Listeria monocytogenes Infectie van de hersenen

De gram-positieve bacterie Listeria monocytogenes is een facultatief intracellulaire pathogenen en één van de meeste dodelijke voedsel overgedragen ziekteverwekkers wereldwijd. Inname van L. monocytogenes besmet voedsel kan leiden tot listeriose bij de mens, een ernstige invasieve ziekte gericht op voornamelijk zwangere vrouwen, pasgeborenen, de ouderen en immuungecompromitteerde personen-¹. L. monocytogenes behoort tot de belangrijkste doodsoorzaken door een ziekteverwekker van voedsel in de VS en case fatality tarieven van listeriose zijn zo hoog als 20-30%, de hoogste voor alle voedsel overgedragen ziekteverwekkers². Geen vaccin bestaat momenteel voor L. monocytogenes en het vermogen van bacteriën om effectief verspreiden naar distale organen en de hersenen door overschrijding van de bloed – hersenbarrière (BBB) kan leiden tot levensbedreigende meningitis en kolonisatie van de hersenen^{3 , 4 , 5 , 6}. bacteriële meningitis is meestal ernstig; terwijl de meeste mensen die behandeling ontvangen herstellen, infecties kunnen leiden tot ernstige complicaties, bijvoorbeeld, schade aan de hersenen, verlies van het gehoor of leerstoornissen bij kinderen. L. monocytogenes is voorspeld ter verantwoording voor ten minste 10% van alle communautaire verworven meningitis in de VS⁷.

Het is een belangrijke route voor bacteriële verspreiding aan de hersenen en hersenvliezen via de bloedbaan. Bacteriën in omloop in de bloedvaten in de hersenen zijn in staat om over te steken de BBB om infectie van de hersenen veroorzaken. De BBB is een zeer gevacuoliseerd barrière-systeem dat de hersenen beschermt tegen lichaamsvreemde deeltjes circuleren in het bloed. Endotheliale cellen vormen een laag die de binnenkant van de bloedvaten^8,9lijnen. Naast L. monocytogeneskunnen meerdere bacteriële pathogenen zoals Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, Escherichia colien Haemophilus influenzae type b (Hib) koloniseren de hersenen door overschrijding van de BBB^3,4,5,6. Bij de behandeling van bacteriële lasten in de hersenen van besmette muizen, is het echter belangrijk om te bepalen dat of bacteriën de BBB gekruist hebben, de bacteriële last in de hersenen anders bacteriën die zich nog in de bloedvaten van de hersenen kan vertegenwoordigen. Het is dus noodzakelijk om te perfuse van de muizen van alle bloed voorafgaand aan de vaststelling van de kolonie-vormende eenheden (kve) van hersenen homogenates.

In deze studie beschrijven we in vivo methoden te onderzoeken van L. monocytogenes infectie van de hersenen. We hebben voor de hier beschreven methoden, L. monocytogenes stam 10403S gebruikt. L. monocytogenes 10403S is één van de meest gebruikte laboratorium spanningen te bestuderen van systemische listeriose in de muismodel van infectie¹⁰. Dit protocol is gebaseerd op standaard intraveneuze injectie van L. monocytogenes gevolgd door perfusie van de muizen. Een schematisch overzicht van het protocol van de infectie in muizen is afgebeeld in Figuur 1. L. monocytogenes-besmette hersenen en andere organen van niet-geperfundeerd of geperfundeerd muizen werden verzameld en de lasten van de bacteriële orgel bepaald. Deze methoden zijn nuttig voor niet alleen bepalen totale bacteriële kolonisatie van de hersenen in besmette dieren, maar zijn ook nuttig om te bepalen of de bacteriën de BBB in vivo te bemiddelen invasie van de hersenen zijn doorgedrongen. Het is belangrijk om te benadrukken dat dit laboratorium protocol moet worden uitgevoerd na overleg met de relevante institutionele bioveiligheid Comité en dier Facilitair management.