Meten van de Hypopharyngeal de grootte van de Acinus van de klier in de honingbij (Apis mellifera) werknemers

Bijen zijn essentieel voor de landbouw omdat ze bestuiven een scala aan gewassen die worden verbruikt door mens en dier. Veel aandacht heeft besteed aan de daling van de bijenvolken honing als kolonie verliezen zweven rond 30-40% per jaar in de Verenigde Staten¹ en 10 – 15% in Europa^2,3. Meerdere factoren, met inbegrip van beperkte toegang tot hoge kwaliteit ruwvoer, waarschijnlijk akte samen om de negatieve invloed op de gezondheid van de bijen honing. Monocultuur, droogte, onhoudbaar bijenteelt praktijken en andere factoren verlagen de diversiteit en hoeveelheid natuurlijke pollens beschikbaar tot kolonies^4,5. Omdat bijen bijna al hun dieet eiwitten en lipiden stuifmeel ontlenen, kunt individu en kolonie gezondheid ernstig beperken door minder toegang tot stuifmeel.

De hypopharyngeal klieren zijn secretoire structuren, gelegen in de bee’s hoofd tussen de ogen en de hersenen⁶. Onder normale omstandigheden, de ontwikkelings- en functionele traject van de klieren spiegel die van de bijen ze bevinden zich in. Bij ongeveer 5 – 10 dagen oud presteert de honingbij verpleging gedrag in de korf. Op dit zelfde moment bereiken de hypopharyngeal klieren hun piek grootte en secretoire capaciteit, productie van de belangrijke eiwitoplossing van het brood eten of jelly gevoed aan de ontwikkeling van larven en andere volwassenen, zoals de koningin. De klieren op de grootte van deze piek lijken op een tros druiven waar elke druif een discrete kwab-structuur die bekend staat als de acinus is (meervoud: acini). Als de werknemer bee leeftijden en op verschillende taken in de component neemt, de hypopharyngeal klieren krimpen en nemen over de verschillende functies, zoals het breken van de suiker in de nectar^7,8. De hypopharyngeal klieren zijn daarom gecorreleerd met het tijdperk van de bijen en hun leeftijd-geassocieerde taak.

Verpleegkundige hypopharyngeal klier grootte is gevoelig voor de kwaliteit en kwantiteit van de eiwitten in hun dieet^9,10,11. Als verpleegkundige bijen goed gevoed zijn, zijn hun klieren groot. Overwegende dat de klieren klein zijn wanneer de honingbij is beroofd van stuifmeel, met name in de eerste week van volwassen ontwikkeling. Om te bepalen van de voedingstoestand van een verpleegkundige bee, onderzoekers meestal meten de hypopharyngeal klieren, hetzij door het rechtstreeks meten van de klier acinus grootte^11,12,13,14 of eiwit^15,16 -gehalte of door het meten van het eiwit gehalte¹¹ vers gewicht¹⁷ van de gehele kop, waar zij zich bevinden. Elke methode heeft zijn eigen voors en tegens. Wij verkiezen de resolutie verkregen voor het meten van de klier acini, hoewel deze methode uitdagend op twee belangrijke manieren zijn kan. De eerste uitdaging is het correct identificeren en ontleden de klier. De tweede is het verkrijgen van een nauwkeurige maatstaf voor elke acinus. Onder een ontleden lichte Microscoop, kunnen de klieren verschijnen duidelijk of melkachtig wit en de grenzen van de acini moeilijk te definiëren. Met hulpmiddelen voor het beter definiëren van de rand van de acini, en om de kans voor het verkrijgen van nauwkeurige klier metingen te vergroten is gunstig voor iedereen studeren honing honingbij voeding.

Hier tonen we interesse onderzoekers hoe om te ontleden, vlekken, beeld, en hypopharyngeal klieren meten zodat nauwkeurige metingen van acinus grootte kunnen worden bereikt. De methode die we beschrijven biedt onderzoekers een eenvoudig, accuraat en repliceerbaar methode voor het bereiken van meerdere klier metingen in een relatief korte periode van tijd zodra de experimentator voldoende wordt beoefend. Een kon vertrouwen het meten van de klieren van bijna 10 personen in iets meer dan een uur. Wij bieden de details over de methode en de materialen die nodig zijn voor het verkrijgen van deze metingen. De belangrijkste aspecten van de hieronder beschreven methoden zijn de juiste dissectie en kleuring van de klieren. Hoewel we de vergrote beelden vastleggen en meten van de acini met commerciële software, kunnen de methoden die we presenteren gemakkelijk worden aangepast aan andere platformen¹⁸.