원격 실험실 관리: 호흡기 바이러스 진단

1입니다. 설치 참고:만 2 ~ 4 명 “레고 같은” 실험실 단위 배포에 필요 합니다. 최적으로, 4 개인 배포 하는 데 사용할 것 이라고 하지만 유일한 2 가능 합니다. 포크 리프트 트럭 (그림 1A,B) 또는 기타 적당 한 리프팅 장치 컨테이너를 처리 하기 위해 사용 합니다. 적어도 7 톤 리프팅 능력의 포크 리프트 트럭을 사용 하 여 두 가지 유형의 컨테이너24처리. 실험실 단위를 설정 하려면 아무 장애물 방해 적절 한 레이아웃 되도록 평평한 풍경에 약 90 x 60 평방 피트 (27.4 x 18.3 m2)의 패치를 선택 합니다. 사이트 비 후 물 소비와 잠재적인 문제가을이 발생할 수 있습니다에 사이트 배수를 보장 하기 위해서 잘 배수 한 토양을 확인 합니다. 근거는 이전 파괴 되어 있으며 10 kN/dm2의 최소한의 압축 강도의 하드 압축된 한 토양을 사용 합니다. 주변 지역 역의 운반 장치에서 장치에 필요한 장비에 대 한 액세스를 허용 하 고 작업을 수행 하는 데 필요한 지원 장비를 수용 해야 합니다. 단위 또는 단위는 ‘ 전송 모드 ‘에서 선택한 사이트의 중심에 놓고 레벨을 조정 합니다. 각 단위는 6.5% (~ 4도)의 최대 급 사이트에 배포할 수 있도록 4 명의 수평 잭을 갖추고 있습니다. 컨테이너에 대 한 최소 높이 ~ 바닥 배수 및 방전 관 제대로 작동을 보장 하기 위해 6 인치. 하지 확장지 않습니다 잭 12 인치 이상. 잭의 팔을 지원 브래킷을 부착 합니다. 컨테이너 거품 leveler 각 하단 레일의 중심에 배치 하 여 수준 인지 확인 합니다. 그것은 제대로 배치 되었습니다 때까지 단위를 확장 하지 않음! 전체 기능에 대 한 패널을 열어 장치를 확장 합니다. 먼저 두 지원 극을 찾습니다. 높이 거의 높은 컨테이너 단위 지원 극을 연결 합니다. 극 사용자를 패널을 열고 옆 문 열려 지붕 패널의 무게를 지원할 수 있습니다. 안전 클립 고정 패널을 계속 핀 역할입니다. 먼저, 안전 클립 제거 후 들어올린 구멍에서 캠 잠금 핀을 당겨. 컨테이너의 하단 (확장) 측면에 위치한 캠 잠금 레버 왜곡이 레버 뒤에 핀을 배치 합니다. 지붕 패널 1이이 패널 가스는 고려 스트럿츠를 패널 도어는, 일단은 struts를 발표할 예정 이다. 이것 두 지원 극을 사용 하 여 지붕 (패널 1)를 사용자에 대 한 있게 됩니다. 일시적으로 그것을 지원 (그림 4A) 지붕 패널 아래 지원 장 대의 끝을 이동 합니다. 동안에 지원 구멍으로 지붕 패널을 들고 찾아 안전 체인, 컨테이너의 왼쪽 상단에 위치 해 있습니다. 2-3 개인의 도움을 받아 신중 하 게 아래로 드래그 패널 2까지 안전 체인 2 패널의 무게를 들고 바른 종사 하고있다. 가스 스트럿의 주위에 포장 하 여 손으로 끌고 산을 윈 치 스트랩 벨트를 연결 합니다. Note 윈 치 도구가 없는 경우 이전 단계 수동으로 수동으로 유지 하 고 그것을 낮추는 패널의 각 측에 적어도 두 사람과 완료 될 수 있다.주의: 패널의 무게는 260 파운드! 아무 사람이 나 패널 2와 윈 치 사용 방법 항목 확인 드릴, 낮은 패널 (그림 4B) 진행 합니다. 패널 2 인하 완전히 윈 치 스트랩 및 윈 치로 다시 릴을 뽑습니다. 윈 치 제거 하 고 사용 하기 위해 준비에 컨테이너의 반대 측에 그것을 배치. 장치의 양쪽 모두 동일 하 고 장치의 다른 측면에 대 한 위의 동일한 단계를 따릅니다. 첫 번째 측면의 완전 한 배포, 패널 (이 현재 바닥)에 아래로 도달 고 각 측에 적어도 두 사람과 수동으로 들어 패널 3 위쪽에 문과 쪽 (그림 4C)의 전면 벽으로. 두 사람이 제 3 자 지원 극을 제거 하는 동안 패널 3를 유지 됩니다.주의: 아무도 장치 내부 또는 패널 3까지 지붕 아래 벽은 장소에! 패널 3 내부에서 두 개의 래치 찾아서 안전 결박을 사용 하는 장소에 잠금. 검은 지붕 패널 고무 가스 켓은 얼굴의 내부를 꺼내 다는 것을 확인 하십시오. 이 비와 장치에 다른 물 침투를 방지 하기 위해 수행 되어야 합니다. 컨테이너의 내부에서 패널 4를 잠금 해제. 일단, 잠금 해제 문 처럼 열려 스윙 있도록 패널 4 (그림 4D) 밖으로 밀어. 잠금 두 안전에 래치 벽 내부. 패널 5의 잠금을 해제 하 고 패널 4에 대 한 동일한 단계를 반복 합니다. 이 패널 같은 내부 안전 래치를 확보. 일단 전체 단위 인테리어 잠긴 다시 바닥까지는 턴버클을 강화 하 고 끝 벽은 봉인 하 고 있다. 컨테이너의 양쪽 모두 안전 하 게 확장 하 고, 일단 탈취를 확인 하 고 어떤 필요한 조정 이동에서 발생 했을 수 있습니다. 쉼터 주간 수준 수를 확인 합니다. (비 또는 바람) 기상 후 컨테이너에 잭 검사 하 고 그에 따라 조정 합니다. 연결 가능한 실험실 모듈 사용 (그림 5)에 대 한 계획 하는 경우 두 번째 컨테이너를 확장 합니다. 전원 및 물 공급 장치를 연결 합니다. 디젤 발전기 차단기 상자를 통해 장치에 연결의 설치에 대 한 자세한 지침에 따라 수동24에서 찾을 수 있습니다.참고: 원격 실험실 단위 지금 배포 됩니다. 단위의 내부 비 축소 볼륨 특정 진단 테스트에 필요한 장비 및 실험실 공급의 최소를 저장할 수 있습니다. BSL-3 모듈에 대 한 가압 시스템의 설치 세부24 에서 설명 하며 추가 품질 관리. 24 2. 개인 보호 및 기본적인 실험실 작업에 대 한 검사 목록 참고: 일반 안전 및 실험실 테스트 요구 사항 단계 중에 오류가 전체 테스트 프로세스의 결과 무효화 될 수 있습니다. 설치 된 실험실 단위 입력을 준비 하기 전에 모든 BSL-2 또는 BSL-3 안전 요구 사항에 대 한 차지는 하는 것을 확인: 드레싱 적절 한 개인 보호 장비 (PPE)로 손, 세척, 장갑 착용 하 고는 어떤 작업을 실행 사용 됩니다. BSL 2 lab와 BSL-3 모듈 (조립된 글러브 박스 룸-부정적인 압력 및 PCR 실-긍정적인 압력)에서 실행 되는 테스트 중 개인 보호를 위한 안전 요구 사항을 포함 하는 표 1 에서 검사 목록을 따릅니다. 모든 작업 공간 및 실험실에서 공급을 오염을. 표 백제에 노출 하는 모든 영역을 청소 70% 에탄올을 사용 또한 염소 솔루션 (0.5%)로 알려진 액체 표 백제를 사용 하 여 작업 영역 및 소모품, 오염을 계획, 표 백제로 수 혼합 유독 가스를 만들려는 작업 영역에 다른 화학 물질과. 그들의 자신의 지정된 폐기물 bin에 모든 표 백제 제품을 삭제 합니다. 시작 하기 전에 실험실 단위에서 작동 하도록, 될 그것의 배치 및 레이아웃에 익숙해져야 합니다. 글러브 박스 (GB) 룸에서 샘플 처리에 대 한 엄격한 규칙이 적용 됩니다. GB 부정적인 압력은! 장갑 상자를 작동, 제조업체의 지침을 확인 합니다. 여러 소스 글러브 박스 작업25에 상세한 자습서를 제공합니다.참고:이 분석 결과의 목적은 표본에서 추출 하 고 있으면, ribonucleic 산 (RNA) 또는 deoxyribonucleic 산 (DNA), 정화입니다. 추출 된 RNA/DNA 존재 또는 부재의 대상된 바이러스 성 병원 체-인플루엔자 (INF)를 검색할 실시간 RT-PCR에 의해 테스트 됩니다. 3. 빠른 인플루엔자 바이러스 진단 RT-PCR에 의해 BSL-2 실험실 시설에 접수 및 등록 PPE에 대 한 체크 리스트를 적용 (섹션 2 참조). INF는 BSL-2 연습 필요한 클래스 2 에이전트입니다. BSL-2 연습을 위한 적절 한 보호구는 필요 합니다. 또한, 착용 안전 유리 그리고 잠재적인 피부 노출을 최소화 하기 위해 수 갑을 차고 슬리브 랩 코트. 에 따르면 세계 보건 기구 (WHO)의 권고26, 사용 살 균 Dacron 또는 레이 온 면봉 플라스틱 샤프트로 호흡기에서 샘플링에 대 한.참고: 면 또는 칼슘 alginate 면봉, 또는 나무 막대기와 면봉을 포함할 수 있습니다 몇 가지 바이러스를 비활성화 하 고 PCR를 억제 하는 화합물26,27테스트. 샘플 면봉은 환자에서 찍은, 필드 또는 진료소에서 그들을 실험실 시설에 수송. 통과 창; 통해 전송 샘플 이 창 양쪽에서 열 수 없습니다. 통과 창에서 1 분 뒤에 70% 에탄올에 대 한 표 백제와 함께 샘플을 포함 하는 튜브를 스프레이 하 고 실험실 단위에 진입 하기 전에 적절 한 정화를 제공 하기 위해 건조 닦아냅니다. 침수, 다음 장치 내부 실험실 기술자 것 이다 통과 창 열고 등록 표 백제 컨테이너에서 샘플을 수집 합니다. 일반적으로, 샘플을 전달 하는 사람과 샘플을 추출 하는 사람이 동일 하지는. 통과 창 열고 등록 샘플을 수집 합니다. 표 백제 및 에탄올 소독 된 모든 샘플 아래로 닦으십시오. 표 백제 70% 에탄올 솔루션 다음 통과 창 내부를 닦아. 인터랙티브 태블릿 기반 시스템 또는 노트북 샘플을 등록 합니다. 다음 정보는 샘플을 식별:수집 날짜-발병 날짜-환자의 나이 및 성별-견본 유형 (예:., 비 강 면봉)고유 식별자-기타 관련 정보 바코드를 사용 하 여 튜브를 라벨에 대 한. 각 샘플 튜브와 aliquots를 지정 하는 4 개의 빈 튜브에 바코드를 추가 합니다. 환기 후드에 샘플을 이동 합니다. 각 튜브에 바코드를 스캔 하 고 적절 한 샘플 식별 정보가 태블릿 기반 시스템 또는 노트북 화면에 표시 됩니다 있는지 확인 하십시오. 바코드를 사용할 수 없는 경우, 알코올 저항 마커를 사용 합니다. 항상 자체 유리병, 결코이 모자 처리 하는 동안 전환 받을 수 있습니다! 등록 과정을 완료 합니다. 샘플 약 수 일단 테스트 튜브 되었습니다, 그리고 인증된 클래스 2 biosafety 내각 표본 처리 하 고 샘플의 aliquots를 사용 하 여. 한 약 수 즉각적인 테스트에 사용할 수 있습니다 그리고 다른 참조 목적 또는 재검사에 대 한 유지. 표본 비 강 면봉 팁 바이러스 성 전송 매체에 도착, 30 s 및 짜기 매체에 면봉 팁 꼬이게 유리병의 측에 대하여 그것. 다음 매체와 유해 폐기물 프로토콜 그것의 dispose에서 그것을 제거 (적절 하 게 폐기, 압력솥 중단 1: 100 염소 솔루션으로).참고: 저장 매체의 작은 볼륨 0.5 mL 이다. 따라서, 3 mL 샘플 6 aliquots (하위 샘플)으로 나눌 수 있습니다. 0.5 mL의 각 샘플에 대 한 1 mL cryo-스토리지 튜브를 사용 하 여 냉동된 매체에 대 한 추가 볼륨을 제공. Aliquots 때, 각 샘플에 대 한 신선한 살 균 또는 일회용 펫을 사용 하 고 상호 오염을 피하기 위하여 유해 폐기물 용기에 그들을 삭제. 모든 튜브는 단단히 밀봉 닫히고 다는 것을 확인 하십시오. 즉각적인 추출에 대 한 표본 당 한 약 수를 이용 하 고 냉동 실에 다른 aliquots를 저장 (그것으로-80 ° C에 이다 호흡 견본) 미래 사용을 위해. 일 역을 이동 하기 전에 모든 작업 표면과 장비 70% 에탄올 솔루션 다음 표 백제로 청소. 추출 및 정화 보장 테스트, 이동의 품질은 바코드를 PCR 샘플 표본 추출에 대 한 지정 된 작업 역 (BSL-2 안전 캐비닛) 지역 처리에서 aliquots. 이 안전 캐비닛는 펫 샘플의 처리에 대 한 별도 집합이 있습니다. 바이러스 성 RNA 미니 키트를 사용 하 여 RNA 샘플의 추출. 스핀 프로토콜에 의해 바이러스 성 RNA의 정화에 대 한 제조업체의 지침을 따릅니다. 샘플을 추출 하는 데 필요한 수에 따라 마스터 믹스를 준비 합니다. 실 온에서 샘플 및 세포의 용 해 버퍼 마스터 믹스를 유지. 추출 하는 샘플 수를 준비 합니다. 바코드 번호와 고유 식별자 마이크로 원심 튜브 1.5 mL를 레이블을 지정 합니다. 설정 560 µ L. 피 펫 깨끗 한 피 펫 팁을 적용 합니다. 각 이라는 튜브에 세포의 용 해 버퍼의 560 µ L를 추가 합니다. 제거 팁입니다. 깨끗 한 피 펫 팁을 적용 합니다. 샘플의 140 µ L를 추가 합니다. 오래 된 삭제 하 고 깨끗 한 피 펫 팁을 적용 합니다. 다른 예제와 반복. 깨끗 한 피 펫 팁을 적용 합니다. 부정적인 통제 관을 140 µ L 버퍼를 추가 합니다. 안전 하 게 각 튜브를 닫습니다. 펄스-소용돌이 샘플 aliquot 2 15 미 반복 및 제어 관 세포의 용 해 버퍼 aliquot 1 예제. 마이크로-원심 분리기 각 예제 5 미 품 실 온에서 10 분에 대 한 샘플. 외피의 10 분 후 다시 튜브 각 튜브 뚜껑 내부에서 모든 상품을 제거를 원심. 샘플을 에탄올 솔루션의 560 µ L를 추가 합니다. 피 펫 팁을 변경 합니다. 어떤 나머지 또는 추가 샘플 반복 합니다. 각 샘플 튜브를 안전 하 게 닫고 펄스-소용돌이 각 샘플 15 미 마이크로 원심 분리기 샘플 5 s. 스핀 열에 혼합물을 적용 합니다. 깨끗 한 2 mL 컬렉션 튜브를 얻을. 스핀 열을 추가 하 고 라벨 샘플을 일치 하도록. 일치 하는 열에 따라 샘플의 630 µ L를 전송 합니다. 모자를 보호 하 고는 원심 분리기로 이동. 균등 하 게 원심 분리기에 샘플을 배포 합니다. 세포의 용 해 버퍼를 제거 하는 1 분 동안 6000 × g 에서 원심. 워크 스테이션에 반환 합니다. 컬렉션 튜브를 교체 합니다. 나머지 세포의 용 해 버퍼를 추가 하 고 원심 분리 단계를 반복 합니다. 원래 aliquot 샘플 튜브를 삭제 합니다. eluate 처분 하 고 2 개의 버퍼와 스핀 열을 씻어. 버퍼 AW1의 500 µ L를 적용 합니다. 모든 예제와 반복. 1 분에 대 한 모든 샘플 및 6000 × g 에서 원심 분리기의 모자를 보안 합니다. 두 번째 버퍼 AW2와 반복 하 고 3 분 20000 × g 에서 원심. 마지막으로 차입 버퍼를 추가 하 여 RNA elute. 깨끗 한 1.5 mL 튜브에 넣고 열 열 열고 1 분, 1 분 동안 6000 x g 에서 원심 분리기에 대 한 실 온에서 60 µ L 버퍼 AVE. 품 어의 추가. 샘플 이제 PCR 분석 준비 되어 있다입니다. PCR 증폭 및 탐지 PCR를 위한 지정 된 별도 영역에서 PCR 증폭을 수행 합니다. 제조업체의 지침에 따라 한 단계 절차에 대 한 PCR 프로토콜을 사용 하 여 바이러스 성 대상의 PCR 증폭을 실시 합니다. Note, 마스터 믹스 바이러스 특정 뇌관, 프로브, 2 x RT-PCR 버퍼 및 RT-PCR 효소를 사용 하 여 이루어집니다. 접시 또는 튜브를 마스터 믹스를 추가 하 고 추가 하 고 (섹션 4.4 참조) 개별 샘플을 혼합. PCR 기계에 접시를 전송 하 고 바이러스 성 대상 확대 조건에 따라 실행 합니다. 샘플은 PCR 악기에 로드 되 면 실행을 완료 하는 데 약 90 분 걸립니다. 장비 사용 후 유지 보수 표 2에 따라 장비 사용 후 정기적이 고 주기적인 유지 관리를 수행 합니다. 4. 빠른 인플루엔자 바이러스 진단 RT-PCR에 의해 BSL-3 실험실 시설에 참고: BSL-3 조건 실험 프로토콜 그대로 유지 됩니다, 하지만 안전 조치 아무것도 위에 우선 합니다. BSL-3 실험실에 들어가기 전에 봐 투명 창을 통해 반드시 부정적인 압력 글러브 박스 단위에 설립 되었습니다. 그것은 벽에 핑크 볼 표시 되 면 부정적인 압력 설립 되었습니다 분명 있을 것입니다. 접수 및 등록 부정적인 압력 설정 된 후 문을 열고 단위를 입력 합니다. 즉시 손 세척 하 고 PPE와 함께 진행. PPE 및 워크플로 BSL-3에 대 한 체크 리스트를 적용 (섹션 2 참조). 다음 순서에 따라 보호구를 씌우고 진행: 장갑, 가운, 신발 커버, 마스크, 얼굴 방패, 장갑의 두 번째 쌍에서. 몸 전체를 보호 하는 전체 드레스 입고 하는 것이 좋습니다. 컴퓨터를 켜고 안정화 장갑 상자에 압력을 허용. 표 백제 스프레이 솔루션을 사용 하 여 모든 지역 및 내부 및 외부 장갑 상자 사용할 수 공급 오염을. 표 백제 표 백제만 용기에 폐기물의 처분. 표 백제에 대 한 모든 영역을 청소 사용 70% 에탄올 솔루션 사용 되었습니다. 샘플 통과 창을 통해 전송.참고: 통과 창에서 삭제 된 전에 튜브 샘플을 포함 하는 특히 1-2 분에 대 한 차 아 염소 산 목욕에 잠수 하 여 소독 표 백제 솔루션 샘플 스프레이, 그들을 받기 전에 적어도 1 분 동안 혼자 고 통과 두고 BSL-3 유닛 내부. 받는 사람이 외부에서 샘플을 전달 하는 사람이 BSL-3 실험실 내부 샘플 추출 해서는 안됩니다 같은. BSL-3 장치 내부 샘플을 수신 하 고는 등록을 진행 하 고 단계를 표시 하기 전에 그들을 청소. 인터랙티브 태블릿 기반 시스템 또는 노트북 샘플을 등록 합니다. 다음 정보는 샘플을 식별 (3.1.5 절 참조). 바코드를 사용 하 여 튜브를 라벨에 대 한. 바코드를 사용할 수 없는 경우, 알코올 저항 마커를 사용 합니다.참고: 항상 자체 유리병, 결코이 모자 처리 하는 동안 전환 받을 수 있습니다! 샘플 약 수 일단 샘플 등록 하 고 튜브 분류 되었습니다, 글러브 박스 안쪽에서 샘플을 검색 하기 위해 공기 잠긴된 트레이 통해 인증된 장갑 상자에 샘플을 놓습니다. 문을 닫으세요. 다음 샘플을 검색 하기 위해 장갑 상자를 통해 다른 문을 엽니다. 열지 마십시오 두 문을 한 번에. 열고 안전 조치에 대 한 두 개의 서로 다른 단계에서 각 문을 닫습니다. UV-C 조명 설정. 일단 샘플 글러브 박스 내부에 안전 하 게 이동 되었습니다, 장갑 상자에 예제 aliquots를 만드는 앞에서 설명한 단계를 수행 합니다. 샘플의 한 약 수 즉각적인 테스트에 사용할 수 있습니다 그리고 다른 참조 목적 또는 재검사에 대 한 유지. 견본 비 강 면봉 팁 바이러스 성 전송 매체에 도착 한다. 견본을가지고 고 각 유리병에 넣어. 면봉 끝 30 s 및 짜기 위한 매체에서 저 매체에서 그것을 제거 하 고 유해 폐기물 프로토콜을 활용 하 여 그것을 처분 하기 전에 유리병의 측에 대하여 그것은 적절 하 게 폐기, 오토 클레이 브 (1: 100 염소 솔루션으로 걸어).참고: 저장 매체의 작은 볼륨 0.5 mL,이 목적을 위해 사용 1 mL 튜브입니다. 따라서, 3 mL 샘플 6 aliquots (하위 샘플)으로 나눌 수 있습니다. 각 샘플에 대 한 신선한 살 균 또는 일회용 펫을 사용 하 고 유해 폐기물로 폐기. 일단 샘플은 aliquoted, 밀폐 용기에 샘플을 이동 합니다. 보호 튜브를 닫고 장갑 상자에서 제거 합니다. 글로브 박스 내에서 생물 학적 쓰레기 봉투 닫고 교차 오염을 피하기 위하여 새로운 쓰레기 봉투를 준비 합니다. 글러브 박스 작업 후 5 분 및 70% 에탄올 솔루션에 대 한 표 백제를 적용 오염을 즉각적인 분석을 위한 견본 당 한 약 수를 이용 하 고 그것이 호흡 견본-80 ° C에서 냉동 실에 다른 사람을 저장. 오염 테스트를 위한 한 약 수를 유지, 저장에 대 한 장갑 상자에서 모든 샘플-80 ° C 냉동 고에 이동 합니다. 추출 및 정화 후 오염, 글러브 박스에 다시 영역을 처리 하는 견본에서 PCR 분석에 필요한 바코드 샘플 aliquots 이동 합니다. 글러브 박스에서 추출 절차에 대 한 모든 세포 단계를 수행 합니다. 바이러스 성 RNA 미니 키트를 사용 하 여 제조업체의 지침에 따라 RNA 샘플의 추출. 제조업체의 지침에 스핀 프로토콜에 의해 바이러스 성 RNA의 정화에 대 한 단계별 지침을 따릅니다. 추출 하는 샘플 수를 준비 합니다. 바코드 번호와 고유 식별자 마이크로 원심 튜브 1.5 mL를 레이블을 지정 합니다. 샘플 및 펄스 소용돌이의 140 µ L에 세포의 용 해 버퍼의 560 µ L를 추가 합니다. 실 온에서 10 분 동안 품 어.참고: 비활성화 절차 추출 되는 BSL-3 병원 체의 종류에 따라 다를 수 있습니다 그리고 어떤 경우에 더 비활성화 필요할 수 있습니다. 세포 단계 후 단단히 밀봉 각 샘플에 고 잠겨 가압된 공기 통로 (경우는 원심 분리기 장갑 상자 밖에 서) 합니다. Biosafety 절차의 나머지 부분에 대 한 캐비닛으로 lysed 샘플을 전송 합니다.참고: 장갑 상자 또는 BSL-3 병원 체 및 필요한 프로토콜에 따른 생물 안전 캐비닛 뒤 글러브 박스에서 추출 및 RNA의 정화에 대 한 절차를 완료할 수 있습니다. 작업 영역 및 표 백제를 사용 하 여 다시 글러브 박스에서 공급 오염을 확인 하 고 모든 영역을 청소 70% 에탄올 솔루션 이전 표 백제에 노출. 3.3.6-3.3.10 세척 및 RNA의 정화에 대 한 절의 단계를 따릅니다. 추출 후 PCR 분석에 대 한 통과 창에 샘플을 전송 합니다. 샘플을 제거 하 고 전송, 후 제 2 항에 따라 글러브 박스, 밖에 서 실험실 작업을 오염을. PPE를 제거 하기 전에 공기 순환 장치에 안전 하 게 필터링 PPE를 제거 하기 시작 하기 전에 사이클의 적절 한 수에 도달 될 때까지 기다립니다. 제거 하 고 모든 PPE의 PPE에 삭제 후 즉시 컨테이너 낭비, 제 2 항에 따라 단위, 종료 하기 전에 비누와 물으로 실험실에 손 세척을 진행. PCR 증폭 및 탐지참고: PCR 확대는 PCR를 위해 지정 및 통과 창을 통해 장갑 상자 영역 연결 별도 영역에서 수행 됩니다. 작업 영역 및 공급 시험 전에 소독 해야 합니다. 통과 창에서 추출 된 RNA 샘플을 제거 합니다. 1 단계 PCR 프로토콜을 사용 하 여 바이러스 성 대상의 PCR 증폭을 수행 합니다. 바이러스 특정 뇌관, 프로브, 2 x RT-PCR 버퍼 및 RT-PCR 효소를 사용 하 여 마스터 믹스를 준비 합니다. 다음 구성 요소 1.5 mL 튜브를 사용 하 여 각 대상된 분석 결과 대 한: 물, 뇌관 및 프로브, 2 x 버퍼 및 RT-PCR 효소. 와 동 그리고 스핀 마스터 믹스입니다. 약 수 지구 튜브의 각 마스터 믹스. 일단 마스터 믹스를 준비 권장된 온도에 저장에 PCR 키트를 반환 합니다. 각 스트립 튜브 사이 별도 팁을 사용 하 여 스트립 튜브의 각 개별 샘플을 추가 합니다. 샘플 접시 또는 1 분에 1500 rpm에서 튜브를 회전 합니다. 샘플 실시간 PCR 장치에 로드 될 준비가 되었습니다. PCR 악기 샘플 접시를 전송 하 고 바이러스 성 대상 확대 조건에 따라 기계를 실행 합니다. 그것은 하나의 실행을 완료 하는 데 약 90 분 걸립니다. 결과 수집 하 고 실험실을 떠나, 전에 PPE를 제거 하 고 적절 하 게 제 2 항에 따라 각 워크스테이션 및 다음 진단 테스트를 위한 준비를 오염을 제거 합니다. 장비 사용 후 유지 보수 표 2에 따라 장비 사용 후 정기적이 고 주기적인 유지 관리를 수행 합니다.참고: 전체 진단 처리 시간은 약 4 시간 이다. 추출 시간 및 시간을 설정 하는 PCR, 샘플의 수에 따라 다를 수 있습니다 그리고 진단 테스트 4-5 시간 이상 대응 하 게 걸릴 수 있습니다.