mTBI показывают более высокие показатели злоупотребления психоактивными веществами или психических проблем2. Несколько пациентов с mTBI выходят на недиагностированные каждый год из-за диффузного и тонкого характера травм, которые часто не видны на обычной компьютерной томографии (КТ) или магнитно-резонансной томографии (МРТ). Отсутствие радиологических доказательств повреждения головного мозга привело к разработке более передовых методов визуализации,таких как диффузионная МРТ, которые более чувствительны к микроструктурным изменениям 3.
Диффузия МРТ позволяет in vivo отображение микроструктуры, и этотметод МРТ был широко использован в исследованиях TBI 4,5,6. От диффузии тензора, дробная анизотропия (FA) и средняя диффузорность (MD) вычисляются для количественной оценки изменений в микроструктурной организации после травмы. Недавние обзоры в mTBI пациентов сообщают об увеличении ВС и уменьшается в MD после травмы, которая может свидетельствовать о аксональной опухоль7. Противоположность, увеличения в MD и уменьшениях в FA также найдены и предложены для того чтобы underlie нарушения в parenchymalструктуре следуя за образованием отека, аксональной дегенерацией, или misalignment волокна/нарушением 8. Эти смешанные выводы могут быть частично объяснены значительной клинической неоднородностью mTBI, вызванной различными типами воздействия и тяжести (например, ускорение вращения, тупая травма силы, травма взрыва или комбинация первого). Однако в настоящее время нет четкого консенсуса в отношении лежащей в основе патологии и биологической/клеточной основы, лежащей в основе изменений в микроструктурной организации.
Модели животных обеспечивают стандартизированную и контролируемую настройку для более детального изучения биологических механизмов травми и ремонта после TBI. Несколько экспериментальных моделей для TBI были разработаны и представляют различные аспекты человека TBI (например, координационный против диффузной травмы или травмы, вызванные вращательных сил)9,10. Обычно используемые модели животных включают контролируемое воздействие корковой (CCI) и боковой жидкости ударных травм (LFPI) модели11,12. Хотя экспериментальные параметры могут быть хорошо контролируемыми, эти модели используют краниотомию для разоблачения мозга. Краниотомии или переломы черепа обычно не видели в mTBI; поэтому эти экспериментальные модели не являются действительными для имитации mTBI. Модель ускорения удара, разработанная Marmarou et al.13, использует вес, который сбрасывается с определенной высоты на голову крысы, которая защищена шлемом. Эта модель животных вызывает аналогичные микроструктурные изменения и когнитивные нарушения, как видно у пациентов, которые поддерживают легкую травму. Таким образом, это Marmarou падение веса модель подходит для исследования изображений биомаркеров для диффузных mTBI14,15.
Этот отчет демонстрирует применение передовой диффузии МРТ в модели крыс mTBI с использованием модели падения веса Marmarou. Первый показано, как вызвать легкую и диффузную травму, и анализ с использованием диффузии тензоризображения (DTI) модель затем предоставляется. Специфическая биологическая информация получена с использованием более продвинутых моделей диффузии (т.е., диффузионная визуализация куртоза (DKI) и модель целостности тракта белого вещества (WMTI). В частности, легкая травма наносится и микроструктурные изменения затем оцениваются в гиппокампе с помощью обычных T2-взвешенных МРТ и передовых диффузионной визуализации протокола.
Поскольку mTBI часто является результатом диффузной и тонкой травмы, которая не показывает никаких отклонений на КТ и обычных МРТ, оценка микроструктурных повреждений после легкой травмы остается проблемой. Поэтому, более передовые методы визуализации необходимы для визуализации в пол…
The authors have nothing to disclose.
Авторы хотели бы поблагодарить Исследовательский фонд – Фландрии (FWO) за поддержку этой работы (Грант номер: G027815N).
Induction of trauma | |||
0.9% NaCl physiologic solution | B Braun | 394496 | |
brass weight 450g | custom made | custom made | diamter 18mm and 210 mm height |
catheter | Terumo | Versatus-W | 26G |
ethilon II | Ethicon | EH7824 | FS-3, 4-0, 3/8, 16mm |
Matrass | Foam to Size | Type E | |
Plexiglas tube | ISPA Plastics | 416564 | M1 PMMA XT GOO tube 25×19 mm (inner diamter 19 mm, minimal length of 1.50 m) |
Preclinical CT scanner | Molecubes | X-cube | |
Steel helmet | custom made | custom made | diameter 10 mm and 3 mm thickness |
Vetbond Tissue Adhesive | 3M | 1469SB | |
Vetergesic (buprenorphin) | EcuPhar | VETERG20 | 0.05 mk/kg |
Xylocaine 2% gel | AstraZeneca | Xylocaine 2% | gel |
Xylocaine (lidocain 2%) | Aspen/AstraZeneca | Xylocaine 2% gel | 100 μl injection |
Diffusion MRI | |||
Preclinical MRI acquisition software | Bruker Biospin MRI GmbH | Z400_PV51_CENTOS55 | ParaVision 5.1 MRI software |
Preclinical MRI scanner | Bruker Biospin MRI GmbH | PharmaScan 70/16 | 7T MRI scanner |
Quadrature volume coil | Bruker Biospin MRI GmbH | RF RES 300 1H 075/040 QSN TR | Model No: 1P T13161C3 |
Small animal physiological monitoring unit | Rapid Biomedical | EKGHR02-0571-043C01 | Unit for respiratory monitoring |
Water-based heating unit | Thermo Fisher Scientific | Haake S 5P | Model No: 1523051 |
Anaesthesia | |||
Anaesthesia movable unit | Veterenary technics | BDO – Medipass, Ijmuiden | |
isoflurane: Isoflo | Zoetis | B506 | |
Oxygen generator | Veterenary technics | 7F-3 | BDO – Medipass, Ijmuiden |
Diffusion image processing | |||
Amide | http://amide.sourceforge.net | Version 1.0.5. | Medical Imaging Data Examiner Toolbox (Loening AM, Gambhir SS, " AMIDE: A Free Software Tool for Multimodality Medical Image Analysis", Molecular Imaging, 2(3):131-137, 2003) |
ExploreDTI | http://www.exploredti.com | Version 4.8.6 | Toolbox for (pre-)processing and analysis of diffusion weighted MR images (Leemans A, Jeurissen B, Sijbers J, and Jones DK. ExploreDTI: a graphical toolbox for processing, analyzing, and visualizing diffusion MR data. In: 17th Annual Meeting of Intl Soc Mag Reson Med, p. 3537, Hawaii, USA, 2009) |
MRtrix3 | http://www.mrtrix.org | Version 3.0_RC3-86-g4b523b41 | Toolbox for (pre-)processing and analysis of diffusion weighted MR images |